Új perspektívák az adenomyosis patogenezisében epigenetikai analízissel és miRNS-ekkel (ADENO-MIRNA)

A jelen tanulmány olyan korábbi kutatásokon alapul, amelyek rámutatnak arra, hogy a keringő miRNS-ek abnormálisan expresszálódnak számos patológiában, beleértve az endometriózist is, és praktikus diagnosztikai eszközként használhatók a klinikai környezetben. Feltételezzük, hogy a miRNS-ek eltérően expresszálódnak adenomiózisban is, és noninvazív biomarkerként szolgálhatnak az állapot diagnosztizálására. Ennek a hipotézisnek a tesztelésére kísérleti vizsgálatot tervezünk 50 betegen (25 adenomiózisos beteg és 25 egészséges alany), hogy összehasonlítsuk a különböző miRNS-ek expresszióját a csoportok között, és meghatározzuk a megfelelő diagnosztikai panelt. A CUSL-ban hozzávetőleg 25 nőnél vetik át a méheltávolítást adenomiózis miatt egy éven keresztül. A statisztikailag elemezhető adatok beszerzéséhez is szükséges sokaság. Ezt a panelt a jövőben nagyobb populációban tesztelhetik érvényesítés céljából.

Vérmintát (10 ml) vesz az aneszteziológus a műtét napján a CUSL-ba méheltávolítás céljából látogató nőbetegektől. A betegeket két csoportra osztják, nevezetesen a vizsgálati csoportba (n=25), amely magában foglalja azokat a betegeket, akiknél a műtét előtt MRI-vel és/vagy ultrahanggal diagnosztizáltak adenomiózist, és a kontrollcsoportba (n=25), amely az endometriumhoz nem kapcsolódó patológiás betegekből áll. A minták CUSL biobankban történő regisztrációja után a kutatólaboratóriumba kerülnek, és a szérumot azonnal összegyűjtik 2500 fordulat/perc sebességű centrifugálással 15 percig 4°C-on, majd -80°C-on a további felhasználásig. A keringő miRNS-ek izolálásához egy kereskedelmi készletet (Qiagen miRNeasy szérum/plazma kit) használnak, majd a cDNS-t megfelelő készlettel (Qiagen miScript II RT) szintetizálják. Kereskedelmi miRNS-tömböket fognak használni körülbelül 1000 miRNS expressziójának egyidejű mennyiségi meghatározására, és az adenomiózisban szenvedő betegek és a nem érintett alanyok expressziós profiljának összehasonlítására. Ezután egyedi RT-qPCR reakciókat hajtanak végre az eredmények validálására. A differenciálisan expresszált mikroRNS-eket adenomiózisban tovább elemzik, hogy meghatározzák a célgéneket és a későbbi érintett biológiai funkciókat, megfelelő adatbázisok (TargetScan és miRTarBase) segítségével. Ez a kísérleti megközelítés lehetővé teszi számunkra, hogy abnormálisan expresszálódó miRNS-eket azonosítsunk adenomiózisban, összehasonlítva a betegségmentes nőkkel. Ezeket azután a patológia noninvazív biomarkereiként és/vagy új terápiás lehetőségek kidolgozására lehet használni.