SIRT-1、NLRP3 炎性体和 LncRNA 对吸烟者的非手术牙周治疗

研究将分为4组：非吸烟牙周炎组（NSP）、吸烟牙周炎组（SP）、非吸烟健康对照组（HC）和吸烟健康对照组（HCS）。

研究中的牙周炎组（NSP和SP）将包括根据2017年牙周病和种植体周围疾病分类世界研讨会的共识报告临床诊断为II期和III期、广泛性、B、C级牙周炎的患者，以及条件和系统健康的个体。 临床附着损失超过 30% 的部位≥3 毫米、至少六颗牙齿探诊深度≥5 毫米、以及放射线骨损失延伸至或超过冠状三分之一牙根中三分之一的患者将被包括在内。 牙周病相关牙齿缺失≤4颗牙齿的患者将被纳入其中。 根据全景X光片证实的疾病进展的直接证据以及与生物膜积累成比例的间接破坏的证据，疾病进展率将被分级为B或C级。 在吸烟牙周炎组（SP）和吸烟健康组（HCS）中，报告每天吸烟超过 10 支且持续时间超过 5 年的参与者将被纳入其中，而非吸烟组（NSP 和 HCS）中的参与者将包括那些每天吸烟超过 10 支且持续时间超过 5 年的参与者。据报道从不吸烟。

临床测量和非手术牙周治疗

最初和 NSPT 后 3 个月将收集所有患者的唾液和血清样本。 还将在最初和第 3 个月记录临床参数。 将在每颗牙齿的四个部位记录牙菌斑指数 (PI) 和牙龈指数 (GI)。 将在六个部位详细记录每颗牙齿的全口探诊深度 (PD) 和临床附着水平 (CAL)，并使用二元评分系统在探诊后 20 秒内记录存在或不存在出血区域的百分比。 经过校准的牙周病学家 (ZTE) 将使用手动探测记录所有临床参数。 在开始对一小部分试点人群进行研究之前，将提供检查员校准，以实现检查员内部一致的准确性。 收集基线样本和临床参数记录后，所有患者将接受初始牙周治疗，包括患者教育、全口洁牙和根面平整 (SRP)，以及由同一位经验丰富的临床医生 (ZTE) 提供的口腔卫生指导。

实验室测量

每位患者将被指示在采样前 12 小时内禁食、禁水和保持口腔卫生。 牙科检查前早上 8:00 至 10:00 期间将采集每位患者的血清和唾液样本。

血液采样：在研究范围内，牙周病科的专家护士将从每个人的肘前静脉采集总共 5 mL 的血液。

对于血清取样，将进行静脉穿刺，收集血样，立即在冰上冷却，并在4℃下离心（800rpm，10分钟）。 采集唾液样本后，立即在 4°C 下离心（1000 rpm，2 分钟）。 采样后，血清和唾液样本将储存在 -80°C 下直至分析。 NLRP3、ASC、caspase-1、IL-18、IL-1beta、TNF-alfa、IL-10、TGF-beta 和 SIRT-1 的浓度将通过特定的酶联免疫吸附测定 (ELISA) 试剂盒进行分析血清和唾液样本。 LncRNA SNHG5 和 MEG3 将使用实时聚合酶链式反应 (RT-PCR) 进行检查。

将使用 RT-PCR 评估 PMBC 中的 IL-18、IL-1β、TNF-α、IL-10、TGF-β、NLRP3、SIRT-1、lncRNA SNHG5 和 MEG3 水平。 每个试剂盒的所有分析步骤都将使用制造商推荐的方案进行评估。

统计分析：

将使用市售软件（SPSS 22.0版，SPSS）进行统计分析。 在本研究中，将使用 <0.05 的显着性值（p 值）。 本研究被设计为一项前瞻性对照临床试验。 研究的样本量是使用 R 统计语言程序（版本 4.1.2； R 统计计算基金会，奥地利维也纳； http://www.r-project.org）。 计划每组至少包括 25 个人，进行单向方差分析，显着性水平为 5%，统计功效为 80%，效应量为 0.4（Cohen's f=0.4），以确定研究组之间的炎症因子是否存在显着差异（吸烟牙周炎、吸烟牙周健康组、不吸烟牙周炎组、不吸烟牙周健康组）。

纵向分析将仅包括完成整个研究方案的患者的数据。