VEGF tidlig bildediagnostikk for brystkreft

Mål med rettssaken

Hovedmål Målet er å utføre en mulighetsstudie for å vise at VEGF PET-avbildning med 89Zr-bevacizumab som sporstoff kan brukes til tidlig påvisning av brystkreft.

Sekundære mål Et sekundært mål er om positive lymfeknuter kan påvises.

Sluttpunkter

• Det primære endepunktet vil være opptak av 89Zr-bevacizumab sporstoff i primære brystsvulster < 2 cm.
• Det sekundære endepunktet vil være 89Zr-bevacizumab sporopptak i aksillære lymfeknuter.

Pasientvalgskriterier

Inkludering

• Pasienter med brysttumorstørrelse < 2 cm i diameter (bestemt ved hjelp av konvensjonelle bildeteknikker: mammografi, ultralyd eller MR) som er planlagt å få operativ intervensjon enten ved mastektomi eller lumpektomi.
• histologisk påvist brystkreft
• Alder > 18 år.
• WHO ytelsesstatus 0-2 (se: vedlegg B)
• Signert skriftlig informert samtykke (godkjent av Institutional Review Board [IRB]/ Independent Ethics Committee [IEC]) innhentet før eventuelle studiespesifikke screeningprosedyrer.
• Kan overholde protokollen.

Utelukkelse

• Annen invasiv malignitet eller tilstand som kan påvirke overholdelse av protokollen eller tolkning av resultater.
• Gravide eller ammende kvinner. Dokumentasjon på negativ graviditetstest skal foreligge for premenopausale kvinner med intakte reproduktive organer og for kvinner mindre enn to år etter overgangsalderen.
• Forutgående strålebehandling på det involverte området.
• Større operasjon innen 28 dager før oppstart av studien.
• Klinisk signifikant kardiovaskulær sykdom.
• Tidligere allergisk reaksjon på immunglobuliner eller immunglobulinallergi.

Forsøksdesign Alle pasienter vil gjennomgå en 89Zr-bevacizumab PET-skanning preoperativt på dag 4 etter sporinjeksjon (se: avsnitt 16 for tidsplan). Opptaket av 89Zr-bevacizumab i svulsten vil kvantifiseres. Resultatene vil bli smeltet sammen og sammenlignet med standard avbildningsteknikker og med standard tumorhistologi samt spesifikke tumorfarginger for angiogenese inkludert VEGF-farging. Sensitivitet og spesifisitet vil bli sammenlignet med konvensjonell avbildning.

Studievurderinger

89Zr-bevacizumab PET-avbildning

Radiomerking av bevacizumab Konjugering og radiomerking av det monoklonale antistoffet utføres i hovedsak som beskrevet av Verel et al (15), med kun mindre justeringer med hensyn til rensing. Kort sagt: FTP-N-sucDf-Fe (vennligst levert av VU University Medical Center, Amsterdam, Nederland) ble konjugert til mAb i et 10:1 molart forhold. Fe(III) fjernes deretter med et overskudd av EDTA (Calbiochem, San Diego, California, USA) i 30 minutter ved 35°C og antistoffet renses ved ultrafiltrering (Vivaspin-2 Centrifugal Concentrator, filter 30 kDa, Sartorius, Göttingen , Tyskland). Dette rensede antistoffet lagres enten ved -80°C eller brukes umiddelbart for radiomerking. Det konjugerte antistoffet tilsettes til 89Zr-oksalat (100-1000 MBq/mg mAb, vennligst levert av VU University Medical Center, Amsterdam, Nederland), 0,9 % NaCl (Braun Melsungen AG, Oss, Nederland), 2M Na2CO3 ( OPG Farma, Utrecht, Nederland) og 0,5M HEPES-buffer (Sigma-Aldrich, Zwijndrecht, Nederland). Etter 60 minutter renses det radiomerkede antistoffet ved ultrafiltrering Vivaspin-2 sentrifugalkonsentrator, filter 30 kDa, Sartorius, Göttingen, Tyskland) og fortynnes i 0,9 % NaCl/gentisinsyre (5 mg/ml, Merck Schuchardt OHG, Hohenbrunn, Tyskland) . 89Zr-isotopen har en fysisk t ½ på 78 timer. 89Zr-bevacizumab har radiokjemisk renhet >95 % og utmerket langtidsstabilitet i humant serum (> 1 uke). Konjugering og radiomerking utføres i radiofarmasøyfasilitetene til avdelingen for nukleærmedisin og molekylær bildebehandling under GMP-forhold, under ansvar av en sykehusfarmasøyt. Mer detaljert informasjon om 89Zr-bevacizumab finnes i dokumentasjonen for undersøkelsesmedisin (IMPD; vedlegg C).

PET-avbildning Pasienter vil bli injisert intravenøst ​​med 37 MBq 89Zr-bevacizumab (proteindose 5 mg) på dag 0. Deretter vil det bli tatt bilder 4 dager etter injeksjonen av 89Zr-bevacizumab (se avsnitt 16 for tidsplan). For bildebehandling brukes et Siemens PET/CT-kamera. Opptak vil bli utført i 3D-modus fra nedre thorax til hals, i ca. 2 sengestillinger. Institutt for nukleærmedisin og molekylær bildebehandling er sertifisert i henhold til ISO-NEN-9001 standarden. Standard operasjonsprosedyrer for dynamisk skanning vil bli brukt for alle PET-skanninger. Faktisk drift av PET-kameraet og skanning vil bli utført av en nukleærmedisinsk teknolog. Endelig bildeanalyse vil bli utført av en nukleærmedisinsk spesialist. 89Zr-bevacizumab-distribusjonen vil bli skåret visuelt og kvantitativt.

Flertallet av pasientene vil også gjennomgå vaktpostknutepåvisning for stadieinndeling av aksillen under kirurgisk behandling av primærtumoren. For sentinel node-prosedyren brukes 99mTechnetium-merket nanokolloid. Den forventede tiden mellom administrering av 89Zr-bevacizumab og 99mTc-nanokolloid vil være omtrent 2 uker. Da vil 7 episoder med halveringstid av radiomerket 89Zr ha passert, og signalet vil være ubetydelig. Derfor forventes ingen interferens av radiomerkingssignalene.

Stråledose/sikkerhet Bruk av positronemitterende isotoper betyr eksponering for ioniserende stråling. På grunn av de potensielle farene ved stråling er retningslinjer for eksponering av friske frivillige spesifisert i "Besluit Stralingsbescherming (BS 2000), artikel 64 - en Nota van Toelichting (Staatsblad 2001, 397)", som viser til retningslinjene til Den internasjonale kommisjonen om strålevern (ICRP). Siden kinetikken til antistoffet bevacizumab er nesten sammenlignbar med den for trastuzumab, forventes stråledosen av 89Zr-merket bevacizumab å være i samme område som for 89Zr-trastuzumab.

For å estimere stråledosen til en "standard kvinne" under 89Zr-trastuzumab-skanning, ble det brukt tilgjengelige kinetiske data fra tidligere 111In-trastuzumab plan avbildning. Dette er mulig ettersom halveringstiden til 111In er i samme størrelsesorden som den for 89Zr, og derfor gjør det oss i stand til å spore sporkinetikk over en tidsperiode som også er relevant for 89Zr-dosimetri. Ved å bruke skanningsserier bestående av 4 påfølgende plane skanninger over en periode på 168 timer, ble oppholdstider for hovedkildeorganene og hele kroppen beregnet, og justert for forskjellen i nuklidhalveringstider. Disse oppholdstidene ble matet inn i OLINDA-programmet, som beregner den effektive stråledose ved hjelp av MIRD-skjemaet. Det endelige estimatet ble funnet fra gjennomsnitt av resultatene fra 5 forskjellige pasienter, noe som ga 18 mSv for en injisert dose på 37 MBq. I gjeldende protokoll vil dette resultere i en stråledose (inkludert dempingskorreksjon for lavdose CT) på 19,5 mSv for kvinner (og 16,5 mSv for menn). I følge ICRP 62 faller denne stråledosen i kategori III (moderat risiko).

Tumorfarging I tillegg til standardevalueringen av den postoperative tumorprøven, vil spesifikk farging for VEGF-relaterte proteiner bli utført, inkludert VEGF, CD34-farging for gjennomsnittlig vaskulær tetthet (MVD), SMA for vaskulær modning, HIF-1alfa for hypoksi, VEGF-reseptorer , Ki 67 for spredning eller annen relevant farging i henhold til den mest oppdaterte vitenskapelige innsikten.

Klinisk evaluering, laboratorietester, oppfølging

Før start

• Fysisk undersøkelse
• WHO ytelsesscore (se vedlegg B)
• Konvensjonell avbildning av brystet (mammografi, ultralyd eller MR)
• Histologisk bekreftelse av ondartet brystlesjon
• Evaluering av inn- og eksklusjonskriterier
• Signert skriftlig informert samtykke

Kriterier for evaluering

PET-skanning PET-skanning vil bli evaluert av en nukleærmedisinsk lege som er blindet for klinisk informasjon og lokalisering av svulsten. PET-dataene vil være korrelert til de konvensjonelle bildedataene. Den endelige postoperative patologiske evalueringen vil være relatert til PET-dataene.

Tumorfarging Evaluering av VEGF-relatert tumorfarging vil bli utført i samarbeid med en patolog, blindet for klinisk informasjon.

Statistiske betraktninger

I denne mulighetsstudien vil vi postulere høye krav for å bevise sensitiviteten til 89Zr-bevacizumab-PET-skanning for å oppdage brystkreftlesjoner for å rettferdiggjøre vårt endelige fremtidige mål om å oppnå en god diskriminering mellom godartede versus pre-maligne/maligne lesjoner med VEGF-avbildning . Krav om svært høy sensitivitet for å oppdage svulsten med 89Zr-bevacizumab-PET-skanning krever en sensitivitet som ikke er dårligere enn 99 %.

Vi vil bruke en stoppregel med en type 1 feil på 5 % (ensidig alfa på 5 %) og en beta på 10 % (~en potens på 90 %), og eksterne referanseverdier for falsk negative rater på 0,01 og som alternativ 0.10. En omfattende beskrivelse av stoppregelen med to grenser er inkludert i vedlegg C.

I denne studien er kravene p0=0,01, p1=0,10, alfa(regel)=0,05, beta(regel)=0,10 og alfa(nyttig)=0,05. Etter nøyaktig utregning resulterer dette i alfa(n)=0,1364, beta(N)=0,055 og alfa(fuktig,n)=0,6431, med 47 som maksimalt antall pasienter. Med en sann feilrate på 0,01 er sannsynligheten for å passere den øvre grensen 0,049; med en sann feilrate på 0,10 er denne sannsynligheten 0,903. Den øvre grensen, som representerer maksimalt antall akseptable feil, er 1 innen de første 35 pasientene og 2 opp til det totale antallet på 47 pasienter. Overvåking med stoppregelen kan stoppes (på grunn av meningsløs testing) når det ikke observeres feil hos de første 31 pasientene.

Autorisasjonsprosedyre for etterforsker

Spesialisten som skal behandle pasienten eller hans/hennes forskningssykepleier kan registrere en pasient for registrering.

Pasientregistrering

For å legge inn pasienter i denne studien, i arbeidstiden, bør dataansvarlig kontaktes på:

University Medical Center Groningen Institutt for medisinsk onkologi Telefon: 050-3612053 eller side nr 77045 Kvalifisering vil bli sjekket ved registrering.

For å avgjøre kvalifisering bør følgende informasjon oppgis:

• Initialer
• Fødselsdato
• WHO ytelsesscore
• Signert skriftlig informert samtykke
• Dato for planlagt operasjon (hvis kjent)

Skjemaer og prosedyrer for innsamling av data

Data vil bli samlet inn på papirsaksjournal (CRF). CRF-er vil bli samlet inn og data vil bli lagt inn anonymt i en Access-database.

Emneidentifikasjon Pasientdata lagres under en kode uten navn, som sikrer anonymitet.

Informert samtykke Alle pasienter vil bli informert om formålet med studien, mulige uønskede hendelser, prosedyrer og mulige farer han/hun vil bli utsatt for, og mekanismen for behandlingstildeling. De vil bli informert om den strenge konfidensialiteten til pasientdataene deres, men at deres medisinske journaler kan gjennomgås for prøveformål av autoriserte personer andre enn deres behandlende lege. Et eksempel på en pasientinformert samtykkeerklæring er gitt som vedlegg til denne protokollen.

Etikkkomiteen til UMCG vil validere lokale informerte samtykkedokumenter før studiestart.

Det vil bli lagt vekt på at deltakelsen er frivillig og at pasienten har lov til å nekte videre deltakelse i protokollen når han/hun ønsker det. Dette vil ikke påvirke pasientens videre behandling. Dokumentert informert samtykke må innhentes for alle pasienter som inngår i studien før de registreres eller randomiseres i studien. Dette må gjøres i samsvar med nasjonale og lokale forskriftskrav.

Prosedyren for informert samtykke må være i samsvar med ICHs retningslinjer for god klinisk praksis. Dette innebærer at "det skriftlige informerte samtykkeskjemaet skal være signert og personlig datert av pasienten eller av pasientens juridisk akseptable representant".