Nicht-chirurgische parodontale Behandlung bei Rauchern mit SIRT-1, NLRP3-Inflammasom und LncRNAs

In der Studie wird es 4 Gruppen geben: Nichtraucher-Parodontitis (NSP), Raucher-Parodontitis (SP), Nichtraucher-Gesundheitskontrolle (HC) und Raucher-Gesundheitskontrolle (HCS).

Die Parodontitisgruppen in der Studie (NSP und SP) umfassen Patienten, bei denen klinisch eine generalisierte Parodontitis der Grade B und C im Stadium II und III diagnostiziert wurde, basierend auf dem Konsensbericht des Weltworkshops 2017 zur Klassifizierung parodontaler und periimplantärer Erkrankungen Erkrankungen und systemisch gesunde Personen. Eingeschlossen werden Patienten mit einem klinischen Attachmentverlust von ≥3 mm an >30 % der Stellen, einer Sondierungstiefe von ≥5 mm bei mindestens sechs Zähnen und einem radiologischen Knochenverlust, der sich bis zum mittleren Wurzeldrittel oder darüber hinaus im koronalen Drittel erstreckt. Patienten mit parodontalbedingtem Zahnverlust von ≤4 Zähnen werden eingeschlossen. Die Krankheitsprogressionsrate wird als B- oder C-Klasse eingestuft, basierend auf direkten Beweisen für Krankheitsprogression, bestätigt durch Panorama-Röntgenaufnahmen und Beweisen für indirekte Zerstörung proportional zu Biofilmansammlungen. In die Raucher-Parodontitis-Gruppe (SP) und die Raucher-Gesundheitsgruppe (HCS) werden Teilnehmer einbezogen, die angaben, > 5 Jahre lang mehr als 10 Zigaretten pro Tag geraucht zu haben, während es sich bei den Teilnehmern in den Nichtrauchergruppen (NSP und HC) um diejenigen handelt, die mehr als 5 Jahre lang geraucht haben gab an, nie geraucht zu haben.

Klinische Messungen und nicht-chirurgische Parodontalbehandlung

Von allen Patienten werden zu Beginn und 3 Monate nach der NSPT Speichel- und Serumproben entnommen. Klinische Parameter werden ebenfalls zunächst und im 3. Monat erfasst. Plaque-Index (PI) und Gingiva-Index (GI) werden an vier Stellen pro Zahn aufgezeichnet. Die Sondierungstiefe (PD) im gesamten Mund und der Grad der klinischen Anhaftung (CAL) werden pro Zahn an sechs Stellen detailliert angegeben, und der Prozentsatz der Blutungsbereiche wird innerhalb von 20 Sekunden nach der Sondierung mithilfe eines binären Bewertungssystems als vorhanden oder nicht vorhanden aufgezeichnet. Ein kalibrierter Parodontologe (ZTE) zeichnet alle klinischen Parameter mittels manueller Sondierung auf. Vor Beginn der Studie an einer kleinen Pilotpopulation wird eine Kalibrierung des Prüfers durchgeführt, um eine konsistente Genauigkeit innerhalb des Prüfers zu erreichen. Nach der Entnahme von Basisproben und klinischen Parameteraufzeichnungen erhalten alle Patienten eine erste parodontale Behandlung, einschließlich Patientenaufklärung, Zahnsteinentfernung im gesamten Mund und Wurzelglättung (SRP) sowie Anweisungen zur Mundhygiene durch denselben erfahrenen Kliniker (ZTE).

Labormessung

Jeder Patient wird angewiesen, vor der Probenahme 12 Stunden lang auf Essen, Trinken und Mundhygiene zu verzichten. Von jedem Patienten werden zwischen 8:00 und 10:00 Uhr morgens vor der zahnärztlichen Untersuchung Serum- und Speichelproben entnommen.

Blutentnahme: Im Rahmen der Studie werden von einer erfahrenen Krankenschwester der Abteilung für Parodontologie insgesamt 5 ml Blut aus der Ellenbogenvene jedes Einzelnen entnommen.

Zur Serumentnahme wird eine Venenpunktion durchgeführt und Blutproben entnommen, sofort auf Eis gekühlt und bei 4 °C (800 U/min für 10 Minuten) zentrifugiert. Nach der Entnahme der Speichelproben werden diese sofort bei 4 °C (1000 U/min für 2 Minuten) zentrifugiert. Nach der Probenahme werden sowohl Serum- als auch Speichelproben bis zur Analyse bei -80 °C gelagert. Die Konzentrationen von NLRP3, ASC, Caspase-1, IL-18, IL-1beta, TNF-alfa, IL-10, TGF-beta und SIRT-1 werden in beiden durch spezifische ELISA-Kits (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) analysiert Serum- und Speichelproben. LncRNA SNHG5 und MEG3 werden mittels Echtzeit-Polymerasekettenreaktion (RT-PCR) untersucht.

Die IL-18-, IL-1beta-, TNF-alfa-, IL-10-, TGF-beta-, NLRP3-, SIRT-1-, lncRNA-SNHG5- und MEG3-Spiegel in PMBC werden mittels RT-PCR bewertet. Alle Analyseschritte für jedes Kit werden anhand des vom Hersteller empfohlenen Protokolls bewertet.

Statistische Analyse:

Die statistische Analyse wird mit im Handel erhältlicher Software (SPSS Version 22.0, SPSS) durchgeführt. In dieser Studie wird ein Signifikanzwert (p-Wert) von <0,05 verwendet. Diese Studie ist als prospektive kontrollierte klinische Studie konzipiert. Die Stichprobengröße der Studie wurde mit dem Programm R Statistical Language (Version 4.1.2; The R Foundation for Statistical Computing, Wien, Österreich; http://www.r-project.org). Es war geplant, mindestens 25 Personen in jede Gruppe einzubeziehen, um eine einseitige Varianzanalyse mit einem Signifikanzniveau von 5 %, einer statistischen Aussagekraft von 80 % und einer Effektstärke von 0,4 (Cohens f = 0,4) durchzuführen wenn ein signifikanter Unterschied in den Entzündungsfaktoren zwischen den Studiengruppen besteht (Raucherparodontitis, Raucher parodontal gesund, Nichtraucher Parodontitis, Nichtraucher parodontal gesund).

Längsschnittanalysen umfassen nur Daten von Patienten, die das gesamte Studienprotokoll abgeschlossen haben.