Niet-chirurgische parodontale behandeling bij rokers met SIRT-1, NLRP3-inflammasoom en LncRNA's

Er zullen vier groepen in het onderzoek zijn: niet-rokende parodontitis (NSP), rokende parodontitis (SP), niet-rokende gezonde controle (HC) en rokende gezonde controle (HCS).

De parodontitisgroepen in het onderzoek (NSP en SP) omvatten patiënten met de diagnose Fase II en III, gegeneraliseerde parodontitis Graad B en C, klinisch gebaseerd op het consensusrapport van de World Workshop on the Classification of Periodontal and Peri-Implant Diseases van 2017 en Voorwaarden en systemisch gezonde individuen. Patiënten met een klinisch hechtingsverlies van ≥3 mm op >30% van de plaatsen, met een sondeerdiepte van ≥5 mm in ten minste zes tanden, en met radiografisch botverlies dat zich uitstrekt tot of voorbij het middelste derde deel van de wortel in het coronale derde deel, zullen worden geïncludeerd. Patiënten met parodontitis-gerelateerd tandverlies ≤4 tanden zullen worden geïncludeerd. Het ziekteprogressiepercentage wordt geclassificeerd als B- of C-klasse op basis van direct bewijs van ziekteprogressie, bevestigd door panoramische röntgenfoto's en bewijs van indirecte vernietiging evenredig aan de accumulatie van biofilms. In de groep die rookt met parodontitis (SP) en de groep die gezond rookt (HCS) worden deelnemers opgenomen die aangaven > 10 sigaretten per dag te roken gedurende > 5 jaar, terwijl deelnemers in de niet-rokende groepen (NSP en HC) degenen zijn die meldde nooit te hebben gerookt.

Klinische metingen en niet-chirurgische parodontale behandeling

Speeksel- en serummonsters zullen aanvankelijk en 3 maanden na NSPT bij alle patiënten worden verzameld. Klinische parameters zullen ook aanvankelijk en in de derde maand worden geregistreerd. De tandplakindex (PI) en de gingivale index (GI) worden op vier plaatsen per tand geregistreerd. De sondediepte van de volledige mond (PD) en het klinische hechtingsniveau (CAL) zullen per tand op zes locaties worden gedetailleerd, en het percentage bloedende gebieden zal binnen 20 seconden na het sonderen worden geregistreerd als aanwezig of afwezig met behulp van een binair scoresysteem. Een gekalibreerde parodontoloog (ZTE) zal alle klinische parameters registreren met behulp van handmatige sondes. Kalibratie van de examinator zal plaatsvinden voordat het onderzoek op een kleine pilotpopulatie wordt gestart, om een ​​consistente nauwkeurigheid binnen de examinator te bereiken. Na het verzamelen van basismonsters en klinische parameterrecords krijgen alle patiënten een initiële parodontale behandeling, inclusief patiëntenvoorlichting, schaling van de volledige mond en rootplaning (SRP), en instructies voor mondhygiëne van dezelfde ervaren arts (ZTE).

Laboratoriummeting

Elke patiënt krijgt de instructie om zich gedurende 12 uur vóór de monstername te onthouden van eten, drinken en mondhygiëne. Serum- en speekselmonsters worden van elke patiënt afgenomen tussen 8.00 en 10.00 uur in de ochtend vóór het tandheelkundig onderzoek.

Bloedafname: In het kader van het onderzoek wordt in totaal 5 ml bloed uit de antecubitale ader van elk individu afgenomen door een deskundige verpleegkundige van de afdeling Parodontologie.

Voor serummonsters wordt een veneuze punctie uitgevoerd en worden bloedmonsters verzameld, onmiddellijk afgekoeld op ijs en gecentrifugeerd bij 4°C (800 rpm gedurende 10 minuten). Na het verzamelen van de speekselmonsters worden deze onmiddellijk bij 4°C (1000 rpm gedurende 2 minuten) gecentrifugeerd. Na de monstername worden zowel serum- als speekselmonsters tot analyse bij -80°C bewaard. Concentraties van NLRP3, ASC, caspase-1, IL-18, IL-1beta, TNF-alfa, IL-10, TGF-bèta en SIRT-1 zullen worden geanalyseerd door specifieke enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) kits in beide serum- en speekselmonsters. LncRNA SNHG5 en MEG3 zullen worden onderzocht met behulp van Real-time polymerasekettingreactie (RT-PCR).

IL-18-, IL-1beta-, TNF-alfa-, IL-10-, TGF-beta-, NLRP3-, SIRT-1-, lncRNA SNHG5- en MEG3-niveaus in PMBC zullen worden geëvalueerd met behulp van RT-PCR. Alle analysestappen voor elke kit worden geëvalueerd volgens het door de fabrikant aanbevolen protocol.

Statistische analyse:

Statistische analyse zal worden uitgevoerd met behulp van in de handel verkrijgbare software (SPSS versie 22.0, SPSS). In dit onderzoek zal een significantiewaarde (p-waarde) van <0,05 worden gebruikt. Deze studie is opgezet als een prospectieve gecontroleerde klinische studie. De steekproefomvang van het onderzoek werd berekend met behulp van het R Statistical Language-programma (versie 4.1.2; De R Foundation for Statistical Computing, Wenen, Oostenrijk; http://www.r-project.org). Het was de bedoeling om ten minste 25 individuen in elke groep op te nemen voor een eenzijdige variantieanalyse, die zou worden uitgevoerd met een significantieniveau van 5%, een statistische kracht van 80% en een effectgrootte van 0,4 (Cohen's f = 0,4) om te bepalen als er een significant verschil is in ontstekingsfactoren tussen de onderzoeksgroepen (rokende parodontitis, parodontaal roken gezond, niet-rokende parodontitis, niet-rokende parodontaal gezond).

Longitudinale analyses zullen alleen gegevens omvatten van patiënten die het volledige onderzoeksprotocol voltooien.