根尖周炎病变中硬化蛋白的调节

所有参与者的空腹（8-10小时）静脉血均取自前臂肘前/基静脉。 将血液在室温下保持30分钟后，将其以2500xg离心10分钟。 离心后，分离管的上层血清。 测量血清的溶血指数（HI）以防止生化自动分析仪装置（Cobas 8000化学分析仪，美国）中的光学干扰。 溶血指数大于 50 mg/dl Hb 的样品被排除在研究之外。 将离心后获得的血清等分到 0.5 mL 试管（Eppendorf，汉堡，德国）中，并保存在 - 80 °C 下直至分析当天。

GCF 样本在牙周探查之前采集，以避免血液污染。 为了避免样本污染，要求患者在手术前至少 30 分钟内不要吃或喝任何东西。 选择要进行 GCF 采集的区域（具有 AP 的牙齿区域以及通常对应于健康个体的同一区域的区域）后，用棉卷隔离采样区域，并去除牙菌斑。 轻轻风干后，轻轻放置 PerioPaper 条带（OraFlow Inc.，纽约州，美国）直至感觉到轻微阻力，然后放置 30 秒。 从相关牙齿的近中、远中和颊面采集三个样本。 使用自动移液器用 100 µl 磷酸盐缓冲盐水 (PBS) 在 0.5 ml Eppendorf 管中（减去管的皮重后）彻底清洗 Periopaper。 从样本中取出沾有血迹的纸条。 所有 GCF 样品均在精密天平（Shimadzu Libror，型号 AEG-220，德国）上称重并记录。 使用涡流装置（Heidolph Reax Top Vortex，Schwabach，德国）将所有封闭管中的样品彻底混合约15-20秒。 这使得 GCF 能够进入 PBS。 将管中的周纸从GCF和PBS中取出而没有污染。 管中剩余的提取物储存在-80°C 下直至分析当天。 研究当天获得的结果通过称重重量/PBS 进行比例计算。 分析当天，首先让所有血清和 GCF 在 +4 oC 下缓慢溶解，然后在测量前恢复至室温。