구강 체액 수집 장치의 평가

VioOne 구강 체액 샘플 수집 장치(이하 VioOne 장치라고 함)를 평가하기 위한 연구는 아래에 설명된 여러 하위 연구로 구성됩니다.

A. 회복 연구

이 연구는 VioOne 샘플 수집 장치로 수집한 비흡연자의 구강액에 첨가된 코티닌 회수율을 결정할 것입니다.

1. 샘플 수집

   비흡연자라고 자가 보고한 5명의 개인으로부터 VioOne 패키지 삽입물에 따라 구강액을 채취합니다. 수집된 샘플은 0, 5, 10, 15 또는 25ng/mL의 농도로 코티닌으로 개별적으로 스파이킹됩니다. 각 농도의 두 세트가 준비됩니다. 한 세트는 테스트 전에 2-8°C에서 보관되며 한 세트는 일상적인 배송 조건에 따라 배송되고 반환 시 테스트됩니다.

2. 테스트

   그런 다음 각 샘플을 Calbiotech Cotinine ELISA 분석으로 이중으로 테스트하고 검출된 농도를 스파이크된 농도와 비교하여 각 수준에 대한 회수율을 계산합니다.

3. 데이터 분석 회수율은 검출된 농도를 첨가된 농도와 비교하여 각 수준에 대해 계산됩니다.

B. 민감도/정확도 연구 연구 목표는 VioOne 샘플 수집 장치로 수집한 구강액 샘플을 사용할 때 Calbiotech Cotinine ELISA가 흡연자와 비흡연자를 구별할 수 있음을 보여주는 것입니다.

1. 샘플 수집 최소 2개의 연구 사이트가 이 연구에 참여합니다. 약 218명의 개인이 이 연구에 등록될 것입니다. 최소 58개의 수집된 샘플은 자기 선언 흡연자로부터 수집된 것이어야 합니다. 구강액 샘플은 개인으로부터 수집되며, 개인이 흡연자인지 여부와 하루 평균 담배 수에 관계없이 사전 동의 및 익명 방식으로 자기 보고를 제공합니다. 이 연구를 위해 각 개인으로부터 두 개의 샘플을 수집할 것입니다. VioOne 수집 장치를 사용하여 하나의 샘플을 수집하고 시판되는 타액 수집 컵을 사용하여 하나를 수집합니다.

   환자를 등록하기 위한 연령, 성별 또는 인종 기준은 없습니다.

2. 테스트 VioOne 샘플 수집 장치로 수집한 모든 샘플은 Calbiotech Cotinine ELISA로 테스트하고 타액 수집 컵으로 수집한 순수한 타액 샘플은 GC/MS로 테스트하며 후자는 표준 방법입니다.
3. 데이터 분석 GC/MS 결과는 VioOne 구강 유체 수집 장치로 수집한 구강 유체 샘플을 사용하여 분석의 임상적 민감도와 특이성을 평가하기 위한 황금 표준으로 사용됩니다.

C. 분석 특이성 연구 음료 및 가정용 재료는 구강액에서 코티닌 검출의 간섭에 대해 테스트됩니다.

1. 샘플 수집 구강액 샘플은 비흡연자로 자가 보고된 개인으로부터 수집되며 결과 샘플/완충제 매트릭스가 합동됩니다.

   풀은 15개의 분취량으로 나뉘고 다음 14개의 화합물 각각에 개별적으로 스파이크됩니다. 풀에서 하나의 분취량은 스파이크되지 않은 상태로 유지됩니다. 그런 다음 각각의 스파이크된 분취량은 3개의 분취량으로 더 나뉩니다. 하나의 알리쿼트에는 화합물만 첨가되고, 하나의 알리쿼트는 5ng/mL의 코티닌이 추가로 첨가되며, 하나의 알리쿼트에는 15ng/mL의 코티닌이 추가로 첨가됩니다.

2. 테스트 각 샘플은 이중으로 테스트됩니다.

   달리 명시되지 않는 한 다음 화합물은 각각 10%의 최종 농도로 스파이크됩니다.

   설탕 물 알코올(에탄올) 치약 전혈(10mg/mL) 크랜베리 ​​주스 과산화수소 베이킹 소다 염화나트륨 오렌지 주스 콜라 기침 시럽 살균수 헤모글로빈(10mg/mL)

3. 데이터 분석 결과는 정밀 연구에서 측정된 예상 성능과 비교됩니다. (정밀 연구는 채취한 사람의 구강액을 사용할 필요가 없습니다)

D. 검정 특이성 연구

잠재적인 음식 및 기타 구강 오염 물질의 영향은 시한 연구에서 평가됩니다.

1. 샘플 수집

   비흡연자로 자가 보고된 10명의 개인이 이 연구를 위해 모집될 것입니다.

   연구 시작 직전에 각 개인으로부터 VioOne 샘플 수집 장치를 사용하여 하나의 샘플을 수집합니다. 그런 다음 각 개인에게 딱딱한 사탕 한 조각을 제공합니다. 소비 직후 VioOne으로 추가 샘플을 수집합니다. 소비 후 10분, 최대 3시간마다 30분마다 추가 샘플을 수집합니다.

   모든 샘플이 수집된 후 각 샘플은 두 개의 분취량으로 나뉩니다. 하나의 알리쿼트에는 5ng/mL 코티닌이 첨가되고 하나의 알리쿼트에는 15ng/mL 코티닌이 첨가됩니다.

2. 테스트 각 샘플/스파이크/시점은 3중으로 테스트됩니다.
3. 데이터 분석 결과는 정밀 연구에서 측정된 예상 성능과 비교됩니다. (정밀 연구는 채취한 사람의 구강액을 사용할 필요가 없습니다)

E. 시료 수집 완충액 내 시료의 안정성 시간이 지남에 따라 다양한 온도에서 시료 수집 완충액에 저장된 시료의 안정성을 확립하기 위한 연구가 수행될 것입니다.

1. 샘플 수집

   비흡연자로 자가 보고된 개인으로부터 구강액 샘플을 수집하고 결과 샘플/완충제 매트릭스를 모을 것입니다.

   풀은 3개의 분취량으로 분할됩니다. 한 분취량에는 7.5ng/mL 코티닌이 첨가되고, 한 분취량에는 10ng/mL 코티닌이 첨가되며, 한 분취량에는 첨가되지 않은 상태로 남게 됩니다.

   스파이크와 비스파이크 각각을 4개의 튜브에 나누어 -20 oC, 2-8oC, 실온 및 37oC에서 보관합니다.

2. 테스트

   각 샘플은 0일, 7일, 14일, 21일, 28일 및 35일에 8회 반복 테스트됩니다.

3. 데이터 분석

샘플에 대한 특정 날짜의 코티닌 농도에 대한 95% 신뢰 구간이 0일의 신뢰 구간과 겹치는 테스트 시점에서 샘플이 안정적인 것으로 간주됩니다.

F. ELISA 및 장치 안정성

VioOne 샘플 수집 장치와 함께 Calbiotech Cotinine ELISA 분석의 안정성 및 유효 기간을 확립하기 위해 장기 안정성 연구가 수행될 것입니다.

1. 샘플 수집

   각 테스트 시점에서 세 개인의 샘플이 수집됩니다. 각 개인은 3개의 샘플을 제공합니다. 하나는 VioOne 샘플 수집 장치의 3개 ​​로트당 하나씩입니다.

   VioOne 샘플 수집 장치의 각 로트에서 얻은 결과 샘플/버퍼 매트릭스가 풀링됩니다(풀당 총 3개의 개별 샘플 및 총 3개의 풀).

   결과 풀은 두 개의 분취 량으로 나뉩니다. 하나의 알리쿼트는 5ng/mL 코티닌과 25ng/mL 코티닌으로 스파이킹됩니다.

2. 테스트

   스파이크된 각 샘플은 21개월 동안 8회 반복 테스트됩니다. 테스트 과정에서 3개의 ELISA 분석 로트가 사용됩니다.

3. 데이터 분석

Calbiotech Cotinine ELISA 분석 및 VioOne 샘플 수집 장치는 각 시점에서 테스트한 샘플이 0일의 코티닌 농도와 겹치는 95% 신뢰 구간 내에서 결과를 생성할 때 안정적인 것으로 간주됩니다.