Nye perspektiver i adenomyose patogenese med epigenetisk analyse og miRNA'er (ADENO-MIRNA)

Nærværende undersøgelse er baseret på tidligere forskning, der påpeger, at cirkulerende miRNA'er er unormalt udtrykt i flere patologier, herunder endometriose, og kan bruges som et praktisk diagnostisk værktøj i kliniske omgivelser. Vi antager, at miRNA'er også er differentielt udtrykt i adenomyose og kan tjene som ikke-invasive biomarkører til at diagnosticere tilstanden. For at teste denne hypotese planlægger vi at udføre et pilotstudie på 50 patienter (25 adenomyosepatienter og 25 raske forsøgspersoner), for at sammenligne ekspression af forskellige miRNA'er mellem grupperne og bestemme et passende diagnostisk panel. Der er cirka 25 kvinder, der gennemgår hysterektomi for adenomyose i løbet af et år på CUSL. Det er også en nødvendig population for at opnå statistisk analyserbare data. Dette panel kan blive testet i fremtiden i en større population med henblik på validering.

Blodprøver (10 ml) vil blive indsamlet dagen for operationen af ​​anæstesilægen fra kvindelige patienter, der besøger CUSL med henblik på hysterektomi. Patienterne vil blive opdelt i to grupper, nemlig undersøgelsesgruppen (n=25) inklusive patienter diagnosticeret med adenomyose ved MR og/eller ultralyd forud for operation og kontrolgruppen (n=25) bestående af patienter med patologier, der ikke er relateret til endometriet. Efter prøveregistrering i CUSL-biobank vil de blive overført til forskningslaboratoriet, og serum vil straks blive opsamlet ved centrifugering ved 2500 rpm i 15 minutter ved 4°C efterfulgt af opbevaring ved -80°C indtil videre brug. For at isolere cirkulerende miRNA'er vil et kommercielt kit (Qiagen miRNeasy serum/plasma-kit) blive brugt, og cDNA vil derefter blive syntetiseret ved hjælp af passende kit (Qiagen miScript II RT). Kommercielle miRNA-arrays vil blive brugt til samtidig at kvantificere ekspression af omkring 1000 miRNA'er og sammenligne deres ekspressionsprofiler mellem adenomyosepatienter og upåvirkede forsøgspersoner. Individuelle RT-qPCR-reaktioner vil derefter blive udført for at validere resultaterne. Differentielt udtrykte mikroRNA'er i adenomyose vil blive yderligere analyseret for at bestemme deres målgener og efterfølgende påvirkede biologiske funktioner ved hjælp af passende databaser (TargetScan og miRTarBase). Denne eksperimentelle tilgang vil give os mulighed for at identificere unormalt udtrykte miRNA'er i adenomyose sammenlignet med sygdomsfrie kvinder. Disse kan derefter bruges som ikke-invasive biomarkører for patologien og/eller målrettes til udvikling af nye terapeutiske muligheder.