Ikke-kirurgisk periodontal behandling hos rygere på SIRT-1, NLRP3 inflammasom og LncRNA'er

Der vil være 4 grupper i undersøgelsen: Ikke-ryger paradentose (NSP), rygende paradentose (SP), ikke-ryger sund kontrol (HC) og rygning sund kontrol (HCS).

Parodontitisgrupperne i undersøgelsen (NSP og SP) vil omfatte patienter diagnosticeret med trin II og III, generaliseret, grad B, C parodontitis klinisk baseret på konsensusrapporten fra 2017 World Workshop om klassificering af periodontale og peri-implantatsygdomme og Tilstande og systemisk sunde individer. Patienter med klinisk tilknytningstab ≥3 mm på >30 % af steder, med sonderingsdybde ≥5 mm i mindst seks tænder og med radiografisk knogletab, der strækker sig til eller ud over den midterste tredjedel af roden i den koronale tredjedel, vil blive inkluderet. Patienter med parodontale sygdomsrelateret tandtab ≤4 tænder vil blive inkluderet. Sygdomsprogressionshastigheden vil blive klassificeret som B- eller C-klasse baseret på direkte bevis for sygdomsprogression bekræftet af panorama-røntgenbilleder og bevis for indirekte ødelæggelse proportionalt med biofilmakkumulering. I rygningsparodontitis-gruppen (SP) og ryger-sund-gruppen (HCS) vil deltagere, der har rapporteret at ryge >10 cigaretter om dagen i >5 år, inkluderet, mens deltagere i ikke-ryger-grupperne (NSP og HC) vil være dem, der rapporterede aldrig at ryge.

Kliniske målinger og ikke-kirurgisk periodontal behandling

Spyt- og serumprøver vil blive indsamlet fra alle patienter initialt og 3 måneder efter NSPT. Kliniske parametre vil også blive registreret initialt og ved 3. måned. Plakindeks (PI) og gingivalindeks (GI) vil blive registreret på fire steder pr. tand. Fuldmund-probing-dybde (PD) og klinisk tilknytningsniveau (CAL) vil blive detaljeret pr. tand på seks steder, og procentdelen af ​​blødende områder vil blive registreret som tilstede eller fraværende inden for 20 sekunder efter sondering ved hjælp af et binært scoringssystem. En kalibreret parodontolog (ZTE) vil registrere alle kliniske parametre ved hjælp af manuel sondering. Eksaminatorkalibrering vil blive leveret, før undersøgelsen påbegyndes på en lille pilotpopulation for at opnå ensartet intra-eksaminator-nøjagtighed. Efter indsamling af baselineprøver og kliniske parameterregistreringer vil alle patienter modtage indledende parodontalbehandling, herunder patientuddannelse, fuldmundsskalering og rodplaning (SRP) og mundhygiejneinstruktioner fra den samme erfarne kliniker (ZTE).

Laboratoriemåling

Hver patient vil blive instrueret i at afholde sig fra at spise, drikke og mundhygiejne i 12 timer før prøvetagning. Serum- og spytprøver vil blive indsamlet fra hver patient mellem 8:00 og 10:00 om morgenen før tandundersøgelse.

Blodprøvetagning: Inden for undersøgelsens omfang vil i alt 5 ml blod blive indsamlet fra den antecubitale vene hos hvert individ af en ekspert sygeplejerske fra Paradentologisk Afdeling.

Til serumprøvetagning vil der blive udført venepunktur, og blodprøver vil blive opsamlet, straks afkølet på is og centrifugeret ved 4°C (800 rpm i 10 minutter). Efter indsamling af spytprøver centrifugeres de straks ved 4°C (1000 rpm i 2 minutter). Efter prøveudtagning vil både serum- og spytprøver blive opbevaret ved -80°C indtil analyse. Koncentrationer af NLRP3, ASC, caspase-1, IL-18, IL-1beta, TNF-alfa, IL-10, TGF-beta og SIRT-1 vil blive analyseret ved hjælp af specifikke enzym-linked immunosorbent assay (ELISA) kits i begge serum- og spytprøver. LncRNA SNHG5 og MEG3 vil blive undersøgt ved hjælp af Real-time polymerase chain reaction (RT-PCR).

IL-18, IL-1beta, TNF-alfa, IL-10, TGF-beta, NLRP3, SIRT-1, lncRNA SNHG5 og MEG3 niveauer i PMBC vil blive evalueret ved hjælp af RT-PCR. Alle analysetrin for hvert sæt vil blive evalueret ved hjælp af den protokol, der anbefales af producenten.

Statistisk analyse:

Statistisk analyse vil blive udført ved hjælp af kommercielt tilgængelig software (SPSS version 22.0, SPSS). I denne undersøgelse vil en signifikansværdi (p-værdi) på <0,05 blive brugt. Denne undersøgelse er designet som et prospektivt kontrolleret klinisk forsøg. Stikprøvestørrelsen af ​​undersøgelsen blev beregnet ved hjælp af R Statistical Language-programmet (version 4.1.2; R Foundation for Statistical Computing, Wien, Østrig; http://www.r-project.org). Det var planlagt at inkludere mindst 25 personer i hver gruppe til envejsanalyse af variansanalyse, der skulle udføres med et signifikansniveau på 5 %, statistisk styrke på 80 % og effektstørrelse på 0,4 (Cohens f=0,4) for at bestemme hvis der er signifikant forskel på betændelsesfaktorer mellem undersøgelsesgrupperne (rygende paradentose, rygning paradentose rask, ikke-ryger paradentose, ikke-ryger paradentose rask).

Longitudinelle analyser vil kun omfatte data fra patienter, der fuldfører hele undersøgelsesprotokollen.