Induzione terapeutica di antibiotici endogeni

Disegno dello studio: uno studio clinico randomizzato in doppio cieco con successivo follow-up.

Soggetti dello studio: I pazienti adulti di sesso maschile e femminile che frequentano il Centro di ricerca e servizi clinici (CRSC) dell'ICDDR, B e dell'ospedale Matlab saranno sottoposti a screening per la partecipazione allo studio.

Randomizzazione:

Secondo un elenco di randomizzazione generato dal computer, i pazienti che soddisfano pienamente i criteri di ingresso verranno randomizzati al gruppo di intervento (Pivmecellinam più clistere di butirrato) o al gruppo di controllo (Pivmecellinam più clistere di soluzione salina normale). Il clistere di butirrato conterrà 80 mmol/L di butirrato in soluzione salina normale (pH 7,2). Il clistere placebo conterrà soluzione salina normale (pH 7,2)

Gestione del caso:

Dopo l'arruolamento, i pazienti saranno ricoverati nel reparto di studio dell'ICDDRB Dhaka e dell'ospedale Matlab. Una storia clinica standard e un esame clinico saranno eseguiti da uno degli sperimentatori o dal medico dello studio. Tutti i pazienti riceveranno Pivmecillinam, 400 mg, 8 ogni ora per 5 giorni. Il gruppo di intervento riceverà clistere di butirrato 80 ml di butirrato di sodio 80 mM, 12 ore per 72 ore mentre il gruppo placebo riceverà 80 ml di soluzione salina normale 12 ore per 72 ore. Tutti i pazienti riceveranno il consueto vitto ospedaliero tre volte al giorno (colazione, pranzo e cena). I pazienti rimarranno nel reparto dello studio per 5 giorni per consentire l'identificazione di eventuali casi di recidiva.

Procedura per clistere di butirrato:

I pazienti verranno istruiti a sdraiarsi su un letto (lettino per il colera) in posizione laterale sinistra. Un catetere rettale morbido verrà introdotto da un infermiere/medico, attraverso il quale verranno instillati lentamente 80 ml di soluzione di butirrato con una siringa di plastica da 50 ml. Ai pazienti verrà chiesto di trattenere il clistere per almeno mezz'ora rimanendo supini per 30 minuti dopo la somministrazione. Tuttavia, se un paziente non riesce a trattenere il clistere per 30 minuti, gli verrà somministrato un secondo ciclo di clistere subito dopo la defecazione.

Definizione di cura clinica: un paziente sarà definito clinicamente guarito se al giorno 3 non si osserva sangue o muco nelle feci, vi sono ≤ 3 feci non formate in 24 ore e non si riscontra febbre (temperatura orale > 37,5° C) registrato.

Fallimento del trattamento: un paziente sarà considerato un fallimento del trattamento il giorno 3 quando è presente una delle seguenti caratteristiche: > 3 feci non formate in 24 ore, presenza di sangue in qualsiasi feci o presenza di febbre (temperatura orale > 37,5° C ).

Raccolta di campioni:

Ai pazienti verrà richiesto di rimanere in ospedale per almeno 5 giorni per facilitare il monitoraggio e il campionamento della malattia. Il giorno del ricovero (i pazienti verranno arruolati dopo la conferma sierologica mediante test di agglutinazione su vetrino il giorno successivo, ovvero il giorno 1), i campioni di feci verranno raccolti da ciascun paziente ogni giorno a partire dal giorno del ricovero fino a 4 giorni dopo il ricovero. I campioni di biopsia rettale verranno raccolti il ​​giorno del ricovero e 7 giorni dopo il ricovero solo da pazienti arruolati nell'ospedale di Dhaka. Dopo il ricovero verranno raccolti tre ml di sangue per la misurazione della proteina C-reattiva (CRP) che verrà utilizzata come indicatore per monitorare l'entità dell'infiammazione. Verrà raccolto 1 mL di sangue dai pazienti per misurare la PCR nel siero il 4° giorno di ricovero.

Feci: Verranno raccolti campioni di feci fresche per l'esame microscopico di routine per parassiti o cisti e così come RBC, cellule di pus e macrofagi. I campioni di feci saranno anche testati per misurare la carica batterica. In breve, 1 g di feci sarà diluito in soluzione fisiologica (1:10), agitato su vortex per 5 minuti, seguito da diluizioni seriali di 1:10 in soluzione fisiologica e piastrato in piastre di agar MacConkey. Dopo incubazione notturna a 37ºC, verranno conteggiate le ufc batteriche. Campioni di feci fresche verranno inoltre estratti come descritto in precedenza per la misurazione di LL-37, beta-defensina umana 1 e 3 e citochine proinfiammatorie (interleuchina-8 e 1beta) mediante metodo ELISA.

Biopsia rettale: i campioni di biopsia rettale saranno ottenuti dai pazienti (solo nell'ospedale di Dhaka).