Icke-kirurgisk periodontal behandling hos rökare på SIRT-1, NLRP3 Inflammasom och LncRNA

Det kommer att finnas 4 grupper i studien: icke-rökare parodontit (NSP), rökande parodontit (SP), icke-rökare frisk kontroll (HC) och rökning frisk kontroll (HCS).

Parodontitgrupperna i studien (NSP och SP) kommer att inkludera patienter som diagnostiserats med steg II och III, generaliserad, grad B, C parodontit kliniskt baserat på konsensusrapporten från 2017 års World Workshop on the Classification of Parodontita and Peri-Implant Diseases och Tillstånd och systemiskt friska individer. Patienter med klinisk anknytningsförlust ≥3 mm på >30 % av platserna, med sonderingsdjup ≥5 mm i minst sex tänder och med radiografisk benförlust som sträcker sig till eller bortom den mellersta tredjedelen av roten i den koronala tredjedelen kommer att inkluderas. Patienter med tandlossningsrelaterad tandlossning ≤4 tänder kommer att inkluderas. Sjukdomsprogressionshastighet kommer att graderas som B- eller C-klass baserat på direkta bevis på sjukdomsprogression bekräftade av panoramaröntgenbilder och bevis på indirekt förstörelse proportionell mot biofilmansamlingar. I gruppen för rökande parodontit (SP) och gruppen för rökande friska (HCS) kommer deltagare som rapporterat röka >10 cigaretter per dag i >5 år att inkluderas, medan deltagare i icke-rökare (NSP och HC) kommer att vara de som rapporterade aldrig röka.

Kliniska mätningar och icke-kirurgisk periodontal behandling

Saliv- och serumprover kommer att samlas in från alla patienter initialt och 3 månader efter NSPT. Kliniska parametrar kommer också att registreras initialt och vid den 3:e månaden. Plackindex (PI) och gingivalindex (GI) kommer att registreras på fyra ställen per tand. Helmuns sonderingsdjup (PD) och klinisk fästningsnivå (CAL) kommer att specificeras per tand på sex ställen, och andelen blödande områden kommer att registreras som närvarande eller frånvarande inom 20 sekunder efter sondering med ett binärt poängsystem. En kalibrerad parodontolog (ZTE) kommer att registrera alla kliniska parametrar med hjälp av manuell sondering. Granskarkalibrering kommer att tillhandahållas innan studien påbörjas på en liten pilotpopulation för att uppnå konsekvent intra-examinatornoggrannhet. Efter insamlingen av baslinjeprover och kliniska parametrar kommer alla patienter att få initial parodontalbehandling, inklusive patientutbildning, skalning av hela munnen och rotplaning (SRP) och munhygieninstruktioner från samma erfarne läkare (ZTE).

Laboratoriemätning

Varje patient kommer att instrueras att avstå från att äta, dricka och munhygien i 12 timmar före provtagning. Serum- och salivprover kommer att samlas in från varje patient mellan 8:00 och 10:00 på morgonen före tandundersökning.

Blodprovtagning: Inom ramen för studien kommer totalt 5 ml blod att samlas in från antecubitalvenen hos varje individ av en expertsjuksköterska från avdelningen för parodontologi.

För serumprovtagning kommer venpunktion att utföras och blodprover tas, omedelbart kylda på is och centrifugeras vid 4°C (800 rpm i 10 minuter). Efter insamling av salivprover kommer de att centrifugeras omedelbart vid 4°C (1000 rpm i 2 minuter). Efter provtagning kommer både serum- och salivprover att förvaras vid -80°C fram till analys. Koncentrationer av NLRP3, ASC, kaspas-1, IL-18, IL-1beta, TNF-alfa, IL-10, TGF-beta och SIRT-1 kommer att analyseras med specifika enzymkopplade immunosorbentanalyser (ELISA) i båda serum- och salivprover. LncRNA SNHG5 och MEG3 kommer att undersökas med hjälp av realtidspolymeraskedjereaktion (RT-PCR).

Nivåerna IL-18, IL-1beta, TNF-alfa, IL-10, TGF-beta, NLRP3, SIRT-1, lncRNA SNHG5 och MEG3 i PMBC kommer att utvärderas med RT-PCR. Alla analyssteg för varje kit kommer att utvärderas med det protokoll som rekommenderas av tillverkaren.

Statistisk analys:

Statistisk analys kommer att utföras med hjälp av kommersiellt tillgänglig programvara (SPSS version 22.0, SPSS). I denna studie kommer ett signifikansvärde (p-värde) på <0,05 att användas. Denna studie är utformad som en prospektiv kontrollerad klinisk prövning. Studiens urvalsstorlek beräknades med hjälp av programmet R Statistical Language (version 4.1.2; R Foundation for Statistical Computing, Wien, Österrike; http://www.r-project.org). Det var planerat att inkludera minst 25 individer i varje grupp för envägsanalys av variansanalys som skulle genomföras med en signifikansnivå på 5 %, statistisk styrka på 80 % och effektstorlek på 0,4 (Cohens f=0,4) för att fastställa om det finns en signifikant skillnad i inflammatoriska faktorer mellan studiegrupperna (rökande parodontit, rökning parodontalt frisk, rökfri parodontit, icke-rökar parodontit frisk).

Longitudinella analyser kommer endast att inkludera data från patienter som slutför hela studieprotokollet.