Účinky nutraceutických terapií na endoteliální funkci, agregaci krevních destiček a rezervu koronárního průtoku (NUTRENDO)

Kardiovaskulární onemocnění (CVD) jsou hlavní příčinou úmrtí na celém světě. Primární prevence kardiovaskulárních onemocnění prostřednictvím identifikace a léčby rizikových jedinců zůstává hlavní prioritou veřejného zdraví. Podle doporučených postupů je hlavním přístupem zdravý životní styl podporovaný farmakoterapií. Hypercholesterolémie je považována za jeden z nejvýznamnějších kardiovaskulárních rizikových faktorů. Kardiovaskulární prevence zahrnuje kromě nefarmakologické intervence a preventivních strategií u pacientů považovaných za „vysokorizikové“ indikaci statinů třídy I. V reálném světě je však léčba statiny často přerušena kvůli nežádoucím účinkům. Navíc statiny nejsou indikovány u subjektů považovaných za „nízkorizikové“, u kterých jsou v současnosti předepisovány pouze nefarmakologické intervence a preventivní strategie. Spolu s nefarmakologickými intervencemi a strategiemi prevence zahrnují novější přístupy ke snížení hladiny cholesterolu v krvi v současnosti nutraceutika, což jsou sloučeniny odvozené z potravin s účinky snižujícími cholesterol. Zůstává však nejasné, zda nutraceutika přinášejí aditivní pozitivní účinky jiné než snížení cholesterolu. Zejména existují důkazy, že Berberine má kardiovaskulární ochranné účinky a že in vitro Morus Alba, plod moruše, moduluje funkci krevních destiček inhibicí aktivace krevních destiček, tvorby tromboxanu, sekrece serotoninu, agregace a tvorby trombů. Kromě toho Morus Alba vykazuje in vitro inhibiční a antioxidační aktivitu α-glukosidázy, což může snížit postprandiální vrchol glukózy, a tak zlepšit koncentraci HbA1c. V souladu s tím jsme určili studii pro hodnocení účinků dvou komerčně dostupných nutraceutických kombinovaných pilulek [LopiGLIK™, Akademie Pharma, 1 kapsle/den obsahující červenou kvasnicovou rýži 220 mg (alespoň 3,3 mg Monacolin K) + Berberine 531,25 mg + Morus Alba 200 mg (alespoň 4 mg Deoxynojirimycinu) vs. Armolipid Plus®, Meda Pharma, 1 kapsle/den obsahující Berberis aristata d.e. 588 mg (ekvivalent Berberin chloridu 500 mg) + Červená kvasnicová rýže 200 mg (ekvivalent Monacolinu K 3 mg) + Policosanol 10 mg + Kyselina listová 0,2 mg + Koenzym Q10 2,0 mg + Astaxanthin 0,5 mg] na lipidový a metabolický profil, krevní destičky agregace, endoteliální funkce a koronární průtoková rezerva (CFR). Za tímto účelem budou pacienti s hypercholesterolémií nevyžadující statiny nebo statinovou intolerancí se středním kardiovaskulárním rizikem podrobeni v den 0 a v den 28, po 4 týdnech léčby, odběru krve ke zhodnocení lipidového a metabolického profilu, periferní arteriální tonometrii (EndoPAT), testy agregace krevních destiček s agregometrií přenosu světla (LTA), uvolňování NO, fosforylace eNOS na krevních destičkách. Pouze u CFR budou pacienti dále hodnoceni i po dvou hodinách od podání první dávky nutraceutické kombinované pilulky. Pacienti budou náhodně přiřazeni k léčbě LopiGLIK™ nebo Armolipid Plus®.

STUDOVAT DESIGN

Postup studie Pro zápis do studie budou všichni jedinci podrobeni screeningu za účelem stanovení kritérií pro zařazení/vyloučení do studie. Způsobilí pacienti obdrží informační list, který poskytne náhled rodině a praktickému lékaři, a pokud souhlasí s účastí, musí podepsat písemný informovaný souhlas.

Informace shromážděné pro každý subjekt, týkající se vhodnosti pro studii, budou uchovávány a uchovávány zkoušejícími.

Podmínka Výsledky Intervence

Pacienti s hypercholesterolemií a středním kardiovaskulárním rizikem podle aktuálních směrnic Evropské kardiologické společnosti (ESC) Zařízení: Periferní arteriální tonometrie (EndoPAT) Zařízení: Agregace krevních destiček s LTA Izolace krevních destiček pro měření fosforylace eNOS Zařízení: barevná Dopplerova echokardiografie v klidu a po chladovém tlakovém testu pro hodnocení CFR 4 týdny terapie LopiGLIK™

1 kapsle/den nebo 4 týdny terapie Armolipid Plus®

1 kapsle/den

Typ studie: Intervenční

Studijní plán:

• 30 pacientů bude hodnoceno v den 0 (anamnéza, kardiovaskulární rizikové faktory, léky, EndoPAT + CFR + vzorek krve (1 žlutá zkumavka pro biochemii + 6 světle modrých zkumavek pro funkci krevních destiček)
• Pacienti budou náhodně přiřazeni k léčbě po dobu 4 týdnů 1 kapslí/den LopiGLIK™ obsahující červenou kvasnicovou rýži 220 mg + Berberine 531,25 mg + Morus Alba 200 mg nebo 1 kapsli/den Armolipid Plus® obsahující Berberis aristata d.e. 588 mg (ekvivalent Berberin chloridu 500 mg) + Červená kvasnicová rýže 200 mg (ekvivalent Monacolinu K 3 mg) + Policosanol 10 mg + Kyselina listová 0,2 mg + Koenzym Q10 2,0 mg + Astaxanthin 0,5 mg
• Přehodnocení v den 28 všech testů provedených v den 0

Primární výstupní opatření:

• Účinky na endoteliální funkci hodnocené pomocí indexu reaktivní hyperémie (RHI)

Sekundární výstupní opatření:

• Hodnocení snášenlivosti léčby (vyhodnoceno specifickým dotazníkem)
• Důvody pro přerušení léčby
• Účinky na lipidový profil (celkový cholesterol, LDL cholesterol, HDL cholesterol, triglyceridy) a metabolické indexy (hladiny glukózy, plazmatické hladiny inzulinu, index citlivosti na inzulin (index HOMA)
• Účinky na agregaci krevních destiček hodnocené pomocí LTA
• Účinky na rezervu koronárního průtoku (CFR) hodnocené pomocí echocardiocolor Dopplerovy vizualizace koronárního průtoku v distální levé přední sestupné tepně v klidu a po studeném tlakovém testu (CPT).

STUDIJNÍ POPULACE

Bude zařazeno 30 pacientů (15 v každé léčebné skupině).

METODY

Endoteliální funkce Endoteliální funkce bude hodnocena průtokem zprostředkovaným dilatačním testem (FMD) pomocí digitální pulzní amplitudy, za použití PAT z konečku prstu, jak bylo popsáno dříve [Gargiulo P, et al. Int J Cardiol 2013]. Systém (Itamar Medical Ltd., Caesarea, Izrael) sestává z prstové sondy pro hodnocení digitálních změn objemu doprovázejících pulzní vlny. Všechny subjekty zahrnuté do studie byly udržovány bez kouření, alkoholu nebo kofeinu od noci před hodnocením. Reaktivní hyperémie byla měřena jako PAT reaktivní hyperemický index (RHI) vypočítaný jako poměr průměrné amplitudy signálu PAT během 1minutového časového intervalu začínajícího 1 minutu po vyfouknutí manžety dělený průměrnou amplitudou signálu PAT 3,5-minutové časové období před nafouknutím manžety (základní hodnota) a normalizované na RHI kontrolní paže. Endoteliální dysfunkce byla definována jako RHI <1,68 vypočtená jako průměrná hodnota mínus 2 standardní odchylky 20 zdravých asymptomatických kontrolních jedinců bez anamnézy kardiovaskulárního onemocnění a bez hlavních kardiovaskulárních rizikových faktorů, jak bylo popsáno dříve.

Funkce krevních destiček Agregace krevních destiček bude měřena agregometrií prostupu světla (LTA) za použití dvoukanálového lumi-agregometru (model 700; Chrono-Log). Krevní destičky budou připraveny standardním postupem. Stručně řečeno, plazma bohatá na krevní destičky (PRP) bude připravena z krve, která byla odebrána venepunkcí do zkumavek Vacutainer pro odběr krve s 3,8% citrátem sodným (w/v). PRP se získá centrifugací krve při 250 g při 25 °C po dobu 15 minut. Plazma chudá na destičky (PPP) bude získána odstředěním zbytku krve při 1400 g při 25 °C po dobu 10 minut.

Agregace krevních destiček bude monitorována při 37 °C za stálého míchání (1200 ot./min.) a měřena jako zvýšení propustnosti světla po dobu 10 minut s přídavkem adenosindifosfátu (ADP) 10 μmol/l, kolagenu 2 μg/ml a kyseliny arachidonové 1 0,5 milimolu (mM) jako proagregační stimul. Všechna měření budou získána do 2 hodin od odběru vzorku a výsledky budou hlášeny jako procento maximální agregace. Některé experimenty budou provedeny na destičkách předem ošetřených inzulínem (15 mikroIU/ml) po dobu 30 minut při 37 °C. Po stimulaci se 3 ml suspenze destiček odstřeďují 15 minut při 3000 °C a získaná destičková peleta se použije pro měření fosforylace eNOS a hladin NO.

Rezerva koronárního průtoku Standardní dopplerovská echokardiografie bude provedena pomocí přístroje Vivid Seven (GE, Horten, Norsko) ráno po 12-14 hodinovém lačnění přes noc; subjekty budou instruovány, aby se vyhýbaly všem nápojům obsahujícím kávu a lékům obsahujícím theofylin a aby se zdržely kouření a těžkého cvičení 24 hodin před studií. Barevná dopplerovská vizualizace koronárního průtoku v distální levé přední sestupné tepně bude získána pomocí 5 megahertzového (MHz) převodníku s fázovým polem s mělkým ohniskem. Dopplerovský objem vzorku bude umístěn na barevný signál levé přední sestupné tepny a spektrální pulzní Dopplerův signál bude zaznamenán, aby se hledal charakteristický bifázický vzor průtoku s větší diastolickou a menší systolickou složkou jak v klidu, tak po studeném tlaku test (CPT). Koronární diastolické maximální rychlosti průtoku (cm/s), stejně jako srdeční frekvence a TK budou měřeny v klidu a krátce po CPT, což odpovídá maximální hyperémii. CFR bude vypočítána jako poměr hyperemických a klidových diastolických maximálních rychlostí. CPT bude prováděno podle standardizovaného protokolu umístěním ruky a distální části předloktí do ledové vody na 3 minuty. Pro každý parametr budou zprůměrovány tři nejvyšší spektrální Dopplerovy signály. CFR bude hodnocena na začátku, 2 hodiny po podání první nutraceutické kombinované pilulky a po 28 dnech terapie.

Všechny snímky budou zaznamenány do místních archivů a analyzovány off-line dvěma pozorovateli, kteří budou zaslepeni vůči klinickým charakteristikám pacientů.

Výpočet velikosti vzorku Za předpokladu, že standardní odchylka rozdílů v indexech Endo-PAT pro 2 testovací dny by byla 0,5 a že bychom chtěli detekovat skutečný rozdíl v průměrech > 0,5 pomocí párového t testu provedeného na hladině významnosti 0,05 jsme zjistili, že vzorek 30 subjektů (15 pro každou skupinu) poskytne 80% výkon.

Složení a dodávka nutraceutických ošetření Kapsle LopiGLIK™ (obsahující červenou kvasnicovou rýži 220 mg + Berberine 531,25 mg + Morus Alba 200 mg) a Armolipid Plus® (obsahující Berberis aristata d.e. 588 mg (ekvivalent Berberin chloridu 500 mg) + Červená kvasnicová rýže 200 mg (ekvivalent Monacolinu K 3 mg) + Policosanol 10 mg + Kyselina listová 0,2 mg + Koenzym Q10 2,0 mg + Astaxanthin 0,5 mg) poskytne zdarma Akademie Pharma a Meda Pharma.

Délka léčby Všichni pacienti budou léčeni po dobu 4 týdnů.

Data Výsledky studie budou sděleny všem účastníkům na konci studie.