Terapeutisk induksjon av endogene antibiotika

Studiedesign: En dobbeltblind randomisert klinisk studie med påfølgende oppfølging.

Studieemner: Voksne mannlige og kvinnelige pasienter som går på Clinical Research and Service Center (CRSC) ved ICDDR,B og Matlab Hospital vil bli screenet for deltakelse i studien.

Randomisering:

I følge en datagenerert randomiseringsliste vil pasienter som fyller inngangskriteriene, randomiseres til enten intervensjonsgruppe (Pivmecellinam pluss butyratklyster) eller kontrollgruppe (Pivmecellinam pluss normal saltvannsklyster). Butyratklyster vil inneholde 80 mmol/L butyrat i vanlig saltvann (pH 7,2). Placebo klyster vil inneholde normalt saltvann (pH 7,2)

Saksbehandling:

Etter innskrivning vil pasientene bli innlagt i studieavdelingen til ICDDRB Dhaka og Matlab sykehus. En standard klinisk historie og klinisk undersøkelse vil bli utført av en av etterforskerne eller studielegen. Alle pasienter vil få Pivmecillinam, 400 mg, 8 timer i 5 dager. Intervensjonsgruppen vil motta butyratklyster 80 ml 80 mM natriumbutyrat, 12 timer i 72 timer mens placebogruppen vil få 80 ml normal saltvann 12 timer i 72 timer. Alle pasienter vil få vanlig sykehusmat tre ganger daglig (frokost, lunsj og kveldsmat). Pasientene vil forbli på studieavdelingen i 5 dager for å muliggjøre identifisering av eventuelle tilbakefallstilfeller.

Prosedyre for butyratklyster:

Pasienter vil bli instruert til å ligge på en seng (koleraseng) i venstre sideleie. Et mykt rektalkateter vil bli introdusert av en sykepleier/lege, gjennom hvilket 80 ml butyratløsning vil bli instillert sakte med en 50 ml plastsprøyte. Pasientene vil bli bedt om å beholde klysteret i minst ½ time ved å forbli liggende i 30 minutter etter administreringen. Men hvis en pasient ikke kan beholde klysteret i 30 minutter, vil han få en ny runde med klyster umiddelbart etter avføring.

Definisjon av klinisk kur: En pasient vil bli definert som klinisk kurert hvis det på dag 3 ikke er observert blod eller slim i avføringen, det er ≤ 3 uformet avføring i løpet av 24 timer og ingen feber (oral temperatur > 37,5°C) er innspilt.

Behandlingssvikt: En pasient vil bli ansett som en behandlingssvikt på dag 3 når det er en av følgende funksjoner tilstede: > 3 uformet avføring i løpet av 24 timer, tilstedeværelse av blod i avføring eller tilstedeværelse av feber (oral temperatur > 37,5°C ).

Samling av prøver:

Pasienter vil bli bedt om å bli på sykehuset i minst 5 dager for å lette sykdomsovervåking og prøvetaking. På innleggelsesdagen (pasienter vil bli registrert etter serologisk bekreftelse ved lysbildeagglutinasjonstest på påfølgende dag, dvs. dag 1), vil avføringsprøver bli tatt fra hver pasient hver dag fra innleggelsesdagen til 4 dager etter innleggelsen. Rektale biopsiprøver vil kun bli samlet inn på innleggelsesdagen og 7 dager etter innleggelse fra pasienter som er registrert på Dhaka sykehus. Tre ml blod vil bli samlet etter innleggelse for måling av C-reaktivt protein (CRP) som vil bli brukt som en indikator for å overvåke omfanget av betennelse. 1 ml blod fra pasienter vil bli samlet inn for å måle CRP i serum på den 4. innleggelsesdagen.

Avføring: Ferske avføringsprøver vil bli samlet inn for rutinemessig mikroskopisk undersøkelse for parasitter eller cyster og samt RBC, pusceller og makrofager. Avføringsprøver vil også bli testet for måling av bakterietall/belastning. Kort fortalt vil 1 g avføring fortynnes i vanlig saltvann (1:10), vortex-blandes i 5 minutter, etterfulgt av seriefortynninger på 1:10 i vanlig saltvann og plates ut i MacConkey-agarplater. Etter inkubasjon over natten ved 37ºC, vil bakteriell cfu telles. Ferske avføringsprøver vil også bli ekstrahert som beskrevet tidligere for måling av LL-37, humant beta-defensin 1 og 3 og proinflammatoriske cytokiner (interleukin-8 og 1beta) ved hjelp av ELISA-metoden.

Rektalbiopsi: Rektalbiopsiprøver vil bli innhentet fra pasienter (kun i Dhaka Hospital).