Nieuwe perspectieven in de pathogenese van adenomyose met epigenetische analyse en miRNA's (ADENO-MIRNA)

De huidige studie is gebaseerd op eerder onderzoek dat erop wijst dat circulerende miRNA's abnormaal tot expressie komen bij verschillende pathologieën, waaronder endometriose, en kunnen worden gebruikt als een handig diagnostisch hulpmiddel in de klinische setting. We veronderstellen dat miRNA's ook differentieel tot expressie komen in adenomyose en zouden kunnen dienen als niet-invasieve biomarkers om de aandoening te diagnosticeren. Om deze hypothese te testen, zijn we van plan een pilotstudie uit te voeren bij 50 patiënten (25 adenomyosepatiënten en 25 gezonde proefpersonen), om de expressie van verschillende miRNA's tussen de groepen te vergelijken en een geschikt diagnostisch panel te bepalen. Er zijn ongeveer 25 vrouwen die in de loop van een jaar een hysterectomie ondergaan vanwege adenomyose bij de CUSL. Het is ook een noodzakelijke populatie om statistisch analyseerbare gegevens te verkrijgen. Dit panel kan in de toekomst voor validatiedoeleinden in een grotere populatie worden getest.

Bloedmonsters (10 ml) worden op de dag van de operatie door de anesthesist afgenomen van vrouwelijke patiënten die de CUSL bezoeken voor een hysterectomie. Patiënten zullen worden onderverdeeld in twee groepen, namelijk de onderzoeksgroep (n=25) inclusief patiënten waarbij adenomyose is gediagnosticeerd door middel van MRI en/of echografie voorafgaand aan een operatie en de controlegroep (n=25) bestaande uit patiënten met pathologieën die geen verband houden met het endometrium. Na registratie van de monsters in de CUSL-biobank worden ze overgebracht naar het onderzoekslaboratorium en wordt het serum onmiddellijk verzameld door 15 minuten centrifugeren bij 2500 rpm bij 4°C, gevolgd door opslag bij -80°C tot verder gebruik. Om circulerende miRNAs te isoleren, zal een commerciële kit (Qiagen miRNeasy serum/plasmakit) worden gebruikt en cDNA zal vervolgens worden gesynthetiseerd met behulp van een geschikte kit (Qiagen miScript II RT). Commerciële miRNA-arrays zullen worden gebruikt om tegelijkertijd de expressie van ongeveer 1000 miRNA's te kwantificeren en hun expressieprofielen tussen adenomyosepatiënten en niet-getroffen proefpersonen te vergelijken. Vervolgens zullen individuele RT-qPCR-reacties worden uitgevoerd om de resultaten te valideren. Differentieel tot expressie gebrachte microRNA's in adenomyose zullen verder worden geanalyseerd om hun doelgenen en daaropvolgende aangetaste biologische functies te bepalen, met behulp van geschikte databases (TargetScan en miRTarBase). Deze experimentele aanpak zal ons in staat stellen abnormaal tot expressie gebrachte miRNAs te identificeren bij adenomyose in vergelijking met ziektevrije vrouwen. Deze kunnen vervolgens worden gebruikt als niet-invasieve biomarkers voor de pathologie en/of als doelwit voor de ontwikkeling van nieuwe therapeutische opties.