Expressão do gene PHF19 e ​​deleção do gene EZH2 na leucemia mielóide aguda

A Leucemia Mielóide Aguda (LMA) é uma doença clonal heterogênea caracterizada por proliferação de células mielóides imaturas e falência da medula óssea. O diagnóstico da LMA é baseado no diagnóstico morfológico com proliferação de células blásticas ≥ 20% das células da medula óssea, análise de citometria de fluxo e anormalidades citogenéticas.

O agente etiológico e a patogênese da LMA não são totalmente claros, apenas alguns casos de LMA podem ser classificados com precisão por meio da classificação morfológica celular tradicional Assim, é muito difícil julgar a condição da doença e prever o prognóstico. A expressão inadequada de genes específicos é um achado comum na LMA e pode induzir subconjuntos biológicos clinicamente relevantes. Anormalidades citogenéticas e alterações moleculares fornecem as informações prognósticas mais poderosas na LMA. Consequentemente, a identificação de novos biomarcadores que possam prever o resultado ou orientar a escolha do tratamento contribuirá mais para o manejo clínico da LMA.

A repressão gênica é a desativação de um gene ativo que causa o desligamento da transcrição e representa uma ferramenta poderosa no controle da expressão gênica a fim de prevenir a desregulação metabólica durante o desenvolvimento ou o programa de diferenciação Polycomb repressive complex 2 (PRC2) é o único complexo capaz de estabelecer a repressão gênica por meio da metilação de alto grau da histona H3 na lisina 27 (H3K27), portanto, desempenha papéis críticos na regulação da hematopoiese normal. O gene Enhancer of Zeste Homolog 2 (EZH2) é a subunidade catalítica de PRC2, localizada no cromossomo 7q36.1. O gene EZH2 codifica a metiltransferase EZH2 que medeia a inativação da transcrição através da trimetilação da lisina 27 da histona H3 (H3K27me3). A atividade de metilação de EZH2 facilita a formação de heterocromatina, portanto, silencia a função do gene, que é importante para o desenvolvimento, diferenciação e determinação do destino celular.

Estudos acumulados provaram que a desregulação de EZH2 está envolvida em cânceres humanos. O EZH2 pode ter um papel duplo no desenvolvimento do câncer, atuando como um supressor de tumor ou um oncogene, dependendo do tipo de câncer. A superexpressão de EZH2 foi observada em numerosos tumores sólidos e o direcionamento de EZH2 pode causar regressão da carcinogênese.

A inativação de EZH2 medicada por mutação ou subexpressão em síndromes mielodisplásicas (SMD) ou neoplasias mieloproliferativas (MPN) pode contribuir para a patogênese da doença e está associada a um mau prognóstico. Na LMA, a desregulação de EZH2 causada por mutação e subexpressão pode atuar como potenciais biomarcadores predizendo o prognóstico e orientando a escolha do tratamento entre transplante e quimioterapia. Verificou-se que EZH2 tem funções supressoras e oncogênicas de tumores em diferentes fases da LMA.

No entanto, resta definir se a desregulação de vários parceiros associados ao PRC2 também está envolvida no desenvolvimento de malignidade.

PHF 19 (PHD finger protein 19) um membro tipo polycomb dos cofatores PRC2, atua como um mediador crítico da tumorigênese. PHF 19 localizado no cromossomo 9q33.2, codifica um membro do grupo polycomb (PcG) de proteínas que funciona mantendo estados transcricionais repressivos de muitos genes reguladores do desenvolvimento.

O PHF19 demonstrou ser o principal modulador da metilação das histonas, regulando assim a atividade transcricional da cromatina. PHF19 recruta diretamente o complexo repressivo policomb 2 (PRC2) por meio da ligação a H3K36me3 e leva à ativação do Enhancer of Zeste Homólogo 2 (EZH2) como subunidade enzimática de PRC2, resultando assim na trimetilação de H3K27. Estudos anteriores confirmaram que o PHF19 está desregulado em vários tipos de câncer, resultando na desrepressão dos genes-alvo PRC2 e pode ser usado como um marcador de doença agressiva.

Até o momento, não há dados publicados sobre o papel de PHF19 e ​​EZH2 na LMA. Portanto, este estudo foi desenhado para explicar a via oncogênica crítica inexplorada da LMA, na qual o padrão de expressão do PHF19 e ​​a deleção do gene EZH2 promovem a progressão maligna e detectam seu papel prognóstico.

Objetivo do trabalho:

1. Detectar o padrão de expressão do gene PHF19 por reação em cadeia da polimerase (PCR) e deleção do gene EZH2 por hibridização in situ por fluorescência (FISH) em pacientes com LMA recém-diagnosticados.
2. Estudar a associação entre a expressão do gene PHF19 e ​​a deleção do gene EZH2 em pacientes com LMA.
3. Avaliação do papel dos genes EZH2 e PHF19 como marcadores preditores da evolução de pacientes com LMA.