Traitement parodontal non chirurgical chez les fumeurs sous SIRT-1, NLRP3 Inflammasome et LncRNA

Il y aura 4 groupes dans l'étude : parodontite non-fumeur (NSP), parodontite tabagique (SP), contrôle sain non-fumeur (HC) et contrôle sain fumeur (HCS).

Les groupes de parodontite de l'étude (NSP et SP) comprendront des patients diagnostiqués avec une parodontite généralisée de stade II et III, de grade B, C cliniquement basée sur le rapport consensuel de l'atelier mondial 2017 sur la classification des maladies parodontales et péri-implantaires et Conditions et individus systémiquement sains. Patients présentant une perte d'attache clinique ≥ 3 mm dans > 30 % des sites, avec une profondeur de sondage ≥ 5 mm dans au moins six dents et avec une perte osseuse radiographique s'étendant jusqu'au tiers moyen de la racine dans le tiers coronal ou au-delà sera inclus. Les patients présentant une perte de dents ≤ 4 dents liée à une maladie parodontale seront inclus. Le taux de progression de la maladie sera classé en classe B ou C sur la base de preuves directes de progression de la maladie confirmées par des radiographies panoramiques et des preuves de destruction indirecte proportionnelle aux accumulations de biofilm. Dans le groupe fumeur parodontite (SP) et le groupe fumeur sain (HCS), les participants ayant déclaré avoir fumé > 10 cigarettes par jour pendant > 5 ans seront inclus, tandis que les participants des groupes non-fumeurs (NSP et HC) seront ceux qui ont déclaré ne jamais fumer.

Mesures cliniques et traitement parodontal non chirurgical

Des échantillons de salive et de sérum seront prélevés sur tous les patients initialement et 3 mois après NSPT. Les paramètres cliniques seront également enregistrés initialement et au 3ème mois. L'indice de plaque (PI) et l'indice gingival (GI) seront enregistrés sur quatre sites par dent. La profondeur de sondage (PD) de toute la bouche et le niveau d'attache clinique (CAL) seront détaillés par dent sur six sites, et le pourcentage de zones de saignement sera enregistré comme présent ou absent dans les 20 secondes après le sondage à l'aide d'un système de notation binaire. Un parodontologue calibré (ZTE) enregistrera tous les paramètres cliniques à l'aide d'un sondage manuel. L'étalonnage de l'examinateur sera fourni avant de commencer l'étude sur une petite population pilote pour obtenir une précision intra-examinateur constante. Après la collecte d'échantillons de base et d'enregistrements de paramètres cliniques, tous les patients recevront un traitement parodontal initial, y compris l'éducation du patient, le détartrage complet et le surfaçage radiculaire (SRP) et les instructions d'hygiène bucco-dentaire du même clinicien expérimenté (ZTE).

Mesure en laboratoire

Chaque patient devra s'abstenir de manger, de boire et de pratiquer une hygiène bucco-dentaire pendant 12 heures avant le prélèvement. Des échantillons de sérum et de salive seront prélevés sur chaque patient entre 8h00 et 10h00 le matin avant l'examen dentaire.

Prélèvement de sang : Dans le cadre de l'étude, un total de 5 ml de sang sera prélevé dans la veine antécubitale de chaque individu par une infirmière experte du Département de Parodontologie.

Pour le prélèvement de sérum, une ponction veineuse sera réalisée et des échantillons de sang seront prélevés, immédiatement refroidis sur de la glace et centrifugés à 4°C (800 tr/min pendant 10 minutes). Après le prélèvement des échantillons de salive, ceux-ci seront immédiatement centrifugés à 4°C (1000 tr/min pendant 2 minutes). Après le prélèvement, les échantillons de sérum et de salive seront conservés à -80°C jusqu'à l'analyse. Les concentrations de NLRP3, ASC, caspase-1, IL-18, IL-1beta, TNF-alfa, IL-10, TGF-beta et SIRT-1 seront analysées par des kits spécifiques de test immuno-enzymatique (ELISA) dans les deux échantillons de sérum et de salive. Les LncRNA SNHG5 et MEG3 seront examinés par réaction en chaîne par polymérase en temps réel (RT-PCR).

Les niveaux d'IL-18, IL-1beta, TNF-alfa, IL-10, TGF-beta, NLRP3, SIRT-1, lncRNA SNHG5 et MEG3 dans PMBC seront évalués par RT-PCR. Toutes les étapes d'analyse de chaque kit seront évaluées à l'aide du protocole recommandé par le fabricant.

Analyses statistiques:

L'analyse statistique sera effectuée à l'aide d'un logiciel disponible dans le commerce (SPSS version 22.0, SPSS). Dans cette étude, une valeur de signification (valeur p) <0,05 sera utilisée. Cette étude est conçue comme un essai clinique prospectif contrôlé. La taille de l'échantillon de l'étude a été calculée à l'aide du programme R Statistical Language (version 4.1.2 ; La Fondation R pour le calcul statistique, Vienne, Autriche ; http://www.r-project.org). Il était prévu d'inclure au moins 25 individus dans chaque groupe pour une analyse unidirectionnelle de la variance, qui devait être effectuée avec un niveau de signification de 5 %, une puissance statistique de 80 % et une taille d'effet de 0,4 (f de Cohen = 0,4) afin de déterminer s'il existe une différence significative dans les facteurs inflammatoires entre les groupes d'étude (parodontite tabagique, tabagisme parodontal sain, parodontite non fumeur, non fumeur parodontal sain).

Les analyses longitudinales incluront uniquement les données des patients qui terminent l'intégralité du protocole d'étude.