Evaluering av en oral væskeinnsamlingsanordning

Studien for å evaluere VioOne Oral Fluid Sample Device (her referert til som VioOne Device) vil bestå av flere delstudier som beskrevet nedenfor:

A. Utvinningsstudie

Denne studien vil bestemme den prosentvise gjenvinningen av kotinin tilsatt munnvæsken til ikke-røykere samlet med VioOne Sample Collection Device.

1. Prøvesamling

   Oral væske vil bli samlet inn i henhold til VioOne pakningsvedlegget fra fem personer som selv er rapportert å være ikke-røykere. Prøvene som samles inn vil deretter individuelt tilsettes kotinin til konsentrasjoner på 0, 5, 10, 15 eller 25 ng/ml. To sett av hver konsentrasjon vil bli tilberedt. Ett sett vil bli lagret ved 2-8 °C før testing, og ett sett vil bli sendt i henhold til rutinemessige forsendelsesbetingelser og testet ved retur.

2. Testing

   Hver prøve vil deretter bli testet i duplikat med Calbiotech Cotinine ELISA-analysen, og den prosentvise gjenvinningen vil bli beregnet for hvert nivå ved å sammenligne de påviste konsentrasjonene med de økte konsentrasjonene.

3. Dataanalyse Prosent gjenvinning vil bli beregnet for hvert nivå ved å sammenligne de oppdagede konsentrasjonene med de økte konsentrasjonene.

B. Sensitivitets-/nøyaktighetsstudie Målet med studien er å vise at Calbiotech Cotinine ELISA er i stand til å skille røykere fra ikke-røykere når orale væskeprøver samlet med VioOne Sample Collection Device brukes.

1. Prøveinnsamling Minimum to studiesteder vil delta i denne studien. Omtrent 218 personer vil bli registrert i denne studien. Minst 58 innsamlede prøver skal være fra selverklærte røykere. Muntlig væskeprøver vil bli samlet inn fra enkeltpersoner, som vil gi informert samtykke og selvrapportere på en anonym måte om personen er en røyker eller ikke og antall sigaretter røykt per dag i gjennomsnitt. To prøver vil bli samlet inn fra hver enkelt for denne studien. Én prøve vil bli samlet ved hjelp av VioOne-innsamlingsenheten, og én vil bli tatt med en kommersielt tilgjengelig spyttoppsamlingskopp.

   Det vil ikke være noen alders-, kjønns- eller rasekriterier for å registrere pasientene.

2. Testing Alle prøver samlet med VioOne Sample Collection Device vil bli testet med Calbiotech Cotinine ELISA og de pene spyttprøvene som samles inn med spyttoppsamlingskoppene vil bli testet av GC/MS, sistnevnte er gullstandardmetoden.
3. Dataanalyse GC/MS-resultatene vil bli brukt som gullstandarden for å vurdere den kliniske sensitiviteten og spesifisiteten til analysen ved å bruke orale væskeprøver samlet med VioOne oral væskeinnsamlingsenhet.

C. Analysespesifisitetsstudie Drikkevarer og husholdningsmaterialer vil bli testet for interferens i påvisningen av kotinin i oral væske.

1. Prøveinnsamling orale væskeprøver vil bli samlet inn fra individer som selv er rapportert som ikke-røykere, og den resulterende prøven/buffermatrisen vil bli samlet.

   Bassenget vil bli delt inn i 15 alikvoter og individuelt tilsatt hver av de følgende 14 forbindelsene. Én alikvot fra bassenget vil forbli uoppsatt. Hver tilsatt aliquot vil deretter deles videre i tre aliquoter. En aliquot vil forbli tilsatt kun med forbindelsen, en aliquot vil bli ytterligere tilsatt 5 ng/ml Cotinine og en aliquot vil bli tilsatt ytterligere 15ng/mL Cotinine.

2. Testing Hver prøve vil deretter bli testet i duplikat.

   Følgende forbindelser vil hver bli tilsatt en sluttkonsentrasjon på 10 % med mindre annet er angitt:

   Sukker Vann Alkohol (etanol) Tannkrem Fullblod (10mg/ml) Tranebærjuice Hydrogenperoksid Natron Natriumklorid Appelsinjuice Cola Hostesirup Antiseptisk vann Hemoglobin (10mg/ml)

3. Dataanalyseresultater vil bli sammenlignet med forventet ytelse som målt i presisjonsstudien. (presisjonsstudien krever ikke bruk av oppsamlet munnvæske)

D. Analysespesifisitetsstudie

Effekten av potensiell mat og andre forurensninger i munnhulen vil bli evaluert i en tidsbestemt studie.

1. Prøvesamling

   Ti personer som er selvrapportert å være ikke-røykere vil bli rekruttert til denne studien.

   Én prøve vil bli samlet inn ved hjelp av VioOne Sample Collection Device fra hver enkelt rett før studiestart. Hvert individ vil da få et stykke hardt godteri å konsumere. Ytterligere prøver vil bli samlet med VioOne umiddelbart etter forbruk, ti ​​minutter etter forbruk og deretter hvert trettiende minutt opptil tre timer.

   Etter at alle prøvene er samlet vil hver prøve deles inn i to alikvoter. En alikvot vil bli tilsatt 5 ng/ml kotinin og en alikvot vil bli tilsatt 15 ng/mL kotinin.

2. Testing Hver prøve/spike/tidspunkt vil bli testet i tre eksemplarer
3. Dataanalyseresultater vil bli sammenlignet med forventet ytelse som målt i presisjonsstudien. (presisjonsstudien krever ikke bruk av oppsamlet munnvæske)

E. Stabilitet av prøve i prøvesamlingsbuffer En studie vil bli utført for å fastslå stabiliteten til prøver lagret i prøvesamlingsbuffer ved ulike temperaturer over tid.

1. Prøvesamling

   Orale væskeprøver vil bli samlet inn fra individer som selv er rapportert som ikke-røykere, og den resulterende prøven/buffermatrisen vil bli samlet.

   Bassenget vil bli delt i tre alikvoter. En aliquot vil bli tilsatt 7,5 ng/ml kotinin, en alikvot vil bli tilsatt 10 ng/mL kotinin og en aliquot vil forbli uten tilsetning.

   Hver av piggene og ikke-piggene vil bli delt opp i fire rør og lagret ved -20 oC, 2-8oC, romtemperatur og 37oC.

2. Testing

   Hver prøve vil bli testet i åtte replikater på dag 0, 7, 14, 21, 28 og 35.

3. Dataanalyse

Prøven anses som stabil på testtidspunktet når 95 % konfidensintervall for kotininkonsentrasjonen på en gitt dag for prøven overlapper det på dag 0.

F. ELISA og enhetsstabilitet

En langsiktig stabilitetsstudie vil bli utført for å fastslå stabiliteten og utløpsdateringen til Calbiotech Cotinine ELISA-analysen sammen med VioOne Sample Collection Device.

1. Prøvesamling

   Ved hvert testtidspunkt vil det bli samlet inn prøver fra tre individer. Hver person vil gi tre prøver - en med hver av tre loter med VioOne Sample Collection Devices.

   Den resulterende prøve-/buffermatrisen oppnådd fra hvert parti med VioOne prøvetakingsutstyr vil bli samlet (totalt 3 individuelle prøver per basseng og totalt 3 puljer).

   De resulterende bassengene vil deretter bli delt inn i to alikvoter. En alikvot vil bli tilsatt 5ng/ml kotinin og 25ng/ml kotinin.

2. Testing

   Hver tilsatt prøve vil bli testet i åtte replikater over en periode på 21 måneder. I løpet av testen vil tre ELISA-assaylots bli brukt.

3. Dataanalyse

Calbiotech Cotinine ELISA-analysen og VioOne Sample Collection Device anses som stabile når prøvene som er testet på hvert tidspunkt gir resultater innenfor 95 % konfidensintervall for kotininkonsentrasjonen overlapper det på dag 0.