Оценка устройства для сбора пероральной жидкости

Исследование по оценке устройства для взятия проб пероральной жидкости VioOne (далее именуемого «Устройство VioOne») будет состоять из нескольких дополнительных исследований, как описано ниже:

А. Исследование восстановления

Это исследование определит процент восстановления котинина, добавленного в ротовую жидкость некурящих, собранную с помощью устройства для взятия проб VioOne.

1. Сбор образцов

   Оральная жидкость будет собираться в соответствии с листком-вкладышем VioOne у пяти человек, которые сами сообщили, что не курят. Собранные образцы затем будут индивидуально обогащены котинином до концентраций 0, 5, 10, 15 или 25 нг/мл. Будут подготовлены два набора каждой концентрации. Один комплект будет храниться при температуре 2–8°C до тестирования, а другой комплект будет отправлен в соответствии с обычными условиями доставки и протестирован по возвращении.

2. Тестирование

   Затем каждый образец будет протестирован в двух экземплярах с помощью анализа Calbiotech Cotinine ELISA, и процент извлечения будет рассчитан для каждого уровня путем сравнения обнаруженных концентраций с пиковыми концентрациями.

3. Анализ данных Процент восстановления будет рассчитываться для каждого уровня путем сравнения обнаруженных концентраций с пиковыми концентрациями.

B. Исследование чувствительности/точности Целью исследования является показать, что Calbiotech Cotinine ELISA способен отличить курильщиков от некурящих при использовании образцов ротовой жидкости, собранных с помощью устройства для сбора образцов VioOne.

1. Сбор проб В этом исследовании примут участие как минимум два исследовательских центра. В этом исследовании примут участие около 218 человек. Не менее 58 образцов должны быть взяты у самозаявленных курильщиков. Образцы ротовой жидкости будут собираться у лиц, которые дадут информированное согласие и анонимно сообщат о себе, является ли человек курильщиком и сколько сигарет выкуривает в среднем в день. Два образца будут взяты от каждого человека для этого исследования. Один образец будет взят с помощью устройства для сбора слюны VioOne, а другой — с помощью имеющейся в продаже чашки для сбора слюны.

   Для включения пациентов не будет критериев возраста, пола или расы.

2. Тестирование Все образцы, собранные с помощью устройства для сбора образцов VioOne, будут протестированы с помощью Calbiotech Cotinine ELISA, а чистые образцы слюны, собранные с помощью чашек для сбора слюны, будут протестированы с помощью ГХ/МС, последний метод является золотым стандартом.
3. Анализ данных Результаты ГХ/МС будут использоваться в качестве золотого стандарта для оценки клинической чувствительности и специфичности анализа с использованием образцов ротовой жидкости, собранных с помощью устройства для сбора ротовой жидкости VioOne.

C. Исследование специфичности анализа. Напитки и предметы домашнего обихода будут проверены на наличие помех при обнаружении котинина в ротовой жидкости.

1. Сбор образцов Образцы ротовой жидкости будут взяты у лиц, которые сами заявили, что они не курят, и полученная матрица образцов/буфера будет объединена.

   Пул будет разделен на 15 аликвот и индивидуально добавлено каждое из следующих 14 соединений. Одна аликвота из пула останется неразбавленной. Каждая обогащенная аликвота будет далее разделена на три аликвоты. В одну аликвоту будет добавлено только соединение, в одну аликвоту будет дополнительно добавлено 5 нг/мл котинина, а в одну аликвоту будет дополнительно добавлено 15 нг/мл котинина.

2. Тестирование Затем каждый образец будет тестироваться в двух экземплярах.

   Каждое из следующих соединений будет добавлено в конечной концентрации 10%, если не указано иное:

   Сахар Вода Спирт (этанол) Зубная паста Цельная кровь (10 мг/мл) Клюквенный сок Перекись водорода Пищевая сода Хлорид натрия Апельсиновый сок Кола Сироп от кашля Антисептическая вода Гемоглобин (10 мг/мл)

3. Результаты анализа данных будут сравниваться с ожидаемыми характеристиками, измеренными в ходе исследования прецизионности. (прецизионное исследование не требует использования собранной ротовой жидкости человека)

D. Исследование специфичности анализа

Влияние потенциальных продуктов питания и других загрязнителей полости рта будет оцениваться в ходе исследования по времени.

1. Сбор образцов

   Для этого исследования будут набраны десять человек, которые, по их словам, не курят.

   Один образец будет взят с помощью устройства для сбора образцов VioOne у каждого человека непосредственно перед началом исследования. Затем каждому человеку дадут по кусочку леденца. Дополнительные образцы будут собираться с помощью VioOne сразу после употребления, через десять минут после употребления, а затем каждые тридцать минут до трех часов.

   После того, как все образцы собраны, каждый образец будет разделен на две аликвоты. В одну аликвоту будет добавлено 5 нг/мл котинина, а в другую аликвоту будет добавлено 15 нг/мл котинина.

2. Тестирование Каждая проба/всплеск/момент времени будет тестироваться трижды.
3. Результаты анализа данных будут сравниваться с ожидаемыми характеристиками, измеренными в ходе исследования прецизионности. (прецизионное исследование не требует использования собранной ротовой жидкости человека)

E. Стабильность образца в буфере для сбора образцов Будет проведено исследование для установления стабильности образцов, хранящихся в буфере для сбора образцов, при различных температурах с течением времени.

1. Сбор образцов

   Образцы ротовой жидкости будут собираться у лиц, которые сами заявили, что они не курят, и полученная матрица образцов/буфера будет объединена.

   Пул будет разделен на три аликвоты. В одну аликвоту будет добавлено 7,5 нг/мл котинина, в одну аликвоту будет добавлено 10 нг/мл котинина, и одна аликвота останется без добавления.

   Аликвоты с добавлением и без добавления будут разделены на четыре пробирки и храниться при температуре -20°C, 2-8°C, комнатной температуре и 37°C.

2. Тестирование

   Каждый образец будет протестирован в восьми повторах на 0, 7, 14, 21, 28 и 35 день.

3. Анализ данных

Образец считается стабильным в момент времени испытания, когда 95% доверительный интервал для концентрации котинина в данный день для образца перекрывается с таковым в день 0.

F. ELISA и стабильность устройства

Будет проведено долгосрочное исследование стабильности для определения стабильности и срока годности анализа Calbiotech Cotinine ELISA вместе с устройством для сбора образцов VioOne.

1. Сбор образцов

   В каждый момент времени тестирования будут собираться образцы от трех человек. Каждое лицо предоставит три образца — по одному с каждой из трех партий устройств для сбора образцов VioOne.

   Результирующая матрица образцов/буферов, полученная из каждой партии устройства для сбора образцов VioOne, будет объединена (всего 3 отдельных образца на пул и всего 3 пула).

   Полученные пулы затем будут разделены на две аликвоты. В одну аликвоту добавляют 5 нг/мл котинина и 25 нг/мл котинина.

2. Тестирование

   Каждый образец с добавлением будет протестирован в восьми повторностях в течение 21 месяца. В ходе тестирования будут использованы три партии анализов ELISA.

3. Анализ данных

Анализ Calbiotech Cotinine ELISA и устройство для сбора образцов VioOne считаются стабильными, если образцы, протестированные в каждый момент времени, дают результаты в пределах 95% доверительного интервала для концентрации котинина, перекрывающейся с днем ​​0.