Ocena urządzenia do zbierania płynów w jamie ustnej

Badanie mające na celu ocenę urządzenia do pobierania próbek płynu ustnego VioOne (zwanego dalej urządzeniem VioOne) będzie się składać z kilku badań cząstkowych opisanych poniżej:

A. Studium zdrowienia

Badanie to określi procent odzysku kotyniny dodanej do płynu ustnego osób niepalących pobranych za pomocą urządzenia do pobierania próbek VioOne.

1. Kolekcja próbek

   Płyn ustny zostanie pobrany zgodnie z ulotką dołączoną do opakowania VioOne od pięciu osób, które same zgłosiły się jako osoby niepalące. Zebrane próbki będą następnie indywidualnie wzbogacane kotyniną do stężenia 0, 5, 10, 15 lub 25 ng/ml. Przygotowane zostaną dwa zestawy każdego stężenia. Jeden zestaw będzie przechowywany przed badaniem w temperaturze 2-8°C, a jeden zestaw zostanie wysłany zgodnie z rutynowymi warunkami wysyłki i przetestowany po zwrocie.

2. Testowanie

   Każda próbka zostanie następnie przetestowana w dwóch powtórzeniach za pomocą testu Calbiotech Cotinine ELISA, a procentowy odzysk zostanie obliczony dla każdego poziomu przez porównanie wykrytych stężeń ze stężeniami wzbogaconymi.

3. Analiza danych Procent odzysku zostanie obliczony dla każdego poziomu poprzez porównanie wykrytych stężeń ze stężeniami, do których został dodany.

B. Badanie czułości/dokładności Celem badania jest wykazanie, że test Calbiotech Cotinine ELISA jest w stanie odróżnić palaczy od osób niepalących przy użyciu próbek płynu ustnego pobranych za pomocą urządzenia do pobierania próbek VioOne.

1. Pobieranie próbek W tym badaniu będą uczestniczyć co najmniej dwa ośrodki badawcze. W badaniu weźmie udział około 218 osób. Co najmniej 58 pobranych próbek musi pochodzić od zadeklarowanych palaczy. Próbki płynu ustnego będą pobierane od osób, które wyrażą świadomą zgodę i samodzielnie zgłoszą się w sposób anonimowy, czy dana osoba jest palaczem i ile średnio wypala papierosów dziennie. Od każdej osoby zostaną pobrane dwie próbki do tego badania. Jedna próbka zostanie pobrana za pomocą urządzenia do pobierania VioOne, a druga za pomocą dostępnego w handlu kubka do pobierania śliny.

   Nie będzie żadnych kryteriów dotyczących wieku, płci ani rasy przy zapisywaniu pacjentów.

2. Testowanie Wszystkie próbki pobrane za pomocą urządzenia do pobierania próbek VioOne zostaną przetestowane za pomocą testu Calbiotech Cotinine ELISA, a czyste próbki śliny pobrane za pomocą kubków do pobierania śliny zostaną przetestowane metodą GC/MS, która jest metodą złotego standardu.
3. Analiza danych Wyniki GC/MS zostaną wykorzystane jako złoty standard do oceny klinicznej czułości i swoistości testu przy użyciu próbek płynu ustnego pobranych za pomocą urządzenia do pobierania płynów ustnych VioOne.

C. Badanie swoistości testu Napoje i materiały gospodarstwa domowego zostaną przetestowane pod kątem interferencji w wykrywaniu kotyniny w płynie ustnym.

1. Pobieranie próbek Próbki płynu ustnego zostaną pobrane od osób, które same zgłosiły się jako osoby niepalące, a otrzymana matryca próbki/buforu zostanie zebrana.

   Pula zostanie podzielona na 15 podwielokrotności i indywidualnie dodana do każdego z następujących 14 związków. Jedna porcja z puli pozostanie niewzbogacona. Każda wzbogacona porcja zostanie następnie podzielona na trzy porcje. Jedna porcja pozostanie wzbogacona tylko związkiem, jedna porcja zostanie dodatkowo wzbogacona 5 ng/ml kotyniny, a jedna porcja zostanie dodatkowo wzbogacona 15 ng/ml kotyniny.

2. Testowanie Każda próbka zostanie następnie przetestowana w dwóch powtórzeniach.

   Następujące związki zostaną wzbogacone w końcowym stężeniu 10%, chyba że zaznaczono inaczej:

   Cukier Woda Alkohol (Etanol) Pasta do zębów Pełna krew (10 mg/ml) Sok żurawinowy Nadtlenek wodoru Soda oczyszczona Chlorek sodu Sok pomarańczowy Cola Syrop na kaszel Woda antyseptyczna Hemoglobina (10 mg/ml)

3. Wyniki analizy danych zostaną porównane z oczekiwaną wydajnością zmierzoną w badaniu precyzji. (dokładne badanie nie wymaga użycia pobranego płynu ustnego)

D. Badanie specyficzności testu

Wpływ potencjalnej żywności i innych zanieczyszczeń jamy ustnej zostanie oceniony w badaniu czasowym.

1. Kolekcja próbek

   Do tego badania zostanie zrekrutowanych dziesięć osób, które same zgłosiły się jako osoby niepalące.

   Bezpośrednio przed rozpoczęciem badania od każdej osoby zostanie pobrana jedna próbka za pomocą urządzenia do pobierania próbek VioOne. Następnie każda osoba otrzyma kawałek twardego cukierka do spożycia. Dodatkowe próbki zostaną pobrane za pomocą VioOne natychmiast po spożyciu, dziesięć minut po spożyciu, a następnie co trzydzieści minut do trzech godzin.

   Po zebraniu wszystkich próbek, każda próbka zostanie podzielona na dwie porcje. Do jednej porcji dodaje się 5 ng/ml kotyniny, a do drugiej 15 ng/ml kotyniny.

2. Testowanie Każda próbka/pik/punkt czasowy zostanie przetestowana w trzech powtórzeniach
3. Wyniki analizy danych zostaną porównane z oczekiwaną wydajnością zmierzoną w badaniu precyzji. (dokładne badanie nie wymaga użycia pobranego płynu ustnego)

E. Stabilność próbki w buforze do pobierania próbek Przeprowadzone zostanie badanie w celu ustalenia stabilności próbek przechowywanych w buforze do pobierania próbek w różnych temperaturach w czasie.

1. Kolekcja próbek

   Próbki płynu ustnego zostaną pobrane od osób, które same zgłosiły się jako osoby niepalące, a otrzymana matryca próbki/buforu zostanie zebrana.

   Pula zostanie podzielona na trzy porcje. Jedna porcja zostanie wzbogacona 7,5 ng/ml kotyniny, jedna porcja zostanie wzbogacona 10 ng/ml kotyniny, a jedna porcja pozostanie niewzbogacona.

   Każdy z kolców i niekolca zostanie podzielony na porcje do czterech probówek i przechowywany w temperaturze -20 oC, 2-8oC, temperaturze pokojowej i 37oC.

2. Testowanie

   Każda próbka zostanie przebadana w ośmiu powtórzeniach w dniach 0, 7, 14, 21, 28 i 35.

3. Analiza danych

Próbkę uznaje się za stabilną w punkcie czasowym testu, gdy 95% przedział ufności dla stężenia kotyniny w danym dniu dla próbki pokrywa się z przedziałem ufności z dnia 0.

F. ELISA i stabilność urządzenia

Przeprowadzone zostanie długoterminowe badanie stabilności w celu ustalenia stabilności i dat ważności testu Calbiotech Cotinine ELISA wraz z urządzeniem do pobierania próbek VioOne.

1. Kolekcja próbek

   W każdym punkcie czasowym badania zostaną pobrane próbki od trzech osób. Każda osoba dostarczy trzy próbki — po jednej z każdej z trzech serii urządzeń do pobierania próbek VioOne.

   Otrzymana matryca próbki/buforu uzyskana z każdej serii urządzenia do pobierania próbek VioOne zostanie połączona (w sumie 3 pojedyncze próbki na pulę i łącznie 3 pule).

   Powstałe pule zostaną następnie podzielone na dwie porcje. Do jednej podwielokrotności dodaje się 5 ng/ml kotyniny i 25 ng/ml kotyniny.

2. Testowanie

   Każda wzbogacona próbka zostanie przetestowana w ośmiu powtórzeniach w okresie 21 miesięcy. W trakcie testów zostaną wykorzystane trzy serie testów ELISA.

3. Analiza danych

Test Calbiotech Cotinine ELISA i urządzenie do pobierania próbek VioOne są uważane za stabilne, gdy próbki testowane w każdym punkcie czasowym dają wyniki w 95% przedziale ufności dla stężenia kotyniny pokrywają się z wynikami z dnia 0.