Nya perspektiv på adenomyospatogenes med epigenetisk analys och miRNA (ADENO-MIRNA)

Den aktuella studien är baserad på tidigare forskning som påpekar att cirkulerande miRNA uttrycks onormalt i flera patologier inklusive endometrios, och kan användas som ett praktiskt diagnostiskt verktyg i den kliniska miljön. Vi antar att miRNA också uttrycks differentiellt i adenomyos och kan fungera som icke-invasiva biomarkörer för att diagnostisera tillståndet. För att testa denna hypotes planerar vi att genomföra en pilotstudie på 50 patienter (25 adenomyospatienter och 25 friska försökspersoner), för att jämföra uttryck av olika miRNA mellan grupperna och fastställa en lämplig diagnostisk panel. Det finns ungefär 25 kvinnor som genomgår hysterektomi för adenomyos under loppet av ett år vid CUSL. Det är också en nödvändig population för att få statistiskt analyserbar data. Denna panel kan komma att testas i framtiden i en större population i valideringssyfte.

Blodprover (10 ml) kommer att samlas in dagen för operationen av narkosläkaren från kvinnliga patienter som besöker CUSL i syfte att göra hysterektomi. Patienterna kommer att delas in i två grupper, nämligen studiegruppen (n=25) inklusive patienter som diagnostiserats med adenomyos genom MRT och/eller ultraljud före operation och kontrollgruppen (n=25) som består av patienter med patologier som inte är relaterade till endometriet. Efter provregistrering i CUSL biobank kommer de att överföras till forskningslaboratoriet och serum samlas in omedelbart genom centrifugering vid 2500 rpm i 15 minuter vid 4°C följt av förvaring vid -80°C tills vidare användning. För att isolera cirkulerande miRNA kommer ett kommersiellt kit (Qiagen miRNeasy serum/plasma-kit) att användas och cDNA kommer sedan att syntetiseras med lämpligt kit (Qiagen miScript II RT). Kommersiella miRNA-matriser kommer att användas för att samtidigt kvantifiera uttryck av cirka 1000 miRNA och jämföra deras uttrycksprofiler mellan adenomyospatienter och opåverkade försökspersoner. Individuella RT-qPCR-reaktioner kommer sedan att utföras för att validera resultaten. Differentiellt uttryckta mikroRNA i adenomyos kommer att analyseras ytterligare för att bestämma deras målgener och efterföljande påverkade biologiska funktioner, med hjälp av lämpliga databaser (TargetScan och miRTarBase). Detta experimentella tillvägagångssätt kommer att tillåta oss att identifiera onormalt uttryckta miRNA i adenomyos jämfört med sjukdomsfria kvinnor. Dessa kan sedan användas som icke-invasiva biomarkörer för patologin och/eller målinriktade för utveckling av nya terapeutiska alternativ.