PHF19-genexpressie en EZH2-genverwijdering bij acute myeloïde leukemie

Acute myeloïde leukemie (AML) is een heterogene klonale aandoening die wordt gekenmerkt door onvolgroeide myeloïde celproliferatie en beenmergfalen. De diagnose van AML is gebaseerd op een morfologische diagnose met proliferatie van blastcellen ≥ 20% van de beenmergcellen, flowcytometrische analyse en cytogenetische afwijkingen.

De etiologische agens en pathogenese van AML zijn niet helemaal duidelijk, slechts enkele AML-gevallen kunnen nauwkeurig worden geclassificeerd via traditionele cellulaire morfologische classificatie. Het is dus erg moeilijk om de ziektetoestand te beoordelen en de prognose te voorspellen. Onjuiste expressie van specifieke genen is een veel voorkomende bevinding bij AML en kan klinisch relevante biologische subsets induceren. Cytogenetische afwijkingen en moleculaire veranderingen bieden de krachtigste prognostische informatie bij AML. Bijgevolg zal de identificatie van nieuwe biomarkers die de uitkomst kunnen voorspellen of de keuze voor een behandeling kunnen sturen, meer bijdragen aan de klinische behandeling van AML.

Generepressie is de deactivering van een actief gen dat transcriptiestop veroorzaakt en het vertegenwoordigt een krachtig hulpmiddel bij het beheersen van genexpressie om de metabole ontregeling tijdens de ontwikkeling of het differentiatieprogramma te voorkomen. Polycomb repressief complex 2 (PRC2) is het enige enzymatische complex dat in staat is om generepressie tot stand te brengen door middel van methylering in hoge mate van histon H3 op lysine 27 (H3K27), daarom speelt het een cruciale rol bij de regulatie van normale hematopoëse. Enhancer van Zeste Homolog 2 (EZH2) -gen is de katalytische subeenheid van PRC2, gelokaliseerd op chromosoom 7q36.1. Het EZH2-gen codeert voor EZH2-methyltransferase dat transcriptionele inactivatie medieert door trimethylering van lysine 27 van histon H3 (H3K27me3). Methyleringsactiviteit van EZH2 vergemakkelijkt de vorming van heterochromatine en legt daardoor de genfunctie stil, wat belangrijk is voor ontwikkeling, differentiatie en bepaling van het lot van de cel.

Accumulerende onderzoeken hebben aangetoond dat ontregeling van EZH2 betrokken is bij menselijke kankers. EZH2 kan een dubbele rol spelen bij de ontwikkeling van kanker, afhankelijk van het type kanker als tumoronderdrukker of als oncogen. Overexpressie van EZH2 werd waargenomen in tal van solide tumoren en het richten op EZH2 kan regressie van carcinogenese veroorzaken.

EZH2-inactivatie gemedicineerd door mutatie of onderexpressie bij myelodysplastische syndromen (MDS) of myeloproliferatieve neoplasmata (MPN) kan bijdragen aan de pathogenese van de ziekte en wordt in verband gebracht met een slechte prognose. Bij AML kan EZH2-ontregeling veroorzaakt door mutatie en onderexpressie fungeren als potentiële biomarkers die de prognose voorspellen en de behandelingskeuze tussen transplantatie en chemotherapie sturen. EZH2 bleek tumoronderdrukkende en oncogene functies te hebben in verschillende fasen van AML.

Het moet echter nog worden gedefinieerd of deregulering van verschillende PRC2-geassocieerde partners ook betrokken is bij de ontwikkeling van maligniteiten.

PHF 19 (PHD-vingerproteïne 19), een polykamachtig lid van PRC2-cofactoren, fungeert als een kritische bemiddelaar bij het ontstaan ​​van tumoren. PHF 19 gelokaliseerd in chromosoom 9q33.2, codeert voor een lid van de polycomb-groep (PcG) van eiwitten die functioneert door repressieve transcriptionele toestanden van veel ontwikkelingsregulerende genen in stand te houden.

Van PHF19 is aangetoond dat het een belangrijke modulator is van histonmethylering, waardoor de transcriptionele chromatine-activiteit wordt gereguleerd. PHF19 rekruteert rechtstreeks het polycomb-repressieve complex 2 (PRC2) via binding aan H3K36me3 en leidt tot activering van Enhancer of Zeste Homolog 2 (EZH2) als enzymatische subeenheid van PRC2, wat resulteert in tri-methylering van H3K27. Eerdere studies bevestigden dat PHF19 ontregeld is bij verschillende soorten kanker, wat resulteert in de derepressie van PRC2-doelgenen en kan worden gebruikt als een marker van agressieve ziekte.

Tot op heden zijn er geen gepubliceerde gegevens over de rol van zowel PHF19 als EZH2 bij AML. Deze studie was dus opgezet om de onontdekte kritische oncogene route van AML te verklaren, waarin het PHF19-expressiepatroon en de EZH2-genverwijdering kwaadaardige progressie bevorderen en hun prognostische rol detecteren.

Doel van het werk:

1. Om het expressiepatroon van het PHF19-gen te detecteren door polymerasekettingreactie (PCR) en EZH2-genverwijdering door fluorescentie in situ hybridisatie (FISH) bij nieuw gediagnosticeerde AML-patiënten.
2. Om de associatie tussen expressie PHF19-gen en EZH2-gendeletie bij AML-patiënten te bestuderen.
3. Evaluatie van de rol van EZH2- en PHF19-genen als voorspellende markers van de uitkomst van AML-patiënten.