Utvärdering av en oral vätskeuppsamlingsanordning

Studien för att utvärdera VioOne Oral Fluid Sample Device (här kallad VioOne Device) kommer att bestå av flera delstudier enligt beskrivningen nedan:

A. Återhämtningsstudie

Denna studie kommer att bestämma procentandelen återvinning av kotinin som tillsatts i munvätskan hos icke-rökare som samlats in med VioOne Sample Collection Device.

1. Provsamling

   Oral vätska kommer att samlas in enligt VioOne bipacksedeln från fem personer som själv anmält sig vara icke-rökare. De insamlade proverna kommer sedan att spikas individuellt med kotinin till koncentrationer av 0, 5, 10, 15 eller 25 ng/ml. Två uppsättningar av varje koncentration kommer att beredas. Ett set kommer att förvaras vid 2-8°C före testning och ett set kommer att skickas enligt rutinmässiga leveransvillkor och testas vid retur.

2. Testning

   Varje prov kommer sedan att testas i duplikat med Calbiotech Cotinine ELISA-analysen och den procentuella återvinningen kommer att beräknas för varje nivå genom att jämföra de detekterade koncentrationerna med de ökade koncentrationerna.

3. Dataanalys Procentuell återhämtning kommer att beräknas för varje nivå genom att jämföra de detekterade koncentrationerna med de ökade koncentrationerna.

B. Känslighets-/noggrannhetsstudie Studiens mål är att visa att Calbiotech Cotinine ELISA kan särskilja rökare från icke-rökare när orala vätskeprover som samlats in med VioOne Sample Collection Device används.

1. Provtagning Minst två studieplatser kommer att delta i denna studie. Cirka 218 personer kommer att inkluderas i denna studie. Minst 58 insamlade prover ska vara från självdeklarerade rökare. Orala vätskeprover kommer att samlas in från individer, som kommer att ge det informerade samtycket och självrapportera på ett anonymt sätt om individen är rökare eller inte och antalet cigaretter som röks per dag i genomsnitt. Två prover kommer att samlas in från varje individ för denna studie. Ett prov kommer att samlas in med hjälp av VioOne Collection Device och ett kommer att samlas in med en kommersiellt tillgänglig salivuppsamlingskopp.

   Det kommer inte att finnas några kriterier för ålder, kön eller ras för att registrera patienterna.

2. Testning Alla prover som samlas in med VioOne Sample Collection Device kommer att testas med Calbiotech Cotinine ELISA och de nätta salivprover som samlas in med salivsamlingskopparna kommer att testas av GC/MS, varvid den senare är guldstandardmetoden.
3. Dataanalys GC/MS-resultaten kommer att användas som guldstandarden för att bedöma analysens kliniska känslighet och specificitet med hjälp av orala vätskeprover som samlats in med VioOne Oral Fluid Collection Device.

C. Analysspecificitetsstudie Drycker och hushållsmaterial kommer att testas för interferens vid detektion av kotinin i oral vätska.

1. Provtagning orala vätskeprover kommer att samlas in från individer som självrapporterats som icke-rökare och det resulterande provet/buffertmatrisen kommer att slås samman.

   Poolen kommer att delas upp i 15 alikvoter och spikas individuellt var och en av följande 14 föreningar. En alikvot från poolen kommer att förbli utan spets. Varje tillsatt alikvot kommer sedan att delas upp ytterligare i tre alikvoter. En alikvot kommer att förbli spetsad med endast föreningen, en alikvot kommer att spikas ytterligare med 5 ng/ml Cotinine och en alikvot kommer att spikas ytterligare med 15 ng/ml Cotinine.

2. Testning Varje prov kommer sedan att testas i duplikat.

   Följande föreningar kommer var och en att spetsas till en slutlig koncentration på 10 % om inte annat anges:

   Socker Vatten Alkohol (etanol) Tandkräm Helblod (10mg/ml) Tranbärsjuice Väteperoxid Bakpulver Natriumklorid Apelsinjuice Cola Hostsirap Antiseptisk vatten Hemoglobin (10mg/ml)

3. Dataanalysresultat kommer att jämföras med den förväntade prestandan som mäts i precisionsstudien. (precisionsstudien kräver inte användning av uppsamlad human oral vätska)

D. Analysspecificitetsstudie

Effekten av potentiell mat och andra föroreningar i munhålan kommer att utvärderas i en tidsinställd studie.

1. Provsamling

   Tio personer som själv rapporterats vara icke-rökare kommer att rekryteras till denna studie.

   Ett prov kommer att samlas in med hjälp av VioOne Sample Collection Device från varje individ omedelbart innan studiens start. Varje individ kommer sedan att få en bit hårdgodis att konsumera. Ytterligare prover kommer att samlas in med VioOne omedelbart efter konsumtion, tio minuter efter konsumtion och sedan var trettionde minut upp till tre timmar.

   Efter att alla prover har samlats in kommer varje prov att delas upp i två alikvoter. En alikvot kommer att tillsättas med 5 ng/ml kotinin och en alikvot kommer att tillsättas med 15 ng/ml kotinin.

2. Testning Varje prov/spik/tidpunkt kommer att testas i tre exemplar
3. Dataanalysresultat kommer att jämföras med den förväntade prestandan som mäts i precisionsstudien. (precisionsstudien kräver inte användning av uppsamlad human oral vätska)

E. Stabilitet av prov i provsamlingsbuffert En studie kommer att utföras för att fastställa stabiliteten hos prover som lagras i provsamlingsbuffert vid olika temperaturer över tiden.

1. Provsamling

   Orala vätskeprover kommer att samlas in från individer som självrapporterats som icke-rökare och det resulterande provet/buffertmatrisen kommer att slås samman.

   Poolen kommer att delas upp i tre alikvoter. En alikvot kommer att tillsättas med 7,5 ng/ml kotinin, en alikvot kommer att tillsättas med 10 ng/mL kotinin och en alikvot kommer att förbli utan tillsats.

   Var och en av spikarna och icke-spiken kommer att delas upp i fyra rör och förvaras vid -20 oC, 2-8oC, rumstemperatur och 37oC.

2. Testning

   Varje prov kommer att testas i åtta replikat på dag 0, 7, 14, 21, 28 och 35.

3. Dataanalys

Provet anses vara stabilt vid testtidpunkten när 95 % konfidensintervall för kotininkoncentrationen vid en given dag för provet överlappar det för dag 0.

F. ELISA och anordningsstabilitet

En långsiktig stabilitetsstudie kommer att utföras för att fastställa stabiliteten och utgångsdatumet för Calbiotech Cotinine ELISA-analysen tillsammans med VioOne Sample Collection Device.

1. Provsamling

   Vid varje tidpunkt för testning kommer prover från tre individer att samlas in. Varje individ kommer att tillhandahålla tre prover - ett med var och en av tre partier av VioOne Sample Collection Devices.

   Den resulterande prov-/buffertmatrisen som erhålls från varje parti av VioOne Sample Collection Device kommer att slås samman (totalt 3 individuella prover per pool och totalt 3 pooler).

   De resulterande poolerna kommer sedan att delas upp i två alikvoter. En alikvot kommer att spetsas med 5 ng/ml kotinin och 25 ng/ml kotinin.

2. Testning

   Varje tillsatt prov kommer att testas i åtta replikat under en period av 21 månader. Under testets gång kommer tre ELISA-analyslot att användas.

3. Dataanalys

Calbiotech Cotinine ELISA-analysen och VioOne Sample Collection Device anses vara stabila när proverna som testas vid varje tidpunkt ger resultat inom 95 % konfidensintervall för kotininkoncentrationen överlappar den för dag 0.