Nouvelles perspectives dans la pathogenèse de l'adénomyose avec l'analyse épigénétique et les miARN (ADENO-MIRNA)

La présente étude est basée sur des recherches antérieures soulignant que les miARN circulants sont anormalement exprimés dans plusieurs pathologies, dont l'endométriose, et peuvent être utilisés comme un outil de diagnostic pratique en milieu clinique. Nous émettons l'hypothèse que les miARN sont également exprimés de manière différentielle dans l'adénomyose et pourraient servir de biomarqueurs non invasifs pour diagnostiquer la maladie. Pour tester cette hypothèse, nous prévoyons de mener une étude pilote sur 50 patients (25 patients atteints d'adénomyose et 25 sujets sains), afin de comparer l'expression de différents miARN entre les groupes et déterminer un panel diagnostique adapté. Il y a environ 25 femmes qui subissent une hystérectomie pour adénomyose au cours d'une année au CUSL. C'est également une population nécessaire pour obtenir des données statistiquement analysables. Ce panel pourra être testé à l’avenir sur une population plus large à des fins de validation.

Des échantillons de sang (10 ml) seront prélevés le jour de l'intervention chirurgicale par l'anesthésiste auprès des patientes visitant le CUSL en vue d'une hystérectomie. Les patientes seront subdivisées en deux groupes, à savoir le groupe d'étude (n=25) comprenant des patientes diagnostiquées avec une adénomyose par IRM et/ou échographie avant une intervention chirurgicale et le groupe témoin (n=25) constitué de patientes présentant des pathologies non liées à l'endomètre. Après enregistrement des échantillons dans la biobanque CUSL, ils seront transférés au laboratoire de recherche et le sérum sera collecté immédiatement par centrifugation à 2500 tr/min pendant 15 min à 4°C suivie d'un stockage à -80°C jusqu'à utilisation ultérieure. Pour isoler les miARN circulants, un kit commercial (kit sérum/plasma Qiagen miRNeasy) sera utilisé et l'ADNc sera ensuite synthétisé à l'aide du kit approprié (Qiagen miScript II RT). Des matrices commerciales de miARN seront utilisées pour quantifier simultanément l'expression d'environ 1 000 miARN et comparer leurs profils d'expression entre les patients atteints d'adénomyose et les sujets non affectés. Des réactions RT-qPCR individuelles seront ensuite menées pour valider les résultats. Les microARN différentiellement exprimés dans l'adénomyose seront analysés plus en détail pour déterminer leurs gènes cibles et les fonctions biologiques affectées ultérieures, à l'aide de bases de données appropriées (TargetScan et miRTarBase). Cette approche expérimentale nous permettra d'identifier les miARN anormalement exprimés dans l'adénomyose par rapport aux femmes indemnes de maladie. Ceux-ci peuvent ensuite être utilisés comme biomarqueurs non invasifs de la pathologie et/ou ciblés pour le développement de nouvelles options thérapeutiques.