Dohányosok nem sebészeti periodontális kezelése SIRT-1, NLRP3 Inflammasome és LncRNS segítségével

A vizsgálatban 4 csoport lesz: nemdohányzó parodontitis (NSP), dohányzó parodontitis (SP), nemdohányzó egészséges kontroll (HC) és dohányzó egészséges kontroll (HCS).

A vizsgálatban részt vevő parodontitis csoportok (NSP és SP) olyan betegeket foglalnak magukban, akiknél II. és III. stádiumú, generalizált, B, C fokozatú periodontitis klinikailag diagnosztizáltak a 2017-es világműhely konszenzusos jelentése alapján a periodontális és periimplantációs betegségek osztályozásáról és Feltételek és szisztémásán egészséges egyének. Azok a betegek, akiknél a klinikai kötődési veszteség a helyek >30%-ában ≥3 mm, a szondázási mélység legalább hat fogban ≥5 mm, és a csontritkulás a koronális harmadban a gyökér középső harmadáig vagy azon túl terjed. A fogágybetegséggel összefüggő ≤4 fogak elvesztésével rendelkező betegeket is figyelembe kell venni. A betegség progresszióját B vagy C osztályba sorolják a panoráma röntgenfelvételek által megerősített betegség progressziójának közvetlen bizonyítéka és a biofilm felhalmozódásával arányos közvetett pusztulás bizonyítéka alapján. A dohányzó parodontitis csoportba (SP) és a dohányzó egészséges csoportba (HCS) azok a résztvevők tartoznak, akik napi 10 cigarettát meghaladó dohányzásról számoltak be több mint 5 éven keresztül, míg a nemdohányzó csoportokban (NSP és HC) azok, akik arról számolt be, hogy soha nem dohányzik.

Klinikai mérések és nem sebészeti periodontális kezelés

Kezdetben és 3 hónappal az NSPT után minden betegtől nyál- és szérummintákat vesznek. Kezdetben és a 3. hónapban a klinikai paraméterek is rögzítésre kerülnek. A plakk indexet (PI) és a gingivális indexet (GI) fogonként négy helyen rögzítik. A teljes száj szondázási mélysége (PD) és a klinikai tapadási szint (CAL) fogonként hat helyen kerül részletezésre, és a vérzéses területek százalékos aránya a szondázást követő 20 másodpercen belül bináris pontozórendszerrel rögzítésre kerül. A kalibrált parodontológus (ZTE) kézi szondával rögzíti az összes klinikai paramétert. A vizsgálat megkezdése előtt egy kis kísérleti populáción elvégzik a vizsgáló kalibrálását, hogy a vizsgálókon belüli pontosság következetes legyen. A kiindulási minták és a klinikai paraméterekre vonatkozó rekordok gyűjtése után minden beteg kap kezdeti parodontális kezelést, beleértve a betegoktatást, a teljes száj hámlást és a gyökérplaningot (SRP), valamint a szájhigiéniára vonatkozó utasításokat ugyanattól a tapasztalt klinikustól (ZTE).

Laboratóriumi mérés

Minden pácienst arra utasítanak, hogy a mintavétel előtt 12 órán keresztül tartózkodjon az evéstől, ivástól és a szájhigiénés gyakorlatoktól. A fogászati ​​vizsgálat előtt reggel 8:00 és 10:00 óra között minden pácienstől szérum- és nyálmintát vesznek.

Vérmintavétel: A vizsgálat keretein belül a Parodontológiai Osztály szakértő ápolója minden egyén antecubitalis vénájából összesen 5 ml vért vesz le.

A szérummintavételhez vénás punkciót végeznek, vérmintákat vesznek, azonnal jégre hűtik, és 4 °C-on centrifugálják (800 fordulat/perc 10 percig). A nyálminták gyűjtése után azonnal centrifugálják őket 4°C-on (1000 fordulat/perc 2 percig). A mintavételt követően a szérum- és nyálmintákat -80°C-on tárolják az elemzésig. Az NLRP3, az ASC, a kaszpáz-1, az IL-18, az IL-1béta, a TNF-alfa, az IL-10, a TGF-béta és a SIRT-1 koncentrációit specifikus enzim-linked immunoszorbent assay (ELISA) kittel elemezzük mindkét esetben. szérum- és nyálminták. Az LncRNS SNHG5 és MEG3 vizsgálata valós idejű polimeráz láncreakció (RT-PCR) segítségével történik.

Az IL-18, IL-1béta, TNF-alfa, IL-10, TGF-béta, NLRP3, SIRT-1, lncRNS SNHG5 és MEG3 szintjeit a PMBC-ben RT-PCR segítségével értékeljük ki. Az egyes készletekhez tartozó összes elemzési lépést a gyártó által javasolt protokoll szerint értékeljük.

Statisztikai analízis:

A statisztikai elemzés a kereskedelemben kapható szoftverrel (SPSS 22.0 verzió, SPSS) történik. Ebben a vizsgálatban <0,05 szignifikancia értéket (p-értéket) használunk. Ezt a tanulmányt prospektív, kontrollált klinikai vizsgálatnak tervezték. A vizsgálat mintanagyságát az R Statistical Language programmal (4.1.2-es verzió; The R Foundation for Statistical Computing, Bécs, Ausztria; http://www.r-project.org). A tervek szerint minden csoportba legalább 25 személyt bevontak az egyutas varianciaanalízis elvégzésére 5%-os szignifikanciaszinttel, 80%-os statisztikai erővel és 0,4 hatásmérettel (Cohen-féle f=0,4). ha szignifikáns különbség van a vizsgált csoportok között a gyulladásos faktorok között (dohányzó fogágygyulladás, dohányzó fogágygyulladás, nemdohányzó fogágygyulladás, nemdohányzó parodontálisan egészséges).

A longitudinális elemzések csak a teljes vizsgálati protokollt teljesítő betegek adatait tartalmazzák.