Suun kautta otettavan nesteenkeräyslaitteen arviointi

Tutkimus VioOne-suullisen nestenäytteenkeräyslaitteen (tässä VioOne-laitteen) arvioimiseksi koostuu useista alatutkimuksista, kuten alla on kuvattu:

A. Toipumistutkimus

Tämä tutkimus määrittää VioOne-näytteenottolaitteella kerätyn tupakoimattomien suunesteeseen lisätyn kotiniinin prosenttiosuuden.

1. Näytekokoelma

   Suun nestettä kerätään VioOne-pakkausselosteen mukaisesti viideltä henkilöltä, jotka ovat ilmoittaneet olevansa tupakoimattomia. Sitten kerättyihin näytteisiin lisätään kotiniinia pitoisuuksiksi 0, 5, 10, 15 tai 25 ng/ml. Jokaisesta pitoisuudesta valmistetaan kaksi sarjaa. Yksi sarja säilytetään 2–8 °C:ssa ennen testausta ja yksi sarja toimitetaan rutiinilähetysolosuhteita kohti ja testataan palautuksen yhteydessä.

2. Testaus

   Jokainen näyte testataan sitten kahtena rinnakkaisena Calbiotech Cotinine ELISA -määrityksellä ja prosentuaalinen saanto lasketaan kullekin tasolle vertaamalla havaittuja pitoisuuksia piikkipitoisuuksiin.

3. Tietojen analyysi Saantoprosentti lasketaan jokaiselle tasolle vertaamalla havaittuja pitoisuuksia piikkipitoisuuksiin.

B. Herkkyys/tarkkuustutkimus Tutkimuksen tavoitteena on osoittaa, että Calbiotech Cotinine ELISA pystyy erottamaan tupakoijat tupakoimattomista, kun käytetään VioOne-näytteenkeräyslaitteella otettuja suunestenäytteitä.

1. Näytteenotto Tähän tutkimukseen osallistuu vähintään kaksi tutkimuspaikkaa. Tähän tutkimukseen otetaan mukaan noin 218 henkilöä. Vähintään 58 kerätyn näytteen tulee olla itse ilmoittavilta tupakoijilta. Suunestenäytteitä kerätään henkilöiltä, ​​jotka anonyyminä antavat tietoisen suostumuksensa ja ilmoittavat siitä, tupakoiko henkilö ja polttaako hän keskimäärin päivässä. Jokaiselta yksilöltä otetaan kaksi näytettä tätä tutkimusta varten. Yksi näyte otetaan VioOne-keräyslaitteella ja yksi kaupallisesti saatavalla syljenkeräyskupilla.

   Potilaiden rekisteröinnissä ei ole ikää, sukupuolta tai rotua koskevia kriteerejä.

2. Testaus Kaikki VioOne-näytteenkeräyslaitteella kerätyt näytteet testataan Calbiotech Cotinine ELISA:lla ja syljenkeräyskupeilla kerätyt puhtaat sylkinäytteet testataan GC/MS:llä, jälkimmäinen on kultastandardimenetelmä.
3. Tietojen analyysi GC/MS-tuloksia käytetään kultaisena standardina määrityksen kliinisen herkkyyden ja spesifisyyden arvioinnissa käyttämällä VioOne Oral Fluid Collection Device -laitteella kerättyjä oraalisia nestenäytteitä.

C. Määrityksen spesifisyystutkimus Juomat ja kotitalousmateriaalit testataan häiriöiden varalta kotiniinin havaitsemisessa suun nesteestä.

1. Näytteenotto Oral Fluid -näytteet kerätään henkilöiltä, ​​jotka ovat ilmoittaneet olevansa tupakoimattomia, ja tuloksena oleva näyte/puskurimatriisi yhdistetään.

   Pooli jaetaan 15 alikvoottiin, ja kuhunkin seuraavaan 14 yhdisteeseen lisätään erikseen. Yksi alikvootti altaasta säilyy ilman piikkiä. Jokainen piikkinäyte jaetaan sitten edelleen kolmeen osaan. Yhteen osaan lisätään vain yhdistettä, yhteen osaan lisätään edelleen 5 ng/ml kotiniinia ja yhteen osaan lisätään edelleen 15 ng/ml kotiniinia.

2. Testaus Jokainen näyte testataan sitten kahtena kappaleena.

   Seuraavien yhdisteiden lopullinen konsentraatio on 10 %, ellei toisin mainita:

   Sokeri Vesi Alkoholi (etanoli) Hammastahna Kokoverinen (10mg/ml) Karpalomehu Vetyperoksidi Ruokasooda Natriumkloridi Appelsiinimehu Cola Yskäsiirappi Antiseptinen vesi Hemoglobiini (10mg/ml)

3. Tietojen analyysin tuloksia verrataan tarkkuustutkimuksessa mitattuun odotettuun suorituskykyyn. (tarkkuustutkimus ei vaadi kerätyn ihmisen suunesteen käyttöä)

D. Määrityksen spesifisyystutkimus

Mahdollisten ruoan ja muiden suuontelon kontaminanttien vaikutusta arvioidaan ajoitetussa tutkimuksessa.

1. Näytekokoelma

   Tähän tutkimukseen otetaan mukaan kymmenen itse tupakoimattomiksi ilmoittanutta henkilöä.

   Yksi näyte otetaan VioOne-näytteenkeräyslaitteella jokaiselta henkilöltä välittömästi ennen tutkimuksen aloittamista. Jokaiselle yksilölle annetaan sitten pala kovaa karkkia nautittavaksi. Lisänäytteet otetaan VioOnella välittömästi kulutuksen jälkeen, kymmenen minuutin kuluttua kulutuksen jälkeen ja joka 30. minuutti kolmeen tuntiin asti.

   Kun kaikki näytteet on kerätty, jokainen näyte jaetaan kahteen osaan. Yhteen alikvootiin lisätään kotiniinia 5 ng/ml ja yhteen osaan 15 ng/ml kotiniinia.

2. Testaus Jokainen näyte/piikki/aikapiste testataan kolmena kappaleena
3. Tietojen analyysin tuloksia verrataan tarkkuustutkimuksessa mitattuun odotettuun suorituskykyyn. (tarkkuustutkimus ei vaadi kerätyn ihmisen suunesteen käyttöä)

E. Näytteen stabiilisuus näytteenkeräyspuskurissa Suoritetaan tutkimus näytteenkeräyspuskurissa eri lämpötiloissa eri lämpötiloissa säilytettyjen näytteiden stabiilisuuden määrittämiseksi.

1. Näytekokoelma

   Oral Fluid -näytteet kerätään henkilöiltä, ​​jotka ovat ilmoittaneet olevansa tupakoimattomia, ja tuloksena oleva näyte/puskurimatriisi yhdistetään.

   Allas jaetaan kolmeen osaan. Yhteen alikvoottiin lisätään kotiniinia 7,5 ng/ml, yhteen osaan lisätään 10 ng/ml kotiniinia ja yhteen osaan ei lisätä lisäystä.

   Jokainen piikki ja ei-piikki jaetaan neljään putkeen ja säilytetään -20 oC:ssa, 2-8 oC:ssa, huoneenlämmössä ja 37 oC:ssa.

2. Testaus

   Jokainen näyte testataan kahdeksalla rinnakkaisnäytteellä päivinä 0, 7, 14, 21, 28 ja 35.

3. Tietojen analysointi

Näyte katsotaan stabiiliksi testihetkellä, kun kotiniinipitoisuuden 95 %:n luottamusväli tiettynä päivänä näytteelle on päällekkäinen päivän 0 kanssa.

F. ELISA ja laitteen vakaus

Pitkäaikainen stabiilisuustutkimus suoritetaan Calbiotech Cotinine ELISA -määrityksen ja VioOne-näytteenkeräyslaitteen stabiilisuuden ja vanhenemisen määrittämiseksi.

1. Näytekokoelma

   Jokaisena testausajankohtana otetaan näytteitä kolmelta henkilöltä. Jokainen henkilö toimittaa kolme näytettä – yhden kunkin kolmen VioOne-näytteenkeräyslaitteen erän kanssa.

   Jokaisesta VioOne-näytteenkeräyslaitteen erästä saatu näyte/puskurimatriisi yhdistetään (yhteensä 3 yksittäistä näytettä poolia kohti ja yhteensä 3 poolia).

   Tuloksena saadut poolit jaetaan sitten kahteen osaan. Yhteen alikvoottiin lisätään kotiniinia 5 ng/ml ja kotiniinia 25 ng/ml.

2. Testaus

   Jokainen piikkinäyte testataan kahdeksalla rinnakkaisnäytteellä 21 kuukauden aikana. Testauksen aikana käytetään kolmea ELISA-määrityserää.

3. Tietojen analysointi

Calbiotech Cotinine ELISA -määritystä ja VioOne-näytteenkeräyslaitetta pidetään stabiileina, kun kullakin aikapisteellä testatut näytteet tuottavat tuloksia 95 %:n luottamusvälillä kotiniinipitoisuuden ollessa päällekkäinen päivän 0 kanssa.