Ikke-kirurgisk periodontal behandling hos røykere på SIRT-1, NLRP3 Inflammasom og LncRNA

Det vil være 4 grupper i studien: Ikke-røykende periodontitt (NSP), røyking periodontitt (SP), ikke-røykende sunn kontroll (HC), og røyking sunn kontroll (HCS).

Periodontittgruppene i studien (NSP og SP) vil inkludere pasienter diagnostisert med stadium II og III, generalisert, grad B, C periodontitt klinisk basert på konsensusrapporten fra 2017 World Workshop on the Classification of Periodontal and Peri-Implant Diseases og Tilstander og systemisk friske individer. Pasienter med klinisk tilknytningstap ≥3 mm på >30 % av stedene, med sonderingsdybde ≥5 mm i minst seks tenner, og med radiografisk bentap som strekker seg til eller utover den midterste tredjedelen av roten i den koronale tredjedelen vil inkluderes. Pasienter med periodontal sykdomsrelatert tanntap ≤4 tenner vil inkluderes. Sykdomsprogresjonsrate vil bli gradert som B- eller C-klasse basert på direkte bevis på sykdomsprogresjon bekreftet av panorama-røntgenbilder og bevis på indirekte ødeleggelse proporsjonalt med biofilmansamlinger. I gruppen med røyking periodontitt (SP) og røyking sunn gruppe (HCS) vil deltakere som rapporterte røyking >10 sigaretter per dag i >5 år inkluderes, mens deltakere i ikke-røykere gruppene (NSP og HC) vil være de som rapporterte aldri røyking.

Kliniske målinger og ikke-kirurgisk periodontal behandling

Spytt- og serumprøver vil bli samlet inn fra alle pasienter initialt og 3 måneder etter NSPT. Kliniske parametere vil også bli registrert initialt og ved 3. måned. Plakkindeks (PI) og gingivalindeks (GI) vil bli registrert på fire steder per tann. Helmunns sonderingsdybde (PD) og klinisk festenivå (CAL) vil bli detaljert per tann på seks steder, og prosentandelen av blødende områder vil bli registrert som tilstede eller fraværende innen 20 sekunder etter sondering ved hjelp av et binært skåringssystem. En kalibrert periodontolog (ZTE) vil registrere alle kliniske parametere ved hjelp av manuell sondering. Undersøkerkalibrering vil bli gitt før du starter studien på en liten pilotpopulasjon for å oppnå konsistent intra-eksaminatornøyaktighet. Etter innsamling av baselineprøver og kliniske parameterregistreringer vil alle pasienter motta innledende periodontal behandling, inkludert pasientopplæring, full-munnskalering og rotplaning (SRP), og munnhygieneinstruksjoner fra samme erfarne kliniker (ZTE).

Laboratoriemåling

Hver pasient vil bli bedt om å avstå fra å spise, drikke og munnhygiene i 12 timer før prøvetaking. Serum- og spyttprøver vil bli tatt fra hver pasient mellom kl. 8.00 og 10.00 om morgenen før tannundersøkelse.

Blodprøvetaking: I omfanget av studien vil totalt 5 ml blod bli samlet inn fra den antecubitale venen til hvert individ av en ekspertsykepleier fra Periodontologisk avdeling.

For serumprøvetaking vil det bli utført venepunktur, og blodprøver vil bli samlet, umiddelbart avkjølt på is og sentrifugert ved 4°C (800 rpm i 10 minutter). Etter innsamling av spyttprøver sentrifugeres de umiddelbart ved 4°C (1000 rpm i 2 minutter). Etter prøvetaking vil både serum- og spyttprøver oppbevares ved -80°C frem til analyse. Konsentrasjoner av NLRP3, ASC, caspase-1, IL-18, IL-1beta, TNF-alfa, IL-10, TGF-beta og SIRT-1 vil bli analysert ved hjelp av spesifikke enzym-koblede immunosorbent assay (ELISA) sett i begge serum- og spyttprøver. LncRNA SNHG5 og MEG3 vil bli undersøkt ved bruk av sanntids polymerasekjedereaksjon (RT-PCR).

IL-18, IL-1beta, TNF-alfa, IL-10, TGF-beta, NLRP3, SIRT-1, lncRNA SNHG5 og MEG3 nivåer i PMBC vil bli evaluert ved bruk av RT-PCR. Alle analysetrinn for hvert sett vil bli evaluert ved å bruke protokollen anbefalt av produsenten.

Statistisk analyse:

Statistisk analyse vil bli utført ved bruk av kommersielt tilgjengelig programvare (SPSS versjon 22.0, SPSS). I denne studien vil det brukes en signifikansverdi (p-verdi) på <0,05. Denne studien er designet som en prospektiv kontrollert klinisk studie. Utvalgsstørrelsen til studien ble beregnet ved hjelp av R Statistical Language-programmet (versjon 4.1.2; R Foundation for Statistical Computing, Wien, Østerrike; http://www.r-project.org). Det var planlagt å inkludere minst 25 individer i hver gruppe for enveisanalyse av variansanalyse som skulle utføres med et signifikansnivå på 5 %, statistisk styrke på 80 % og effektstørrelse på 0,4 (Cohens f=0,4) for å bestemme dersom det er en signifikant forskjell i betennelsesfaktorer mellom studiegruppene (røykende periodontitt, røyking periodontalt frisk, røykfri periodontitt, ikke-røyker periodontalt frisk).

Longitudinelle analyser vil kun inkludere data fra pasienter som fullfører hele studieprotokollen.