Nuevas perspectivas en la patogénesis de la adenomiosis con análisis epigenético y miARN (ADENO-MIRNA)

El presente estudio se basa en investigaciones previas que señalan que los miARN circulantes se expresan de manera anormal en varias patologías, incluida la endometriosis, y pueden usarse como una herramienta de diagnóstico útil en el entorno clínico. Nuestra hipótesis es que los miARN también se expresan diferencialmente en la adenomiosis y podrían servir como biomarcadores no invasivos para diagnosticar la afección. Para probar esta hipótesis, planeamos realizar un estudio piloto en 50 pacientes (25 pacientes con adenomiosis y 25 sujetos sanos), para comparar la expresión de diferentes miARN entre los grupos y determinar un panel de diagnóstico adecuado. Hay aproximadamente 25 mujeres sometidas a histerectomía por adenomiosis en el transcurso de un año en el CUSL. También es una población necesaria para obtener datos estadísticamente analizables. Este panel puede probarse en el futuro en una población más grande con fines de validación.

El anestesista recogerá muestras de sangre (10 ml) el día de la cirugía de las pacientes que visitan el CUSL con fines de histerectomía. Los pacientes se subdividirán en dos grupos, a saber, el grupo de estudio (n = 25), que incluye pacientes diagnosticados con adenomiosis mediante resonancia magnética y/o ecografía antes de la cirugía y el grupo de control (n = 25) formado por pacientes con patologías no relacionadas con el endometrio. Después del registro de las muestras en el biobanco CUSL, se transferirán al laboratorio de investigación y el suero se recolectará inmediatamente mediante centrifugación a 2500 rpm durante 15 minutos a 4 ° C seguido de almacenamiento a -80 ° C hasta su uso posterior. Para aislar los miARN circulantes, se utilizará un kit comercial (kit de suero/plasma Qiagen miRNeasy) y luego se sintetizará el ADNc utilizando el kit apropiado (Qiagen miScript II RT). Se utilizarán matrices comerciales de miARN para cuantificar simultáneamente la expresión de alrededor de 1000 miARN y comparar sus perfiles de expresión entre pacientes con adenomiosis y sujetos no afectados. Luego se realizarán reacciones individuales de RT-qPCR para validar los resultados. Los microARN expresados ​​diferencialmente en la adenomiosis se analizarán más a fondo para determinar sus genes diana y las funciones biológicas afectadas posteriores, utilizando bases de datos apropiadas (TargetScan y miRTarBase). Este enfoque experimental nos permitirá identificar miARN expresados ​​anormalmente en la adenomiosis en comparación con mujeres libres de la enfermedad. Estos pueden luego usarse como biomarcadores no invasivos de la patología y/o apuntarse al desarrollo de nuevas opciones terapéuticas.