후성유전학 분석 및 miRNA를 통한 자궁선근증 발병에 대한 새로운 관점 (ADENO-MIRNA)

본 연구는 순환하는 miRNA가 자궁내막증을 포함한 여러 병리에서 비정상적으로 발현되며 임상 환경에서 편리한 진단 도구로 사용될 수 있다는 이전 연구를 기반으로 합니다. 우리는 miRNA가 자궁선근증에서도 차별적으로 발현되며 상태를 진단하기 위한 비침습적 바이오마커 역할을 할 수 있다고 가정합니다. 이 가설을 테스트하기 위해 우리는 그룹 간 서로 다른 miRNA의 발현을 비교하고 적합한 진단 패널을 결정하기 위해 50명의 환자(선근증 환자 25명과 건강한 대상자 25명)를 대상으로 파일럿 연구를 수행할 계획입니다. CUSL에는 1년 동안 자궁선근증으로 인한 자궁절제술을 받은 여성이 약 25명 있습니다. 통계적으로 분석 가능한 데이터를 얻기 위해서도 꼭 필요한 모집단이다. 이 패널은 향후 검증 목적으로 더 많은 모집단을 대상으로 테스트될 수 있습니다.

수술 당일 마취과 의사가 자궁절제술을 위해 CUSL을 방문하는 여성 환자로부터 혈액 샘플(10ml)을 수집합니다. 환자는 수술 전 MRI 및/또는 초음파 검사를 통해 자궁선근증으로 진단된 환자를 포함하는 연구 그룹(n=25)과 자궁내막과 관련 없는 병리가 있는 환자로 구성된 대조군(n=25)의 두 그룹으로 세분화됩니다. CUSL 바이오뱅크에 샘플을 등록한 후 연구실로 옮겨지고 4°C에서 15분간 2500rpm으로 원심분리하여 즉시 혈청을 수집한 후 추가 사용 시까지 -80°C에서 보관합니다. 순환하는 miRNA를 분리하기 위해 상용 키트(Qiagen miRNeasy 혈청/혈장 키트)를 사용한 다음 적절한 키트(Qiagen miScript II RT)를 사용하여 cDNA를 합성합니다. 상업용 miRNA 어레이는 약 1000개 miRNA의 발현을 동시에 정량화하고 선근증 환자와 영향을 받지 않은 피험자 간의 발현 프로필을 비교하는 데 사용됩니다. 그런 다음 개별 RT-qPCR 반응을 수행하여 결과를 검증합니다. 선근증에서 차별적으로 발현되는 microRNA는 적절한 데이터베이스(TargetScan 및 miRTarBase)를 사용하여 표적 유전자와 그에 따라 영향을 받는 생물학적 기능을 확인하기 위해 추가로 분석됩니다. 이 실험적 접근법을 통해 우리는 질병이 없는 여성과 비교하여 자궁선근증에서 비정상적으로 발현된 miRNA를 확인할 수 있습니다. 그런 다음 이들은 병리학의 비침습적 바이오마커로 사용될 수 있으며/또는 새로운 치료 옵션 개발의 목표가 될 수 있습니다.