Efeitos de terapias nutracêuticas na função endotelial, agregação plaquetária e reserva de fluxo coronário (NUTRENDO)

As doenças cardiovasculares (DCV) são a principal causa de morte no mundo. A prevenção primária de doenças cardiovasculares, identificando e tratando indivíduos em risco, continua sendo uma importante prioridade de saúde pública. De acordo com as diretrizes, a abordagem principal é um estilo de vida saudável, auxiliado pela farmacoterapia. A hipercolesterolemia é considerada um dos mais importantes fatores de risco cardiovascular. A prevenção cardiovascular inclui uma indicação de classe I para estatinas, além de intervenção não farmacológica e estratégias de prevenção em pacientes considerados de 'alto risco'. No mundo real, no entanto, o tratamento com estatina é frequentemente interrompido devido a efeitos colaterais. Além disso, as estatinas não são indicadas naqueles indivíduos considerados de 'baixo risco', nos quais atualmente apenas intervenções não farmacológicas e estratégias de prevenção são prescritas. Juntamente com a intervenção não farmacológica e as estratégias de prevenção, as abordagens mais recentes para reduzir os níveis de colesterol no sangue incluem atualmente os nutracêuticos, que são compostos derivados de alimentos com ações de redução do colesterol. No entanto, ainda não está claro se os nutracêuticos produzem efeitos positivos aditivos além da redução do colesterol. Em particular, há evidências de que a berberina tem efeitos protetores cardiovasculares e que, in vitro, Morus Alba, amora, modula a função plaquetária inibindo a ativação plaquetária, a formação de tromboxanos, a secreção de serotonina, a agregação e a formação de trombos. Além disso, Morus Alba exerce uma atividade inibitória e antioxidante da α-glucosidase in vitro, o que pode reduzir o pico de glicose pós-prandial, melhorando assim a concentração de HbA1c. Assim, designamos um estudo para avaliar os efeitos de duas pílulas nutracêuticas combinadas comercialmente disponíveis [LopiGLIK™, Akademy Pharma, 1 cápsula/dia contendo fermento de arroz vermelho 220 mg (pelo menos 3,3 mg de Monacolina K) + Berberina 531,25 mg + Morus Alba 200 mg (pelo menos 4 mg de Deoxynojirimycin) vs. Armolipid Plus®, Meda Pharma, 1 cápsula/dia contendo Berberis aristata d.e. 588 mg (equivalente a Cloreto de berberina 500 mg) + Arroz fermentado vermelho 200 mg (equivalente a Monacolin K 3 mg) + Policosanol 10 mg + Ácido fólico 0,2 mg + Coenzima Q10 2,0 mg + Astaxantina 0,5 mg] no perfil lipídico e metabólico, plaquetas agregação, função endotelial e reserva de fluxo coronário (CFR). Para tanto, pacientes com hipercolesterolemia sem necessidade de estatinas ou intolerantes a estatinas com risco cardiovascular moderado serão submetidos no dia 0 e no dia 28, após 4 semanas de terapia, a coleta de sangue para avaliação do perfil lipídico e metabólico, tonometria arterial periférica (EndoPAT), testes de agregação plaquetária com agregometria por transmissão de luz (LTA), liberação de NO, fosforilação de eNOS em plaquetas. Somente para CFR, os pacientes serão avaliados também após duas horas da administração da primeira dose do comprimido nutracêutico combinado. Os pacientes serão designados aleatoriamente para receber terapia com LopiGLIK™ ou Armolipid Plus®.

DESIGN DE ESTUDO

Procedimento do estudo Para inscrição no estudo, todos os indivíduos passarão por uma triagem para determinar os critérios de inclusão/exclusão no estudo. Os pacientes elegíveis receberão uma folha de informações que dará uma prévia à família e ao clínico geral e, se aceitarem participar, deverão assinar um consentimento informado por escrito.

As informações coletadas para cada sujeito, quanto à adequação ao estudo, serão retidas e armazenadas pelos Investigadores.

Intervenção de resultados de condição

Pacientes com hipercolesterolemia e risco cardiovascular moderado de acordo com as diretrizes atuais da European Society of Cardiology (ESC) Dispositivo: Tonometria arterial periférica (EndoPAT) Dispositivo: Agregação de plaquetas com LTA Isolamento de plaquetas para medição da fosforilação da eNOS Dispositivo: ecocardiografia colorDoppler em repouso e após teste de pressão fria para avaliação CFR 4 semanas de terapia LopiGLIK™

1 cápsula/dia ou 4 semanas de terapia Armolipid Plus®

1 cápsula/dia

Tipo de estudo: intervencional

Plano de estudo:

• 30 pacientes serão avaliados no dia 0 (anamnese, fatores de risco cardiovascular, medicamentos, EndoPAT + CFR + amostra de sangue (1 tubo amarelo para bioquímica + 6 tubos azul claro para função plaquetária)
• Os pacientes serão aleatoriamente designados para tratamento por 4 semanas com 1 cápsula/dia de LopiGLIK™ contendo arroz vermelho fermentado 220 mg + Berberina 531,25 mg + Morus Alba 200 mg ou com 1 cápsula/dia de Armolipid Plus® contendo Berberis aristata d.e. 588 mg (equivalente a Cloreto de berberina 500 mg) + Arroz fermentado vermelho 200 mg (equivalente a Monacolina K 3 mg) + Policosanol 10 mg + Ácido fólico 0,2 mg + Coenzima Q10 2,0 mg + Astaxantina 0,5 mg
• Reavaliação no dia 28 de todos os testes realizados no dia 0

Medidas de resultados primários:

• Efeitos na função endotelial avaliados pelo Índice de Hiperemia Reativa (RHI)

Medidas de resultados secundários:

• Avaliação da tolerabilidade do tratamento (conforme avaliado por um questionário específico)
• Razões para descontinuação do tratamento
• Efeitos no perfil lipídico (colesterol total, colesterol LDL, colesterol HDL, triglicerídeos) e índices metabólicos (níveis de glicose, níveis plasmáticos de insulina, índice de sensibilidade à insulina (índice HOMA)
• Efeitos na agregação plaquetária avaliados por LTA
• Efeitos na reserva de fluxo coronariano (CFR) avaliados pela visualização ecocardiocolorDoppler do fluxo coronário na artéria descendente anterior esquerda distal em repouso e após teste de pressão fria (CPT).

POPULAÇÃO DE ESTUDO

30 pacientes serão inscritos (15 em cada grupo de tratamento).

MÉTODOS

Função endotelial A função endotelial será avaliada com o teste de dilatação mediada por fluxo (FMD) por amplitude de pulso digital, usando um PAT da ponta do dedo conforme descrito anteriormente [Gargiulo P, et al. Int J Cardiol 2013]. O sistema (Itamar Medical Ltd., Caesarea, Israel) consiste em uma sonda de dedo para avaliar as mudanças de volume digital que acompanham as ondas de pulso. Todos os sujeitos incluídos no estudo foram mantidos sem fumo, álcool ou cafeína desde a noite anterior à avaliação. A hiperemia reativa foi medida como um índice de hiperemia reativa PAT (RHI) calculado como a razão da amplitude média do sinal PAT ao longo de um intervalo de tempo de 1 minuto começando 1 minuto após a deflação do manguito dividido pela amplitude média do sinal PAT de um Período de tempo de 3,5 minutos antes da inflação do manguito (linha de base) e normalizado para o RHI do braço de controle. A disfunção endotelial foi definida como um RHI <1,68 calculado pelo valor médio menos 2 desvios padrão de 20 indivíduos saudáveis ​​assintomáticos, sem histórico de doença cardiovascular e sem os principais fatores de risco cardiovascular, conforme descrito anteriormente.

Função plaquetária A agregação plaquetária será medida por agregometria por transmissão de luz (LTA) usando um lumi-agregômetro de canal duplo (modelo 700; Chrono-Log). As plaquetas serão preparadas de acordo com um procedimento padrão. Resumidamente, o plasma rico em plaquetas (PRP) será preparado a partir do sangue que foi coletado por punção venosa em tubos de coleta de sangue Vacutainer a 3,8% citrato trissódico (p/v). O PRP será obtido por centrifugação do sangue a 250 g a 25°C por 15 minutos. O plasma pobre em plaquetas (PPP) será obtido por centrifugação do restante do sangue a 1400 g a 25°C por 10 minutos.

A agregação plaquetária será monitorada a 37°C com agitação constante (1200 rpm) e medida como o aumento da transmissão de luz por 10 minutos, com a adição de difosfato de adenosina (ADP) 10 μmol/L, colágeno 2 μg/ml e ácido araquidônico 1 0,5 milimole (mM) como estímulo pró-agregador. Todas as medições serão obtidas dentro de 2 horas após a coleta da amostra e os resultados serão relatados como porcentagem máxima de agregação. Alguns experimentos serão realizados em plaquetas pré-tratadas com insulina (15 microUI/mL) por 30 minutos a 37°C. Após a estimulação, 3 ml da suspensão de plaquetas serão centrifugados por 15 minutos a 3000 e o pellet de plaquetas obtido será utilizado para a medição da fosforilação da eNOS e dos níveis de NO.

A ecocardiografia Doppler padrão de reserva de fluxo coronário será realizada usando uma máquina Vivid Seven (GE, Horten, Noruega) pela manhã após um jejum noturno de 12-14 h; os indivíduos serão instruídos a evitar todas as bebidas que contenham café e medicamentos que contenham teofilina, e a abster-se de fumar e de exercícios pesados ​​24 horas antes do estudo. A visualização com Doppler colorido do fluxo coronariano na artéria descendente anterior distal será obtida com um transdutor phased array de 5 megahertz (MHz) de foco raso. O volume da amostra Doppler será colocado no sinal colorido da artéria descendente anterior esquerda, e o sinal Doppler pulsado espectral será registrado para procurar o padrão de fluxo bifásico característico com um componente diastólico maior e um sistólico menor tanto em repouso quanto após pressão fria teste (CPT). As velocidades de pico de fluxo diastólico coronariano (cm/s), bem como a frequência cardíaca e a PA serão medidas em repouso e logo após o CPT, correspondendo à hiperemia máxima. A CFR será calculada como a razão entre as velocidades diastólicas de pico hiperêmicas e em repouso. O CPT será realizado de acordo com um protocolo padronizado, colocando a mão do sujeito e a parte distal do antebraço em uma pasta de água gelada por 3 min. Será calculada a média dos três sinais Doppler espectrais mais altos para cada parâmetro. A CFR será avaliada no início do estudo, 2 horas após a administração da primeira pílula combinada de nutracêuticos e após 28 dias de terapia.

Todas as imagens serão registradas em arquivos locais e analisadas off-line por dois observadores cegos para as características clínicas dos pacientes.

Cálculo do tamanho da amostra Assumindo que o desvio padrão das diferenças nos índices Endo-PAT para os 2 dias de teste seria 0,5 e que gostaríamos de detectar uma diferença real nas médias > 0,5 com um teste t pareado conduzido no nível de significância de 0,05 , determinamos que uma amostra de 30 indivíduos (15 para cada grupo) forneceria 80% de poder.

Composição e fornecimento dos tratamentos nutracêuticos Cápsulas de LopiGLIK™ (contendo levedura de arroz vermelho 220 mg + Berberine 531,25 mg + Morus Alba 200 mg) e de Armolipid Plus® (contendo Berberis aristata d.e. 588 mg (equivalente a cloreto de berberina 500 mg) + arroz vermelho fermentado 200 mg (equivalente a Monacolin K 3 mg) + policosanol 10 mg + ácido fólico 0,2 mg + coenzima Q10 2,0 mg + astaxantina 0,5 mg) serão fornecidos gratuitamente por Akademy Pharma e Meda Pharma, respectivamente.

Duração do tratamento Todos os pacientes serão tratados por um período de 4 semanas.

Dados Os resultados do estudo serão comunicados a todos os participantes no final do estudo.