Effecten van nutraceutische therapieën op de endotheelfunctie, aggregatie van bloedplaatjes en coronaire stroomreserve (NUTRENDO)

Hart- en vaatziekten (HVZ) zijn wereldwijd de belangrijkste doodsoorzaak. Primaire preventie van hart- en vaatziekten door risicopersonen te identificeren en te behandelen blijft een belangrijke prioriteit voor de volksgezondheid. Volgens richtlijnen is de belangrijkste insteek een gezonde leefstijl, ondersteund door medicamenteuze therapie. Hypercholesterolemie wordt beschouwd als een van de belangrijkste cardiovasculaire risicofactoren. Cardiovasculaire preventie omvat een klasse I-indicatie voor statines naast niet-farmacologische interventie- en preventiestrategieën bij patiënten die als 'hoog risico' worden beschouwd. In de echte wereld wordt de behandeling met statines echter vaak gestaakt vanwege bijwerkingen. Bovendien zijn statines niet geïndiceerd bij proefpersonen die als 'laag risico' worden beschouwd, bij wie momenteel alleen niet-farmacologische interventie- en preventiestrategieën worden voorgeschreven. Naast niet-farmacologische interventie- en preventiestrategieën omvatten nieuwere benaderingen om cholesterolgehalten in het bloed te verlagen momenteel nutraceuticals, dit zijn verbindingen die zijn afgeleid van voedingsmiddelen met cholesterolverlagende werking. Het blijft echter onduidelijk of nutraceuticals andere additieve positieve effecten hebben dan cholesterolverlaging. Er zijn met name aanwijzingen dat berberine cardiovasculaire beschermende effecten heeft en dat Morus Alba, moerbeivrucht, in vitro de bloedplaatjesfunctie moduleert door de activering van bloedplaatjes, de vorming van tromboxaan, de secretie van serotonine, aggregatie en trombusvorming te remmen. Bovendien oefent Morus Alba in vitro een α-glucosidase-remmende en antioxiderende werking uit, wat de postprandiale glucosepiek kan verlagen, waardoor de HbA1c-concentratie verbetert. Dienovereenkomstig hebben we een studie aangewezen om de effecten te evalueren van twee in de handel verkrijgbare nutraceutische combinatiepillen [LopiGLIK™, Akademy Pharma, 1 capsule/dag met rode gistrijst 220 mg (minstens 3,3 mg Monacolin K) + Berberine 531,25 mg + Morus Alba 200 mg (minstens 4 mg deoxynojirimycine) vs. Armolipid Plus®, Meda Pharma, 1 capsule/dag met Berberis aristata d.e. 588 mg (overeenkomend met Berberinechloride 500 mg) + Rode gistrijst 200 mg (overeenkomend met Monacolin K 3 mg) + Policosanol 10 mg + Foliumzuur 0,2 mg + Co-enzym Q10 2,0 mg + Astaxanthine 0,5 mg] op lipiden- en metabolisch profiel, bloedplaatjes aggregatie, endotheliale functie en coronaire stroomreserve (CFR). Voor dit doel zullen patiënten met hypercholesterolemie die geen statines nodig hebben of statine-intolerantie met een matig cardiovasculair risico, op dag 0 en op dag 28, na 4 weken therapie, worden onderworpen aan bloedafname om het lipiden- en metabolisch profiel te evalueren, perifere arteriële tonometrie (EndoPAT), bloedplaatjesaggregatietesten met lichttransmissie-aggregometrie (LTA), NO-afgifte, eNOS-fosforylering op bloedplaatjes. Alleen voor CFR zullen patiënten ook twee uur na toediening van de eerste dosis nutraceutische combinatiepil verder worden geëvalueerd. Patiënten worden willekeurig toegewezen aan therapie met LopiGLIK™ of met Armolipid Plus®.

STUDIE ONTWERP

Onderzoeksprocedure Voor deelname aan het onderzoek ondergaan alle proefpersonen een screening om de criteria voor opname/exclusie in het onderzoek te bepalen. In aanmerking komende patiënten ontvangen een informatieblad dat een voorproefje geeft aan de familie en aan de huisarts, en als ze akkoord gaan met deelname, moeten ze een schriftelijke geïnformeerde toestemming ondertekenen.

De informatie die voor elk onderwerp wordt verzameld met betrekking tot geschiktheid voor het onderzoek, wordt bewaard en opgeslagen door onderzoekers.

Conditie Uitkomsten Interventie

Patiënten met hypercholesterolemie en matig cardiovasculair risico volgens de huidige richtlijnen van de European Society of Cardiology (ESC) Apparaat: Perifere arteriële tonometrie (EndoPAT) Apparaat: Bloedplaatjesaggregatie met LTA Bloedplaatjesisolatie voor meting van eNOS-fosforylering Apparaat: colorDoppler-echocardiografie in rust en na koudedruktest voor CFR-evaluatie 4 weken LopiGLIK™-therapie

1 capsule/dag of 4 weken behandeling met Armolipid Plus®

1 capsule/dag

Studietype: Interventioneel

Studie plan:

• 30 patiënten zullen worden geëvalueerd op dag 0 (anamnese, cardiovasculaire risicofactoren, medicijnen, EndoPAT + CFR + bloedmonster (1 gele buis voor biochemie + 6 lichtblauwe buisjes voor bloedplaatjesfunctie)
• Patiënten worden willekeurig toegewezen aan een behandeling gedurende 4 weken met 1 capsule/dag LopiGLIK™ met rode gistrijst 220 mg + Berberine 531,25 mg + Morus Alba 200 mg of met 1 capsule/dag Armolipid Plus® met Berberis aristata d.e. 588 mg (overeenkomend met Berberinechloride 500 mg) + Rode rijstgist 200 mg (overeenkomend met Monacoline K 3 mg) + Policosanol 10 mg + Foliumzuur 0,2 mg + Co-enzym Q10 2,0 mg + Astaxanthine 0,5 mg
• Herbeoordeling op dag 28 van alle tests die op dag 0 zijn uitgevoerd

Primaire uitkomstmaten:

• Effecten op endotheliale functie zoals geëvalueerd door Reactive Hyperemia Index (RHI)

Secundaire uitkomstmaten:

• Evaluatie van de verdraagbaarheid van de behandeling (zoals geëvalueerd door een specifieke vragenlijst)
• Redenen voor stopzetting van de behandeling
• Effecten op het lipidenprofiel (totaal cholesterol, LDL-cholesterol, HDL-cholesterol, triglyceriden) en metabolische indexen (glucosespiegels, insulineplasmaspiegels, insulinegevoeligheidsindex (HOMA-index)
• Effecten op de bloedplaatjesaggregatie zoals geëvalueerd door LTA
• Effecten op coronaire stroomreserve (CFR) zoals geëvalueerd door echocardiocolorDoppler-visualisatie van coronaire stroom in de distale linker anterieure dalende arterie in rust en na koudedruktest (CPT).

STUDIE BEVOLKING

Er zullen 30 patiënten worden ingeschreven (15 in elke behandelingsgroep).

METHODEN

Endotheliale functie De endotheliale functie zal worden beoordeeld met de flow-gemedieerde dilatatietest (FMD) door digitale pulsamplitude, met behulp van een vingertop-PAT zoals eerder beschreven [Gargiulo P, et al. Int J Cardio 2013]. Het systeem (Itamar Medical Ltd., Caesarea, Israël) bestaat uit een vingersonde om digitale volumeveranderingen te beoordelen die gepaard gaan met pulsgolven. Alle proefpersonen die deelnamen aan het onderzoek bleven vanaf de avond vóór de evaluatie zonder roken, alcohol of cafeïne. Reactieve hyperemie werd gemeten als een PAT-reactieve hyperemische index (RHI), berekend als de verhouding van de gemiddelde amplitude van het PAT-signaal over een tijdsinterval van 1 minuut, beginnend 1 minuut na het leeglopen van de manchet, gedeeld door de gemiddelde amplitude van het PAT-signaal van een Tijdsperiode van 3,5 min vóór opblazen van de manchet (baseline) en genormaliseerd naar de RHI van de controle-arm. Endotheliale disfunctie werd gedefinieerd als een RHI <1,68 berekend door de gemiddelde waarde min 2 standaarddeviaties van 20 gezonde asymptomatische controle-individuen zonder voorgeschiedenis van cardiovasculaire aandoeningen en zonder belangrijke cardiovasculaire risicofactoren zoals eerder beschreven.

Bloedplaatjesfunctie Bloedplaatjesaggregatie zal worden gemeten door middel van lichttransmissie-aggregometrie (LTA) met behulp van een tweekanaals lumi-aggregometer (model 700; Chrono-Log). Bloedplaatjes worden bereid volgens een standaardprocedure. In het kort gezegd, bloedplaatjesrijk plasma (PRP) zal worden bereid uit bloed dat door middel van venapunctie is afgenomen in 3,8% trinatriumcitraat (w/v) Vacutainer-bloedafnamebuisjes. PRP wordt verkregen door centrifugeren van bloed bij 250 g bij 25°C gedurende 15 minuten. Bloedplaatjesarm plasma (PPP) wordt verkregen door de rest van het bloed gedurende 10 minuten te centrifugeren bij 1400 g bij 25°C.

De bloedplaatjesaggregatie wordt gecontroleerd bij 37 °C onder constant roeren (1200 rpm) en gemeten als de toename van de lichttransmissie gedurende 10 minuten, met toevoeging van adenosinedifosfaat (ADP) 10 μmol/L, collageen 2 μg/ml en arachidonzuur 1 0,5 millimol (mM) als voortschrijdende stimulus. Alle metingen worden binnen 2 uur na monsterverzameling verkregen en de resultaten worden gerapporteerd als percentage van de maximale aggregatie. Sommige experimenten zullen worden uitgevoerd in bloedplaatjes die voorbehandeld zijn met insuline (15 microIU/ml) gedurende 30 minuten bij 37°C. Na stimulatie wordt 3 ml bloedplaatjessuspensie gedurende 15 minuten bij 3000 gecentrifugeerd en de verkregen bloedplaatjespellet wordt gebruikt voor de meting van eNOS-fosforylering en NO-niveaus.

Coronaire stroomreserve Standaard Doppler-echocardiografie zal worden uitgevoerd met behulp van een Vivid Seven-machine (GE, Horten, Noorwegen) in de ochtend na een nacht vasten van 12-14 uur; proefpersonen zullen worden geïnstrueerd om alle koffiebevattende dranken en theofylline-bevattende medicijnen te vermijden, en zich te onthouden van roken en zware lichaamsbeweging vanaf 24 uur vóór het onderzoek. De Doppler-kleurenvisualisatie van coronaire stroming in de distale linker anterieure dalende slagader zal worden verkregen met een 5 megahertz (MHz) phased-array-transducer met ondiepe focus. Doppler-monstervolume wordt op het kleursignaal van de linker anterieure dalende slagader geplaatst en het spectraal gepulseerde Doppler-signaal wordt opgenomen om te zoeken naar het karakteristieke bifasische stroompatroon met een grotere diastolische en een kleinere systolische component, zowel in rust als na koude druk testen (CPT). Coronaire diastolische piekstroomsnelheden (cm/s) evenals hartslag en bloeddruk worden gemeten in rust en kort na CPT, overeenkomend met maximale hyperemie. CFR wordt berekend als de verhouding tussen hyperemische en diastolische pieksnelheden in rust. De CPT wordt uitgevoerd volgens een gestandaardiseerd protocol, door de hand van de proefpersoon en het distale deel van de onderarm gedurende 3 minuten in een ijswaterslurrie te plaatsen. De hoogste drie spectrale Doppler-signalen worden gemiddeld voor elke parameter. CFR zal worden geëvalueerd bij baseline, 2 uur na toediening van de eerste nutraceutische combinatiepil en na 28 dagen therapie.

Alle beelden worden opgenomen in lokale archieven en offline geanalyseerd door twee waarnemers die blind zijn voor de klinische kenmerken van de patiënten.

Berekening van de steekproefomvang Ervan uitgaande dat de standaarddeviatie van de verschillen in Endo-PAT-indices voor de 2 testdagen 0,5 zou zijn en dat we een echt verschil in gemiddelden >0,5 zouden willen detecteren met een gepaarde t-test uitgevoerd op het significantieniveau van 0,05 , hebben we vastgesteld dat een steekproef van 30 proefpersonen (15 voor elke groep) 80% power zou opleveren.

Samenstelling en levering van de nutraceutische behandelingen Capsules van LopiGLIK™ (met rode gistrijst 220 mg + Berberine 531,25 mg + Morus Alba 200 mg) en van Armolipid Plus® (met Berberis aristata d.e. 588 mg (overeenkomend met Berberinechloride 500 mg) + Rode gistrijst 200 mg (overeenkomend met Monacoline K 3 mg) + Policosanol 10 mg + Foliumzuur 0,2 mg + Co-enzym Q10 2,0 mg + Astaxanthine 0,5 mg) wordt gratis verstrekt door respectievelijk Akademy Pharma en Meda Pharma.

Behandelingsduur Alle patiënten worden behandeld gedurende een periode van 4 weken.

Gegevens De resultaten van het onderzoek zullen aan het einde van het onderzoek aan alle deelnemers worden meegedeeld.