Effetti delle terapie nutraceutiche sulla funzione endoteliale, sull'aggregazione piastrinica e sulla riserva di flusso coronarico (NUTRENDO)

Le malattie cardiovascolari (CVD) sono la principale causa di morte in tutto il mondo. La prevenzione primaria delle malattie cardiovascolari identificando e trattando le persone a rischio rimane una delle principali priorità della salute pubblica. Secondo le linee guida, l'approccio principale è uno stile di vita sano, coadiuvato dalla farmacoterapia. L'ipercolesterolemia è considerata uno dei più importanti fattori di rischio cardiovascolare. La prevenzione cardiovascolare include un'indicazione di classe I alle statine in aggiunta all'intervento non farmacologico e alle strategie di prevenzione nei pazienti ritenuti "ad alto rischio". Nel mondo reale, tuttavia, il trattamento con statine viene spesso interrotto a causa degli effetti collaterali. Inoltre, le statine non sono indicate in quei soggetti ritenuti 'a basso rischio', per i quali attualmente sono prescritte solo strategie di intervento e prevenzione non farmacologiche. Insieme all'intervento non farmacologico e alle strategie di prevenzione, i nuovi approcci per ridurre i livelli di colesterolo nel sangue includono attualmente i nutraceutici, che sono composti derivati ​​da alimenti con azioni di abbassamento del colesterolo. Tuttavia, non è chiaro se i nutraceutici producano effetti positivi additivi diversi dall'abbassamento del colesterolo. In particolare, è stato dimostrato che la Berberina ha effetti protettivi cardiovascolari e che, in vitro, il Morus Alba, frutto del gelso, modula la funzione piastrinica inibendo l'attivazione piastrinica, la formazione di trombossano, la secrezione di serotonina, l'aggregazione e la formazione di trombi. Inoltre, Morus Alba esercita un'attività inibitoria e antiossidante dell'α-glucosidasi in vitro, che può ridurre il picco di glucosio postprandiale, migliorando così la concentrazione di HbA1c. Di conseguenza, abbiamo designato uno studio per valutare gli effetti di due pillole combinate nutraceutiche disponibili in commercio [LopiGLIK™, Akademy Pharma, 1 capsula/giorno contenente riso rosso fermentato 220 mg (almeno 3,3 mg di Monacolina K) + Berberina 531,25 mg + Morus Alba 200 mg (almeno 4 mg di Deossinojirimicina) vs. Armolipid Plus®, Meda Pharma, 1 capsula/die contenente Berberis aristata e.s. 588 mg (equivalente a Berberina cloruro 500 mg) + Riso rosso fermentato 200 mg (equivalente a Monacolina K 3 mg) + Policosanolo 10 mg + Acido folico 0,2 mg + Coenzima Q10 2,0 mg + Astaxantina 0,5 mg] sul profilo lipidico e metabolico, piastrinico aggregazione, funzione endoteliale e riserva di flusso coronarico (CFR). A tale scopo i pazienti con ipercolesterolemia non richiedenti statine o intolleranti alle statine a rischio cardiovascolare moderato saranno sottoposti al giorno 0 e al giorno 28, dopo 4 settimane di terapia, a prelievo di sangue per valutare il profilo lipidico e metabolico, tonometria arteriosa periferica (EndoPAT), test di aggregazione piastrinica con aggregometria a trasmissione di luce (LTA), rilascio di NO, fosforilazione di eNOS su piastrine. Solo per CFR, i pazienti saranno ulteriormente valutati anche dopo due ore dalla somministrazione della prima dose di pillola combinata nutraceutica. I pazienti saranno assegnati in modo casuale a ricevere la terapia con LopiGLIK™ o con Armolipid Plus®.

PROGETTAZIONE DI STUDIO

Procedura dello studio Per l'iscrizione allo studio, tutti i soggetti saranno sottoposti a uno screening per determinare i criteri di inclusione / esclusione dallo studio. I pazienti idonei riceveranno un foglio informativo che darà un'anteprima ai familiari e al Medico di Medicina Generale e, se accettano di partecipare, dovranno firmare un consenso informato scritto.

Le informazioni raccolte per ciascun soggetto, relative all'idoneità allo studio, saranno conservate e conservate dagli Investigatori.

Condizione Risultati Intervento

Pazienti con ipercolesterolemia e rischio cardiovascolare moderato secondo le attuali linee guida della Società Europea di Cardiologia (ESC) Dispositivo: tonometria arteriosa periferica (EndoPAT) Dispositivo: aggregazione piastrinica con LTA Isolamento piastrinico per la misurazione della fosforilazione di eNOS Dispositivo: ecocardiografia colorDoppler a riposo e dopo il test della pressione a freddo per la valutazione CFR 4 settimane di terapia LopiGLIK™

1 capsula/die o 4 settimane di terapia Armolipid Plus®

1 capsula/giorno

Tipo di studio: interventistico

Piano di studio:

• 30 pazienti saranno valutati al giorno 0 (anamnesi, fattori di rischio cardiovascolare, farmaci, EndoPAT + CFR + campione di sangue (1 provetta gialla per biochimica + 6 provette azzurre per funzione piastrinica)
• I pazienti verranno randomizzati al trattamento per 4 settimane con 1 capsula/die di LopiGLIK™ contenente riso rosso fermentato 220 mg + Berberina 531,25 mg + Morus Alba 200 mg o con 1 capsula/die di Armolipid Plus® contenente Berberis aristata e.s. 588 mg (equivalente a Berberina cloruro 500 mg) + Riso rosso fermentato 200 mg (equivalente a Monacolina K 3 mg) + Policosanolo 10 mg + Acido folico 0,2 mg + Coenzima Q10 2,0 mg + Astaxantina 0,5 mg
• Rivalutazione al giorno 28 di tutti i test eseguiti al giorno 0

Misure di risultato primarie:

• Effetti sulla funzione endoteliale valutati dall'indice di iperemia reattiva (RHI)

Misure di risultato secondarie:

• Valutazione della tollerabilità del trattamento (valutata da un questionario specifico)
• Ragioni per l'interruzione del trattamento
• Effetti sul profilo lipidico (colesterolo totale, colesterolo LDL, colesterolo HDL, trigliceridi) e sugli indici metabolici (livelli di glucosio, livelli plasmatici di insulina, indice di sensibilità all'insulina (indice HOMA)
• Effetti sull'aggregazione piastrinica valutati mediante LTA
• Effetti sulla riserva di flusso coronarico (CFR) valutati mediante visualizzazione ecocardiocolorDoppler del flusso coronarico nell'arteria discendente anteriore distale sinistra a riposo e dopo test di pressione a freddo (CPT).

POPOLAZIONE IN STUDIO

Saranno arruolati 30 pazienti (15 in ciascun gruppo di trattamento).

METODI

Funzione endoteliale La funzione endoteliale sarà valutata con il test di dilatazione flusso-mediata (FMD) mediante l'ampiezza digitale dell'impulso, utilizzando un PAT polpastrello come descritto in precedenza [Gargiulo P, et al. Int J Cardiol 2013]. Il sistema (Itamar Medical Ltd., Caesarea, Israele) consiste in una sonda da dito per valutare le variazioni di volume digitali che accompagnano le onde del polso. Tutti i soggetti inclusi nello studio sono stati mantenuti senza fumo, alcol o caffeina dalla notte prima della valutazione. L'iperemia reattiva è stata misurata come indice iperemico reattivo (RHI) PAT calcolato come rapporto tra l'ampiezza media del segnale PAT su un intervallo di tempo di 1 minuto a partire da 1 minuto dopo lo sgonfiaggio della cuffia diviso per l'ampiezza media del segnale PAT di un Periodo di tempo di 3,5 minuti prima del gonfiaggio del bracciale (linea di base) e normalizzato al RHI del braccio di controllo. La disfunzione endoteliale è stata definita come un RHI <1,68 calcolato dal valore medio meno 2 deviazioni standard di 20 individui di controllo asintomatici sani senza storia di malattie cardiovascolari e senza fattori di rischio cardiovascolare maggiori come descritto in precedenza.

Funzione piastrinica L'aggregazione piastrinica sarà misurata mediante aggregometria a trasmissione di luce (LTA) utilizzando un lumi-aggregometro a doppio canale (modello 700; Chrono-Log). Le piastrine saranno preparate secondo una procedura standard. In breve, il plasma ricco di piastrine (PRP) sarà preparato dal sangue prelevato mediante venopuntura in provette Vacutainer per il prelievo di sangue di citrato trisodico al 3,8% (p/v). Il PRP sarà ottenuto per centrifugazione del sangue a 250 g a 25°C per 15 minuti. Il plasma povero di piastrine (PPP) sarà ottenuto mediante centrifugazione del resto del sangue a 1400 g a 25°C per 10 minuti.

L'aggregazione piastrinica sarà monitorata a 37°C con agitazione costante (1200 rpm) e misurata come aumento della trasmissione della luce per 10 minuti, con l'aggiunta di adenosina difosfato (ADP) 10 μmol/L, collagene 2 μg/ml e acido arachidonico 1 0,5 millimoli (mM) come stimolo proaggregatorio. Tutte le misurazioni saranno ottenute entro 2 ore dalla raccolta del campione e i risultati saranno riportati come percentuale massima di aggregazione. Alcuni esperimenti verranno eseguiti in piastrine pretrattate con insulina (15 microIU/mL) per 30 minuti a 37°C. Dopo la stimolazione, 3 ml di sospensione piastrinica saranno centrifugati per 15 minuti a 3000 e il pellet piastrinico ottenuto sarà utilizzato per la misurazione della fosforilazione di eNOS e dei livelli di NO.

Riserva di flusso coronarico L'ecocardiografia Doppler standard verrà eseguita utilizzando una macchina Vivid Seven (GE, Horten, Norvegia) al mattino dopo un digiuno notturno di 12-14 ore; i soggetti saranno istruiti a evitare tutte le bevande contenenti caffè e i farmaci contenenti teofillina e ad astenersi dal fumo e dall'esercizio fisico intenso da 24 ore prima dello studio. La visualizzazione color Doppler del flusso coronarico nell'arteria discendente distale anteriore sinistra sarà ottenuta con un trasduttore phased-array a fuoco basso da 5 megahertz (MHz). Il volume del campione Doppler sarà posizionato sul segnale cromatico dell'arteria discendente anteriore sinistra e il segnale Doppler pulsato spettrale sarà registrato per cercare il caratteristico pattern di flusso bifasico con una componente diastolica maggiore e una sistolica minore sia a riposo che dopo pressione fredda prova (CPT). Verranno misurate le velocità di picco di flusso diastolico coronarico (cm/s) così come la frequenza cardiaca e la pressione arteriosa a riposo e subito dopo CPT, corrispondenti all'iperemia massimale. Il CFR sarà calcolato come rapporto tra velocità di picco diastolico iperemico e a riposo. La CPT verrà eseguita secondo un protocollo standardizzato, ponendo la mano del soggetto e la parte distale dell'avambraccio in una sospensione di acqua ghiacciata per 3 min. Per ogni parametro verrà calcolata la media dei tre segnali Doppler spettrali più alti. Il CFR sarà valutato al basale, 2 ore dopo la somministrazione della prima pillola combinata nutraceutica e dopo 28 giorni di terapia.

Tutte le immagini saranno registrate su archivi locali e analizzate off-line da due osservatori che saranno all'oscuro delle caratteristiche cliniche dei pazienti.

Calcolo della dimensione del campione Supponendo che la deviazione standard delle differenze negli indici Endo-PAT per i 2 giorni di test sia 0,5 e che vorremmo rilevare una vera differenza nelle medie >0,5 con un test t appaiato condotto al livello di significatività 0,05 , abbiamo stabilito che un campione di 30 soggetti (15 per ciascun gruppo) avrebbe fornito l'80% di potenza.

Composizione e fornitura dei trattamenti nutraceutici Capsule di LopiGLIK™ (contenente riso rosso fermentato 220 mg + Berberina 531,25 mg + Morus Alba 200 mg) e di Armolipid Plus® (contenente Berberis aristata e.s. 588 mg (equivalente a Berberina cloruro 500 mg) + Riso rosso fermentato 200 mg (equivalente a Monacolina K 3 mg) + Policosanolo 10 mg + Acido folico 0,2 mg + Coenzima Q10 2,0 mg + Astaxantina 0,5 mg) saranno forniti gratuitamente da Akademy Pharma e Meda Pharma, rispettivamente.

Durata del trattamento Tutti i pazienti saranno trattati per un periodo di 4 settimane.

Dati I risultati dello studio saranno comunicati a tutti i partecipanti alla fine dello studio.