エピジェネティック解析と miRNA による腺筋症の病因の新たな視点 (ADENO-MIRNA)

本研究は、子宮内膜症を含むいくつかの病態において循環miRNAが異常発現していることを指摘した先行研究に基づいており、臨床現場で便利な診断ツールとして使用できる。 私たちは、腺筋症においても miRNA が差次的に発現しており、腺筋症を診断するための非侵襲性バイオマーカーとして機能する可能性があると仮説を立てています。 この仮説を検証するために、グループ間の異なる miRNA の発現を比較し、適切な診断パネルを決定するために、50 人の患者 (腺筋症患者 25 人および健常者 25 人) を対象にパイロット研究を実施する予定です。 CUSLでは、1年間に約25人の女性が子宮腺筋症のため子宮摘出術を受けています。 また、統計的に分析可能なデータを取得するために必要な母集団でもあります。 このパネルは、検証目的で将来的により多くの集団でテストされる可能性があります。

子宮摘出術のために CUSL を訪れた女性患者から、手術当日に麻酔科医によって血液サンプル (10 ml) が収集されます。 患者は、手術前のMRIおよび/または超音波検査によって腺筋症と診断された患者を含む研究グループ(n=25)と、子宮内膜とは無関係の病状を有する患者からなる対照グループ(n=25)の2つのグループにさらに分けられます。 サンプルを CUSL バイオバンクに登録した後、サンプルは研究室に移送され、4℃、2500 rpm で 15 分間遠心分離することにより血清が直ちに収集され、その後使用するまで -80℃ で保存されます。 循環 miRNA を単離するには、市販のキット (Qiagen miRNeasy 血清/血漿キット) を使用し、その後、適切なキット (Qiagen miScript II RT) を使用して cDNA を合成します。 市販の miRNA アレイを使用して、約 1,000 個の miRNA の発現を同時に定量し、腺筋症患者と影響を受けていない被験者の間でその発現プロファイルを比較します。 次に、結果を検証するために個々の RT-qPCR 反応が実行されます。 腺筋症において差次的に発現されたマイクロRNAは、適切なデータベース（TargetScanおよびmiRTarBase）を使用して、その標的遺伝子とその後影響を受ける生物学的機能を決定するためにさらに分析されます。 この実験的アプローチにより、病気のない女性と比較して、腺筋症において異常に発現している miRNA を特定することが可能になります。 これらは、病状の非侵襲性バイオマーカーとして使用したり、新しい治療選択肢の開発の標的として使用したりできます。