ドナーCIRBPと移植腎機能との相関関係の研究

この研究は、2016年1月から2019年12月までに死亡した患者を対象とした遡及的オープンコホート研究でした。 この研究は、中国における国家死亡臓器提供プログラムのガイドラインに準拠し、中山大学第三付属病院からの腎臓提供に成功した人たちを参加させた。 以下の条件のいずれかを満たすドナーは除外されました。 (a) 血液検体が不足している。 (b) CIRBP レベルに影響を与える汚染された血液検体を持っていた。 (c) 複数の臓器を組み合わせた移植を受けたレシピエント。 (d) 他の臨床試験に参加していた。 (e) 臓器移植の既往歴がある。 (f) 研究者が登録に不適当と判断したその他の症状を有している。 血液検体は臓器調達機関（OPO）によってドナーから収集され、ドナーの同意を得てさまざまな研究に使用されました。 すべてのレシピエント（レシピエント 207 名、ドナー 207 名）を移植後、長期にわたって追跡調査しました。

研究者らは、ヘルシンキ宣言 (20) およびイスタンブール宣言に概説された原則に従いました。 この研究は中山大学のヒト臓器移植および倫理委員会から承認を得ました。 倫理委員会は、世界保健機関の生物医学研究の倫理委員会審査に関する運用ガイドラインに準拠して設立されました。 臓器の割り当ては、中国臓器移植対応システムを通じて公正かつ透明な方法で行われました。 提供の種類はドナーの家族が自主的に決定し、レシピエントは移植後のフォローアップを受けた。 ドナーの家族とレシピエントの両方が、研究におけるサンプルと臨床データの使用に同意しました。

ドナーのデータは中国臓器移植対応システムから入手し、臓器移植組織のメンバーによって完成されました。 さらに、一部のドナー情報は臨床電子医療記録から補足されました。 受信者のデータは臨床電子記録のみから得られました。 研究者らは、レシピエントの初期腎機能状態に基づいて、ドナーとレシピエントを遅延型移植片機能（DGF）グループと即時型移植片機能（IGF）グループに分類した。 DGFは、術後1週間以内の連続3日間の毎日の血漿クレアチニンの前日比10％未満の減少、または術後1週間以内の血清クレアチニン（SCr）が400μmol/Lまで減少しなかった場合と定義されました。 DGFを発症しなかったレシピエントはIGFとして分類されました。 原発性機能不全（PNF）は、手術または再移植後に継続的な透析を必要とする患者で診断されました。 さらに、支出基準ドナーは、次の基準のうち少なくとも 2 つを満たす 60 歳以上、または 50 歳から 59 歳の間の人と定義されました：最終血清クレアチニン > 133 μmol/L、死因としての脳血管障害、および脳血管障害の病歴。高血圧。

サンプル収集 臓器回収前に手術室でドナーから全血検体を採取し、砕いた氷に乗せて研究室に輸送しました。平均移動時間は 2 時間です。 血清を調製するために、全血検体を室温で 2 時間放置し、その後 2 ～ 8℃の温度で 1000 g で 15 分間遠心分離しました。 得られた上清を収集し、実験室内で-80℃で保管しました。 試験前に、血清サンプルを砕いた氷上で解凍し、2～8℃、1000 gで15分間再度遠心分離しました。

寒冷誘導性ＲＮＡ結合タンパク質レベルの測定 ＥＬＩＳＡキット（ＣＳＢ−ＥＬ００５４４０ＨＵ）を使用して、血清ＣＩＲＢＰを検出した。 タンパク質標準を説明書に従って希釈し、異なる濃度の標準およびサンプル (1:10 希釈) 100 μl を 96 ウェル プレートに 2 つずつ加えました。 プレートを暗所で３７℃で２時間インキュベートした。 インキュベーション後、ウェル内の液体を廃棄し、ビオチン標識抗体作業溶液 100 μl を各ウェルに添加しました。 37℃で1時間インキュベートした後、プレートを洗浄液で3回洗浄した。 続いて、西洋ワサビペルオキシダーゼ標識アフィニティー溶液100μlを各ウェルに添加した。 37℃でさらに1時間インキュベートした後、プレートを5回洗浄した。 次に、90μlの基質溶液を各ウェルに添加し、37℃で15分間発色させた後、50μlの停止溶液を使用して反応を停止させた。 マイクロプレートリーダーを使用して5分以内に450 nmで吸光度を測定し、標準曲線に基づいて濃度を計算しました。