Nye perspektiver i adenomyosepatogenese med epigenetisk analyse og miRNA (ADENO-MIRNA)

Den nåværende studien er basert på tidligere forskning som påpeker at sirkulerende miRNA er unormalt uttrykt i flere patologier, inkludert endometriose, og kan brukes som et praktisk diagnostisk verktøy i kliniske omgivelser. Vi antar at miRNA er differensielt uttrykt i adenomyose også og kan tjene som ikke-invasive biomarkører for å diagnostisere tilstanden. For å teste denne hypotesen planlegger vi å gjennomføre en pilotstudie på 50 pasienter (25 adenomyosepasienter og 25 friske forsøkspersoner), for å sammenligne uttrykk for forskjellige miRNA mellom gruppene og bestemme et passende diagnostisk panel. Det er omtrent 25 kvinner som gjennomgår hysterektomi for adenomyose i løpet av et år ved CUSL. Det er også en nødvendig populasjon for å få statistisk analyserbare data. Dette panelet kan bli testet i fremtiden i en større populasjon for valideringsformål.

Blodprøver (10 ml) vil bli samlet inn dagen for operasjonen av anestesilege fra kvinnelige pasienter som besøker CUSL med formål om hysterektomi. Pasienter vil bli delt inn i to grupper, nemlig studiegruppen (n=25) inkludert pasienter diagnostisert med adenomyose ved MR og/eller ultralyd før operasjon og kontrollgruppen (n=25) bestående av pasienter med patologier som ikke er relatert til endometriet. Etter prøveregistrering i CUSL biobank vil de overføres til forskningslaboratoriet og serum samles umiddelbart ved sentrifugering ved 2500 rpm i 15 minutter ved 4°C etterfulgt av lagring ved -80°C inntil videre bruk. For å isolere sirkulerende miRNA-er, vil et kommersielt sett (Qiagen miRNeasy serum/plasma-sett) brukes og cDNA vil deretter syntetiseres ved hjelp av passende sett (Qiagen miScript II RT). Kommersielle miRNA-matriser vil bli brukt til samtidig å kvantifisere ekspresjon av rundt 1000 miRNA og sammenligne deres ekspresjonsprofiler mellom adenomyosepasienter og upåvirkede forsøkspersoner. Individuelle RT-qPCR-reaksjoner vil deretter bli utført for å validere resultatene. Differensielt uttrykte mikroRNAer i adenomyose vil bli videre analysert for å bestemme deres målgener og påfølgende berørte biologiske funksjoner, ved å bruke passende databaser (TargetScan og miRTarBase). Denne eksperimentelle tilnærmingen vil tillate oss å identifisere unormalt uttrykte miRNA i adenomyose sammenlignet med sykdomsfrie kvinner. Disse kan deretter brukes som ikke-invasive biomarkører for patologien og/eller målrettes for utvikling av nye terapeutiske alternativer.