기능성 올리브 오일로 제형화된 올레아놀산의 생체이용률 (BIO-OLTRAD)

생체이용률 분석의 설계 및 구현 기능성 올리브 오일로 제형화된 경우 올레아놀산(OA)의 경구 생체이용률 및 전신 수송 메커니즘에 대한 연구는 20명의 건강한 지원자를 대상으로 한 식후 개입을 통해 접근할 것입니다.

참가자는 완전한 생화학 및 혈액학적 분석 결과 정상 범위 내에서 결과가 나온 후, 전자 의료 기록에서 소화기, 대사 또는 종양학적 장애 또는 임상 조사관의 의견에 따른 기타 병리를 앓지 않는다는 것을 확인한 후 모집됩니다. , 그들이 재판에 참여하는 것을 막을 수 있습니다. 임상시험에 포함시키기 위해서는 구두 및 문서로 편리하게 통보한 후 인간 연구 기관 위원회에서 승인한 프로토콜에 대한 서면 동의를 부여해야 합니다.

현지 조사는 세비야(스페인)의 대학 병원 'Virgen del Rocio'의 내분비학 및 영양 서비스 주간 병원에서 수행됩니다.

표본의 크기. 이 시험에서 검사할 주요 정량적 변수는 OA 혈청 농도입니다. 지금까지 발표된 일관된 기본 데이터가 없는 경우 PREDIABOLE 연구(ISRCTN03372660)의 혈청 내 OA 분석 데이터가 사용되었습니다. 상업용 올리브 오일을 소비하는 대조군에서 25명의 참가자 코호트가 선택되었고 평균 기준 농도는 155 ± 72 ng OA/mL로 결정되었습니다. 이를 고려하면 기능성 올리브 오일(등가 용량 30mg OA) 섭취의 결과로 혈장 OA 함량이 적어도 50% 증가할 것으로 추정됩니다. 이 일방적 가설 검정을 증명하기 위해서는 신뢰 수준 90%(위험 α=0.01, zα=1.645)와 검정력 95%(zβ=1.645)로 최소 17명의 지원자가 필요합니다. 15% 미만의 손실이 허용될 수 있다고 가정하면 조정된 샘플 크기는 20명의 피험자가 됩니다.

참가자의 기억 상실 및 신체 검사. 기억 상실에는 개인이 나타낼 수 있는 모든 증상, 의료 및 수술 이력, 이후의 약리학적 치료를 수집하는 중요한 데이터 및 일반 이력이 포함됩니다. 생활습관, 자신의 신체상에 대한 인식, 식이요법, 신체활동의 종류와 강도에 대한 정보도 얻게 된다. 또한 근육량, 지방층(adipose panniculus), 부종 유무 등을 검사합니다. 마찬가지로 수축기 및 이완기 혈압과 심박수가 결정됩니다.

인체 측정 연구 및 체성분. 인체 측정 연구에는 총 체중, 키, 체질량 지수(BMI), 허리 및 엉덩이 둘레 측정이 포함됩니다. 이러한 변수에 대한 연구 및 평가는 국제 동체 측정법 발전 협회(ISAK)의 지침에 따라 수행됩니다. 체성분 연구는 TANITA® 체성분 분석기 모델 BC-418MA를 사용하여 전기 생체 임피던스로 수행됩니다. 체지방량, 제지방량, 근육량, 총 수분량, 뼈량, 기초 대사 및 내장 지방은 이 기술로 정량화되며 연령과 성별에 따라 검증되고 조정된 예측 방정식을 사용합니다.

생화학 연구. 일반, 간 및 신장 생화학의 매개변수를 결정하기 위해 금식 시 혈액 샘플을 채취합니다. 또한, 습관적인 물리적, 화학적 및 현미경 측정을 포함하는 완전한 소변 분석이 수행됩니다. 이러한 결정은 세비야의 'Virgen del Rocío' 대학 병원의 분석 및 임상 생화학 실험실에서 수행됩니다.

개입 참가자는 분석 실행 전날 동안 알코올성 음료 및 담배 소비를 피하도록 권장됩니다. 시험일과 12시간의 야간 금식 후 혈액 샘플을 팔정맥에서 채취합니다. 그 후, 무작위로 선택된 10명의 개인은 커피, 탈지유 및 통곡물 토스트가 포함된 실험적인 아침 식사의 일부로 기능성 OA가 풍부한 올리브 오일(동등 용량 30mg OA) 55mL를 받게 됩니다. 다른 10명의 참가자는 실험 식사 내에서 동일한 양의 대조군 올리브 오일을 받게 됩니다. 각각의 아침 식사를 한 후 식후 7시간 동안 매시간 혈액을 채취합니다. 이 기간 동안 물 섭취는 무료로 제공됩니다.

4주간의 워시아웃 기간이 설정되고 그 후에 소비되는 올리브 오일 유형을 교차하는 새로운 일련의 테스트가 수행됩니다.

OA의 약동학적 연구 입방체 혈액의 분취량에서 원심분리에 의해 혈청을 얻고 NaN3, PMSF 및 아프로티닌을 방부제로 첨가하여 단백질 분해를 방지합니다. 혈청 샘플은 분석할 때까지 IG-CSIC의 실험실에서 -80 0C에 보관됩니다. 혈청 OA의 추출 및 분류는 액체/액체 및 고체상 추출에 의해 실현되는 반면 트리테르펜의 식별 및 정량화는 GC-FID 및 GC-MS에 의해 완료됩니다. 데이터의 약동학 분석에서 단일 구획 모델을 가정합니다. 식후 기간 동안 유리 OA의 혈청 함량 데이터로부터 다음 매개변수가 결정됩니다: 1) 달성된 최대 농도 및 시간, 흡수 상수 및 곡선 아래 면적과 같은 흡수 매개변수; 2) 분포 상수 및 부피와 같은 분포 매개변수; 3) 알부민과 관련된 OA 분획과 같은 대사 매개변수; 및 4) 제거 상수, 반감기 및 클리어런스와 같은 제거 매개변수. 계산을 위해 SigmaPLot 약동학 분석 모듈(Systat Software Inc., San Jose, CA, USA)을 사용합니다.

트리글리세라이드가 풍부한 지단백질(TRL)에서 OA의 존재에 대한 연구. 킬로미크론은 먼저 100,000 × g에서 20분 동안 원심분리하여 생리 식염수에서 혈장에서 분리됩니다. 초저밀도 지단백질(VLDL)은 이후 18시간 동안 230,000 × g에서 분리됩니다. chylomicron 및 VLDL 분획은 췌장 효소로 가수분해됩니다. 방출된 지질은 클로로포름:메탄올(2:1)로 추출되고 메탄올:클로로포름(1:1) 및 이소프로판올:아세토니트릴:물(2:1:1)로 고체/액체 추출에 의해 분별됩니다. 유리 지방산(FFA) 구성은 해당 메틸 에스테르로서 GC-FID에 의해 분석됩니다. TRL 유래 지질 중 OA의 존재 가능성은 분류 및 GC-MS 분석 후에 평가될 것이다. 킬로미크론 및 VLDL 각각의 존재의 마커로서 apo B48 및 B100의 함량은 ELISA에 의해 결정될 것이다.

다른 생화학적 파라미터 혈청 인슐린, C-펩티드 및 GLP-1은 ELISA에 의해 분석될 것이다.