モンペリエ大学病院における前向き双胎妊娠コホート (COGEM)

双子を妊娠中の女性

他の：母親からの生物学的サンプル

妊娠中、研究チームは以下のものを採取します：

- 妊婦から15mlの尿。

出産直後、研究チームは以下のものを採取します：

• 母親から10mlの末梢血
• 妊娠の種類に応じて、2cm x 2cmの胎盤片を1～2個
• 各双子について12mlの臍帯血
• 各双子について5cmの臍帯組織片

双子の新生児

他の：双子からの生物学的サンプル

出産翌日、研究チームは以下を収集します：

- 各双生児からの胎便サンプル

生後6か月および1歳時に、両親は以下を収集します：

- 各双生児からの便サンプル

母体外部エクスポソーム

妊娠前2年間および妊娠中の大気汚染物質（NO₂、PM₂.₅、O₃、VOC）への曝露：これらの値はキメラモデルから導出され、曝露曲線下面積が計算されます。

曝露レベルは、登録前2年間の母親の自宅住所、登録時の住所、および妊娠中に4か月以上働いた場合は妊娠中の職場住所に基づいて計算されます。

これらのデータは個別に評価され、統計モデルに組み込まれます。

患者フォローアップ記録からのデータ、質問票からのデータ：

• 環境、一般的な健康状態、ライフスタイル、食事。
• 産科、内科、外科の病歴、現在の妊娠状況。これらのデータは個別に評価され、統計モデルに組み込まれます。

母体インタンエクスポソーム

妊娠25週時点での尿中鉛濃度。 鉛は、モンペリエ大学病院が、妊娠6か月時（導入時）に採取した尿サンプルを用いてICP-MSにより測定します。

これらのデータは個別に評価され、統計モデルに組み込まれます。

異常な新生児体重

成長遅延：2人の子供のうち少なくとも1人における異常な出生体重（kg）（オルセン曲線に基づく第3百分位未満）。

子供の異常

• 出生時における1つ以上の異常な人体計測特性（基準値外）の発生：胎児巨大児、異常な身長、異常な頭囲。
• D+15日、1、3、6、8、10ヶ月、および1歳時における1つ以上の異常な人体計測特性（基準値外）の発生：異常な体重（＜3パーセンタイルまたは＞97パーセンタイル、Olsen曲線）、異常な身長（＜5パーセンタイルまたは＞95パーセンタイル）、異常な頭囲（＜5パーセンタイルまたは＞95パーセンタイル）。
• 出生時または生後1年以内の重篤な健康問題の発生。
• 生後1年以内における以下の状態の1つ以上の発生に関する情報：耳鼻咽喉科、呼吸器、消化器、皮膚科の状態、認定アトピー／アレルギー、早期神経発達障害。

これら全てのデータは個別に評価され、統計モデルに組み込まれます。

産科合併症

患者フォローアップ記録に記載されている産科合併症のうち、少なくとも1つの発生。

「双子の比較」

• 双生児の起源となる妊娠の種類：一絨毛膜（一羊膜または二羊膜）または二絨毛膜
• 双生児の性別：女子2人、男子2人、女子1人と男子1人

子供の外部エクスポソーム

妊娠期間中および生後1年間の大気汚染物質（NO2、PM2.5、O3、VOCs）への曝露：これらの値はChimeraモデルから導出され、曝露曲線下面積が計算されます。

曝露レベルは、妊娠期間中および子どもの生後1年間における母親の個人住所および職業住所に基づいて決定されます。

これらのデータは個別に評価され、統計モデルに組み込まれます。

患者フォローアップ記録からのデータ、アンケートからのデータ：

• 環境、生活習慣、食事、受けた治療、遊びとケア。
これらのデータは個別に評価され、統計モデルに組み込まれます。

小児の内部エクスポソーム

• PFAS（パーフルオロアルキルおよびポリフルオロアルキル物質）への曝露は、出生時に採取されたへその緒の一部を使用して測定できます。
へその緒の一部におけるPFASの測定は、適格な研究所に委託されます。
PFASは組織から抽出され、次に分離され、最終的に高精度の分析技術を使用して定量化されます。

これらのデータは個別に評価され、統計モデルに組み込まれます。

• 重金属への曝露は、出生時に採取されたへその緒の血液サンプルを使用して測定できます。
重金属の測定は、適格な研究所に委託されます。
血液中に存在する元素（鉛、マンガン、銅、亜鉛、水銀、カドミウム、ヒ素、セレン）は、ミネラル化された後（内部方法ESS_ANA_PT_641）、誘導結合プラズマ質量分析法（ICP-MSMS）によって測定されます。

これらのデータは個別に評価され、統計モデルに組み込まれます。

母親のエクスポゾームへの補足

エピジェネティクス：

母体エピゲノム：出産時に採取された血液サンプル中のゲノムの特性評価。 エピジェネティクス解析は、適切な能力を有する研究所へ外注されます。 メチル化シーケンシングは、Xgen Methyl-Seq DNAキット（IDT DNA）を用いて実施されます。

これらのデータは個別に評価され、統計モデルに組み込まれます。

栄養素と汚染物質のプロファイリング：

• 出産時の母体血液中の栄養素（炭水化物、アミノ酸、ビタミン、ミネラル、脂肪酸）。 各栄養素タイプに特化した手法を用いて、適切な能力を有する研究所へ外注されます。

• 重金属曝露：

  • 慢性的：尿中の鉛；急性的：血液中の重金属（「8. 子どもの内部エクスポソーム」参照）。
  • 母体-胎児間移行：胎盤中の重金属、適切な能力を有する研究所が特定の手法を用いて分析。

これらのデータは個別に評価され、統計モデルに組み込まれます。

子供のエクスポソームの補足

• エピゲノム：出生時の臍帯血から取得；分析は有能なラボに外部委託。 IDT DNA社のXgen Methyl-Seq DNAキットを用いたメチル化シーケンシング。 データは個別に評価され、統計モデルに統合されます。
• 母体代謝物：登録時に採取した尿で評価；有能なラボに外部委託。 LC-MS/MS、GC-MS、または¹H-NMRを用いた尿中メタボロミクス（非標的または標的小分子代謝物）、スポット尿または24時間尿、クレアチニン補正により、母体代謝とエクスポソームをプロファイリング。 データは個別に評価され、統計的にモデル化されます。
• 双子のマイクロバイオーム：出生時の胎便、および6ヶ月と1歳時の便；専門の外部ラボによりシーケンシングで分析。 データは個別に評価され、統計的にモデル化されます。
• IgAおよびIgE：新生児在院中の母乳で定量化；モンペリエ大学病院による分析。 データは個別に評価され、統計的にモデル化されます。

PMおよびPMT物質

環境中の化学汚染物質（残留性・移動性（PM）および残留性・移動性・毒性（PMT））は、妊婦から採取した5 mlの尿サンプルから定量されます。 尿サンプルは、モンペリエにあるUMR 5151 HydrosciencesのElena Gomezチームによって分析されます。