根尖性歯周炎病変におけるスクレロスチンの制御 根尖性歯周炎病変における

絶食(8～10時間)状態で、全参加者の静脈血を前腕前腕/基部静脈から採取した。 血液を室温で３０分間保持した後、２５００×ｇで１０分間遠心分離した。 遠心分離後、チューブの上部血清を分離した。 血清の溶血指数 (HI) は、生化学自動分析装置 (Cobas 8000 Chemistry Analyzer、米国) での光干渉を防ぐために測定されました。 溶血指数が 50 mg/dl Hb を超えるサンプルは研究から除外されました。 遠心分離後に得られた血清を 0.5 mL チューブ (Eppendorf, Hamburg, Germany) に等分し、分析当日まで -80 °C で保存しました。

血液による汚染を避けるために、歯周検査の前に GCF サンプルを採取しました。 サンプルの汚染を避けるため、患者には処置前の少なくとも 30 分間は何も食べたり飲んだりしないように求められました。 GCF を採取する領域（AP のある歯の領域と、健常人の同じ領域によく対応する領域）を選択した後、サンプリング領域をコットンロールで隔離し、プラークを除去しました。 穏やかに風乾した後、PerioPaper ストリップ (OraFlow Inc.、ニューヨーク州、米国) をわずかな抵抗を感じるまで静かに置き、30 秒間放置しました。 関連する歯の近心面、遠心面、頬面から 3 つのサンプルを採取しました。 自動ピペットを使用して、ペリオペーパーを0.5 mlエッペンドルフチューブ内で(チューブの風袋重量を差し引いた後)100μlのリン酸緩衝食塩水(PBS)で徹底的に洗浄した。 血液が付着した紙片をサンプルから取り出した。 すべての GCF サンプルは精密天秤 (Shimadzu Libror、モデル AEG-220、ドイツ) で計量され、記録されました。 すべての密閉管内のサンプルをボルテックス装置 (Heidolph Reax Top Vortex、Schwabach、Germany) で約 15 ～ 20 秒間完全に混合しました。 これにより、GCF が PBS に移行することが可能になりました。 チューブ内のペリオペーパーは、汚染されることなく GCF および PBS から除去されました。 チューブ内の残りの抽出物は、分析当日まで -80℃で保管されました。 研究日に得られた結果は、重量/PBS を秤量することによって比例されました。 分析当日、すべての血清と GCF はまず +4℃ でゆっくりと溶解し、次に測定前に室温に戻しました。