Indução Terapêutica de Antibióticos Endógenos

Desenho do estudo: Ensaio clínico randomizado duplo-cego com acompanhamento subsequente.

Sujeitos do estudo: Pacientes adultos do sexo masculino e feminino atendidos no Centro de Serviços e Pesquisa Clínica (CRSC) do ICDDR, B e Matlab Hospital serão selecionados para participação no estudo.

Randomization:

De acordo com uma lista de randomização gerada por computador, os pacientes que preencherem todos os critérios de entrada serão randomizados para o grupo de intervenção (Pivmecellinam mais enema de butirato) ou grupo de controle (Pivmecellinam mais enema salino normal). O enema de butirato conterá 80 mmol/L de butirato em solução salina normal (pH 7,2). Placebo enema conterá solução salina normal (pH 7,2)

Gestão de caso:

Após a inscrição, os pacientes serão admitidos na ala de estudo do hospital ICDDRB Dhaka e Matlab. Um histórico clínico padrão e exame clínico serão realizados por um dos investigadores ou médico do estudo. Todos os pacientes receberão Pivmecillinam, 400 mg, 8 horas por 5 dias. O grupo de intervenção receberá enema de butirato 80 ml de butirato de sódio 80 mM, 12 horas por 72 horas, enquanto o grupo placebo receberá 80 ml de solução salina normal 12 horas por 72 horas. Todos os pacientes receberão a alimentação hospitalar habitual três vezes ao dia (café da manhã, almoço e jantar). Os pacientes permanecerão na enfermaria do estudo por 5 dias para permitir a identificação de qualquer caso de recaída.

Procedimento para enema de butirato:

Os pacientes serão instruídos a deitar em uma cama (berço de cólera) em decúbito lateral esquerdo. Um cateter retal macio será introduzido por um enfermeiro/médico, através do qual serão instilados lentamente 80 ml de solução de butirato com uma seringa plástica de 50 ml. Os pacientes serão solicitados a reter o enema por pelo menos ½ hora, permanecendo em decúbito dorsal por 30 minutos após a administração. No entanto, se um paciente não puder reter o enema por 30 minutos, ele receberá uma segunda rodada de enema imediatamente após a defecação.

Definição de cura clínica: Um paciente será definido como clinicamente curado se no dia 3 não forem observados sangue ou muco nas fezes, houver ≤ 3 fezes não formadas em 24 horas e nenhuma febre (temperatura oral > 37,5° C) for gravado.

Falha do tratamento: Um paciente será considerado falha do tratamento no dia 3 quando houver qualquer uma das seguintes características presentes: > 3 fezes não formadas em 24 horas, presença de sangue em qualquer fezes ou presença de febre (temperatura oral > 37,5° C ).

Coleta de Amostras:

Os pacientes serão solicitados a permanecer no hospital por pelo menos 5 dias para facilitar o monitoramento da doença e a amostragem. No dia da admissão (os pacientes serão inscritos após a confirmação sorológica por teste de aglutinação em lâmina no dia subsequente, ou seja, dia 1), amostras de fezes serão coletadas de cada paciente todos os dias, começando no dia da admissão até 4 dias após a admissão. Amostras de biópsia retal serão coletadas no dia da admissão e 7 dias após a admissão apenas de pacientes matriculados no hospital de Dhaka. Três mL de sangue serão coletados após a admissão para dosagem da proteína C-reativa (PCR) que será utilizada como indicador para monitorar a magnitude da inflamação. Será coletado 1 mL de sangue dos pacientes para dosagem da PCR no soro no 4º dia de internação.

Fezes: Amostras de fezes frescas serão coletadas para exame microscópico de rotina para parasitas ou cistos e também para hemácias, células de pus e macrófagos. Amostras de fezes também serão testadas para medição de contagem/carga bacteriana. Resumidamente, 1 g de fezes será diluído em solução salina normal (1:10), agitado em vórtex por 5 min, seguido de diluições seriadas de 1:10 em solução salina normal e semeado em placas de ágar MacConkey. Após incubação noturna a 37ºC, as cfu bacterianas serão contadas. Amostras de fezes frescas também serão extraídas conforme descrito anteriormente para medição de LL-37, beta-defensina humana 1 e 3 e citocinas pró-inflamatórias (interleucina-8 e 1beta) pelo método ELISA.

Biópsia retal: As amostras de biópsia retal serão obtidas de pacientes (somente no Dhaka Hospital).