PHF19-genekspression og EZH2-gendeletion ved akut myeloid leukæmi

Akut myeloid leukæmi (AML) er en heterogen klonal lidelse karakteriseret ved umoden myeloid celleproliferation og knoglemarvssvigt. Diagnose af AML er baseret på morfologisk diagnose med proliferation af blastceller ≥ 20 % af knoglemarvsceller, flowcytometrisk analyse og cytogenetiske abnormiteter.

Det ætiologiske agens og patogenesen af ​​AML er ikke helt klar, kun få AML tilfælde kan klassificeres nøjagtigt gennem traditionel cellulær morfologisk klassificering. Det er således meget vanskeligt at bedømme sygdomstilstanden og forudsige prognose. Ukorrekt ekspression af specifikke gener er et almindeligt fund i AML og kan inducere klinisk relevante biologiske undergrupper. Cytogenetiske abnormiteter og molekylære ændringer giver den mest kraftfulde prognostiske information i AML. Som følge heraf vil identifikation af nye biomarkører, som kunne forudsige udfald eller vejlede behandlingsvalg, yde et større bidrag til den kliniske håndtering af AML.

Genrepression er deaktivering af et aktivt gen, der forårsager nedlukning af transkription, og det repræsenterer et kraftfuldt værktøj til at kontrollere genekspression for at forhindre metabolisk dysregulering under udviklingen, eller differentieringsprogrammet Polycomb repressive complex 2 (PRC2) er det eneste enzym. kompleks, der er i stand til at etablere gen-undertrykkelse gennem højgradig methylering af histon H3 ved lysin 27 (H3K27), derfor spiller det kritiske roller i reguleringen af ​​normal hæmatopoiese. Enhancer af Zeste Homolog 2 (EZH2) genet er den katalytiske underenhed af PRC2, placeret på kromosom 7q36.1. EZH2-genet koder for EZH2-methyltransferase, som medierer transkriptionel inaktivering gennem trimethylering af lysin 27 af histon H3 (H3K27me3). Methyleringsaktivitet af EZH2 letter heterochromatindannelse og dæmper derved genfunktion, som er vigtig for udvikling, differentiering og celleskæbnebestemmelse.

Akkumulerende undersøgelser har bevist, at EZH2-dysregulering er involveret i humane kræftformer. EZH2 kan have en dobbeltrolle i kræftudvikling, idet den fungerer som en tumorundertrykker eller et onkogen afhængigt af kræfttypen. Overekspression af EZH2 blev observeret i adskillige solide tumorer, og målretning mod EZH2 kan forårsage regression af carcinogenese.

EZH2-inaktivering medicineret ved mutation eller underekspression i myelo-dysplastiske syndromer (MDS) eller myeloproliferative neoplasmer (MPN) kan bidrage til sygdomspatogenese og er forbundet med en dårlig prognose. I AML kan EZH2-dysregulering forårsaget af mutation og underekspression fungere som potentielle biomarkører, der forudsiger prognose og vejleder behandlingsvalget mellem transplantation og kemoterapi. EZH2 viste sig at have tumorundertrykkende og onkogene funktioner i forskellige faser af AML.

Det mangler dog at blive defineret, om deregulering af forskellige PRC2-associerede partnere også er involveret i malignitetsudvikling.

PHF 19 (PHD fingerprotein 19), et polycomb-lignende medlem af PRC2-cofaktorer, fungerer som en kritisk mediator af tumorgenese. PHF 19 placeret i kromosom 9q33.2, koder for et medlem af polycomb-gruppen (PcG) af proteiner, der fungerer ved at opretholde repressive transkriptionstilstande af mange udviklingsregulerende gener.

PHF19 har vist sig at være en væsentlig modulator af histonmethylering og derved regulere transkriptionel kromatinaktivitet. PHF19 rekrutterer direkte det polycomb-repressive kompleks 2 (PRC2) via binding til H3K36me3 og fører til aktivering af Enhancer of Zeste Homolog 2 (EZH2) som enzymatisk underenhed af PRC2, hvilket resulterer i tri-methylering af H3K27. Tidligere undersøgelser bekræftede, at PHF19 er dysreguleret i flere typer kræft, hvilket resulterer i derepression af PRC2-målgener og kan bruges som en markør for aggressiv sygdom.

Til dato er der ingen offentliggjorte data om rollen af ​​både PHF19 og EZH2 i AML. Så denne undersøgelse blev designet til at forklare uudforsket kritisk onkogen vej for AML, hvor PHF19-ekspressionsmønster og EZH2-gendeletion fremmer malign progression og detekterer deres prognostiske rolle.

Formålet med arbejdet:

1. At detektere ekspressionsmønster af PHF19-genet ved polymerasekædereaktion (PCR) og EZH2-gendeletion ved Fluorescence in situ Hybridization (FISH) hos nyligt diagnosticerede AML-patienter.
2. At studere sammenhængen mellem ekspression af PHF19-gen og EZH2-gendeletion hos AML-patienter.
3. Evaluering af EZH2- og PHF19-geners rolle som prædiktormarkører for AML-patientudfald.