L-아르기닌이 아닌 L-오르니틴을 보충하면 치주염에서 CD68+ 및 CD163+ 대식세포의 밀도가 증가합니다

연구 설계 현재 작업은 원래 연구 연구였습니다. II-III 단계 및 B 등급에서 전신 치주염 진단을 받은 75명의 개인(여성 38명, 남성 37명, 각각 51% 및 49%)이 연구에 포함되었습니다. 치주염은 2017년 치주 및 임플란트 주위 질환 및 상태 분류 기준을 사용하여 진단되었습니다. 치주염 2기는 가장 많이 상실된 부위에 3~4 mm 치간 CAL, 4~5 mm PPD, 치근관 3분의 1에서 방사선학적 골소실이 있고 치주염으로 인한 치아 상실이 없는 경우로 진단하였다. III기는 ≥5 mm 치간 CAL, 치근염으로 인한 ≤4개의 치아 손실, 치근의 중간 또는 치근단 1/3까지 확장되는 방사선학적 골 손실이 있을 때 진단되었습니다. 모든 경우에 치주염은 일반화된 패턴(>30% 치아 침범)을 보였고 간접 증거(피험자의 나이로 나눈 치근 길이의 백분율로 표현된 방사선학적 골 손실은 0.25 ~ 1.0).

환자는 층화 무작위화에 의해 3개의 그룹으로 그룹화되었습니다: SRP 그룹(환자는 전체 구강 절차로 스케일링 및 루트 플래닝을 받았습니다, n=25); Arg 그룹(환자는 SRP 후 10일 동안 경구용 L-아르기닌 아스파르테이트(Yuria-Pharm, 우크라이나)를 1g t.i.d.로 투여받았음, n=25); 및 Orn 그룹(환자는 SRP 후 15일 동안 3g t.i.d.의 용량으로 경구 L-오르니틴 아스파르테이트(Farmak, 우크라이나)를 받았다, n=25). 우크라이나에서 사용할 수 있는 이러한 의약품에 대한 지침에 따라 아르기닌과 오르니틴을 사용했습니다. 연구 기간 동안 모든 환자는 식량과 연대를 변경하지 않고 안정적인 식단을 유지했습니다.

모든 참가자에 대해 성별과 연령을 기록하고 치주낭 깊이(PPD), 임상 부착 수준(CAL) 및 탐침 시 출혈(BoP) 측정과 같은 치주 매개변수를 모든 치아의 6개 치주 부위에서 채취했습니다(세 번째는 제외). 어금니) 수동 치주 탐침(0106.DT06.CP10, Den Tag, Italy)을 사용하여 보정된 단일 검사자에 의해. PPD와 CAL은 1mm 단위까지 측정되었습니다.

모든 환자는 치료 전과 1개월 ± 5일 후에 임상 검사를 받았습니다.

잇몸 조직 샘플 채취 정확한 면역조직화학적 연구를 위해, 치료 전과 치료 1개월 후 그룹당 5명의 선택된 환자에서 국소 마취하에 약 3x3mm의 치은 생검을 절제했습니다. 생검은 적합한 치과 및 치주 시술 주변에서 가장 깊은 포켓을 나타내는 단일 부위로부터 동일한 시점에서 얻어졌다. 이러한 조직 생검의 제거는 초기 치료 계획을 방해하거나 예상되는 임상 결과에 영향을 미치지 않았습니다. 수집 후, 생검을 24시간 동안 4% 포르말린 용액에 고정하고, 탈수하고, 파라핀에 포매하였다.

면역조직화학 및 항체 2-3 μm 두께의 파라핀 절편을 탈파라핀화하고 탈수시켰다. 구연산 완충액, 수소(pH) 6에서 열 유도 에피토프 검색은 전자레인지에서 슬라이드를 연속적으로 가열하여 수행한 다음 식히고 인산염 완충 식염수(PBS)로 헹구고 차단된 시약과 함께 배양하고 헹구었습니다. , 마우스 단클론 CD68 항체(1:30, 클론 PG-M1, Diagnostic BioSystems, The Hague, The Netherlands) 또는 항-CD163(1:100, 클론 10D6, Diagnostic BioSystems, The Hague, The Netherlands)과 함께 배양했습니다. 그런 다음 절편을 2단계 Mouse/Rabbit PolyVue Plus™ HRP/DAB 검출 시스템(Diagnostic BioSystems, The Hague, The Netherlands)으로 염색하고 Mayer's haemalau로 대조염색했습니다. PBS는 음성 대조군으로, 림프절 조직-양성 대조군으로 사용하였다.

면역조직화학적 염색의 평가 CD68+ 및 CD163+ 대식세포(Mφs)는 집중 침윤 부위에서 광학현미경 ×400으로 세포 수를 세어 추정하였고, 각 절편에서 5개 영역을 선택하여 통계를 위해 5개 모두를 취하였다. 염증과 직접 관련이 있기 때문에 세포 침윤 영역에서 면역 양성 Mφ를 세었습니다. 10,000 μm2당 세포 수는 면역 양성 세포 밀도로 계산되었습니다. 광학 현미경 Axio Lab.A1(Carl Zeiss, Göttingen, Germany)(×400)을 사용하여 사진을 얻었다.

통계 분석 작은 표본 크기는 높은 효과 크기, 알 수 없는 null 분포에 대한 기대로 정당화되었으며 적절한 검정력 비모수 통계로 보상되었습니다. 정확한 샘플 크기 계산이 수행되지 않았습니다.

PPD 및 CAL의 수단은 PD > 4mm(영향을 받는 부위)인 부위에 대해 계산되었습니다. 통계 분석은 GraphPad Prism 5 소프트웨어(GraphPad Software, San Diego, USA)를 사용하여 설명 통계, 카이제곱 테스트, 일원 ANOVA 및 다중 비교를 위한 비모수 ANOVA 테스트를 통해 수행되었습니다. Friedman - 종속 변수의 경우 Kruskal-Wallis 테스트 - 사후 분석과 함께 독립 변수용. 세포 수의 기술 통계를 위해 비정규 분포로 인해 백분위 수 범위도 사용되었습니다. CD68+/CD163+ 비율은 그룹 간 t-검정 비교 및 ​​Spearman 상관관계 확인으로 평가했습니다. 의 P 값