VEGF:n varhainen kuvantaminen rintasyövälle

Oikeudenkäynnin tavoitteet

Ensisijainen tavoite Tavoitteena on suorittaa toteutettavuustutkimus osoittaakseen, että VEGF PET -kuvausta, jossa käytetään 89Zr-bevasitsumabia merkkiaineena, voidaan käyttää rintasyövän varhaiseen havaitsemiseen.

Toissijaiset tavoitteet Toissijainen tavoite on, voidaanko positiivisia imusolmukkeita havaita.

Päätepisteet

• Ensisijainen päätetapahtuma on 89Zr-bevasitsumabin merkkiaineen sisäänotto primaarisissa rintakasvaimissa < 2 cm.
• Toissijainen päätetapahtuma on 89Zr-bevasitsumabin merkkiaineen otto kainaloimusolmukkeisiin.

Potilaan valintakriteerit

Inkluusio

• Potilaat, joiden rintakasvain on halkaisijaltaan < 2 cm (määritettynä tavanomaisilla kuvantamistekniikoilla: mammografialla, ultraäänellä tai magneettikuvauksella), joille on määrä saada leikkaushoito joko rinnan tai lumpektomian avulla.
• histologisesti todistettu rintasyöpä
• Ikä > 18 vuotta.
• WHO:n suorituskykytila ​​0-2 (katso liite B)
• Allekirjoitettu kirjallinen tietoinen suostumus (hyväksynyt Institutional Review Board [IRB] / Independent Ethics Committee [IEC]), joka on saatu ennen tutkimuskohtaisia ​​seulontamenettelyjä.
• Pystyy noudattamaan protokollaa.

Poissulkeminen

• Muu invasiivinen pahanlaatuinen kasvain tai tila, joka voi vaikuttaa protokollan noudattamiseen tai tulosten tulkintaan.
• Raskaana oleville tai imettäville naisille. Negatiivisen raskaustestin dokumenttien on oltava saatavilla premenopausaalisilla naisilla, joilla on ehjät sukuelimet, ja naisilla, jotka ovat alle kaksi vuotta vaihdevuosien jälkeen.
• Aiempi sädehoito kyseiselle alueelle.
• Suuri leikkaus 28 päivän sisällä ennen tutkimuksen aloittamista.
• Kliinisesti merkittävä sydän- ja verisuonisairaus.
• Aiempi allerginen reaktio immunoglobuliineille tai immunoglobuliiniallergia.

Kokeen suunnittelu Kaikille potilaille tehdään 89Zr-bevasitsumabi PET-skannaus ennen leikkausta päivänä 4 merkkiaineinjektion jälkeen (katso aikataulu kohdasta 16). 89Zr-bevasitsumabin otto kasvaimessa määritetään. Tulokset yhdistetään ja niitä verrataan tavanomaisiin kuvantamistekniikoihin ja normaaliin kasvainhistologiaan sekä spesifisiin kasvainvärjäyksiin angiogeneesiä varten, mukaan lukien VEGF-värjäys. Herkkyyttä ja spesifisyyttä verrataan tavanomaiseen kuvantamiseen.

Opintoarviot

89Zr-bevasitsumabi PET-kuvaus

Bevasitsumabin radioleimaus Monoklonaalisen vasta-aineen konjugointi ja radioleimaus suoritetaan pääosin Verel et al (15) kuvaamalla tavalla, mutta puhdistusta on muutettu vain vähän. Lyhyesti sanottuna: FTP-N-sucDf-Fe (ystävällisesti VU University Medical Center, Amsterdam, Alankomaat) konjugoitiin mAb:hen 10:1-moolisuhteella. Tämän jälkeen Fe(III) poistetaan ylimäärällä EDTA:ta (Calbiochem, San Diego, California, USA) 30 minuutin ajan 35 °C:ssa ja vasta-aine puhdistetaan ultrasuodatuksella (Vivaspin-2 Centrifugal Concentrator, suodatin 30 kDa, Sartorius, Göttingen , Saksa). Tämä puhdistettu vasta-aine joko säilytetään -80 °C:ssa tai sitä käytetään välittömästi radioleimaukseen. Konjugoitu vasta-aine lisätään 89Zr-oksalaattiin (100-1000 MBq/mg mAb, ystävällisesti VU University Medical Center, Amsterdam, Alankomaat), 0,9 % NaCl (Braun Melsungen AG, Oss, Alankomaat), 2 M Na2CO3 ( OPG Farma, Utrecht, Alankomaat) ja 0,5 M HEPES-puskuri (Sigma-Aldrich, Zwijndrecht, Alankomaat). 60 minuutin kuluttua radioleimattu vasta-aine puhdistetaan ultrasuodatuksella Vivaspin-2 Centrifugal Concentrator, suodatin 30 kDa, Sartorius, Göttingen, Saksa) ja laimennetaan 0,9 % NaCl/gentisiinihappoon (5 mg/ml, Merck Schuchardt OHG, Hohenbrunn, Saksa) . 89Zr-isotoopin fyysinen t½ on 78 tuntia. 89Zr-bevasitsumabin radiokemiallinen puhtaus on >95 % ja erinomainen pitkän aikavälin stabiilius ihmisen seerumissa (> 1 viikko). Konjugointi ja radioleimaus tehdään ydinlääketieteen ja molekyylikuvantamisen osaston radiofarmasian tiloissa GMP-olosuhteissa sairaala-apteekin vastuulla. Tarkemmat tiedot 89Zr-bevasitsumabista löytyvät tutkimuslääkeaineistosta (IMPD; liite C).

PET-kuvaus Potilaille injektoidaan suonensisäisesti 37 MBq 89Zr-bevasitsumabia (proteiiniannos 5 mg) päivänä 0. Sen jälkeen kuvat otetaan 4 päivää 89Zr-bevasitsumabiinjektion jälkeen (katso aikataulu kohdasta 16). Kuvaamiseen käytetään Siemensin PET/CT-kameraa. Tallennus suoritetaan 3D-tilassa rintakehän alaosasta kaulaan, noin 2 vuodeasennossa. Ydinlääketieteen ja molekyylikuvantamisen laitos on sertifioitu ISO-NEN-9001 standardin mukaisesti. Dynaamisen skannauksen vakiotoimintamenettelyjä käytetään kaikissa PET-skannauksissa. PET-kameran varsinaisen käytön ja skannaamisen suorittaa isotooppilääketieteen tekniikan asiantuntija. Lopullisen kuva-analyysin tekee isotooppilääketieteen asiantuntija. 89Zr-bevasitsumabin jakautuminen pisteytetään visuaalisesti ja kvantitatiivisesti.

Suurimmalle osalle potilaista tehdään myös vartiosolmukkeiden havaitseminen kainalon vaiheistamiseksi primaarisen kasvaimen kirurgisen hoidon aikana. Sentinel-solmumenettelyssä käytetään 99mTechnetium-leimattua nanokolloidia. Arvioitu aika 89Zr-bevasitsumabin ja 99mTc-nanokolloidin annon välillä on noin 2 viikkoa. Siihen mennessä radioaktiivisen 89Zr-merkin 7 puoliintumisaikajaksoa on ohi, ja sen signaali on mitätön. Siksi radioleimasignaalien häiriöitä ei odoteta.

Säteilyannos/turvallisuus Positroneja lähettävien isotooppien käyttö tarkoittaa altistumista ionisoivalle säteilylle. Säteilyn mahdollisten vaarojen vuoksi terveiden vapaaehtoisten altistumista koskevat ohjeet on määritelty julkaisussa "Besluit Stralingsbescherming (BS 2000), artikel 64 - en Nota van Toelichting (Staatsblad 2001, 397)", joka viittaa kansainvälisen komission ohjeisiin. säteilysuojelusta (ICRP). Koska bevasitsumabin vasta-aineen kinetiikka on lähes verrattavissa trastutsumabin kinetiikkaan, 89Zr-leimatun bevasitsumabin säteilyannoksen odotetaan olevan samalla alueella kuin 89Zr-trastutsumabin.

Säteilyannoksen arvioimiseksi "tavallisen naisen" 89Zr-trastutsumabiskannauksen aikana käytettiin saatavilla olevia kineettisiä tietoja aikaisemmasta 111In-trastutsumab-tasokuvauksesta. Tämä on mahdollista, koska 111In:n puoliintumisaika on samaa suuruusluokkaa kuin 89Zr:n puoliintumisaika, ja siksi sen avulla voimme seurata merkkiaineen kinetiikkaa ajanjaksolla, joka on merkityksellinen myös 89Zr:n dosimetrialle. Käyttämällä skannaussarjoja, jotka koostuivat 4 peräkkäisestä tasomaisesta skannauksesta 168 tunnin ajanjakson aikana, laskettiin päälähdeelinten ja koko kehon viipymäajat nuklidien puoliintumisaikojen erojen mukaan. Nämä viipymäajat syötettiin OLINDA-ohjelmaan, joka laskee efektiivisen säteilyannoksen MIRD-kaavion avulla. Lopullinen arvio saatiin 5 eri potilaan tulosten keskiarvosta, jolloin saatiin 18 mSv 37 MBq:n injektoidulle annokselle. Nykyisessä protokollassa tämä johtaisi naisille 19,5 mSv (ja miehille 16,5 mSv) säteilyannokseksi (sisältäen pienen annoksen TT:n vaimennuskorjauksen). ICRP 62:n mukaan tämä säteilyannos kuuluu kategoriaan III (kohtalainen riski).

Kasvaimen värjäys Leikkauksen jälkeisen kasvainnäytteen standardin arvioinnin lisäksi suoritetaan spesifinen värjäys VEGF-reittiin liittyville proteiineille, mukaan lukien VEGF, CD34-värjäys keskimääräistä verisuonitiheyttä (MVD), SMA verisuonten kypsymistä varten, HIF-1alfa hypoksiaa varten, VEGF-reseptorit , Ki 67 proliferaatiota tai muuta asiaankuuluvaa värjäystä varten uusimpien tieteellisten näkemysten mukaan.

Kliininen arviointi, laboratoriotutkimukset, seuranta

Ennen aloitusta

• Lääkärintarkastus
• WHO:n suorituskykypisteet (katso liite B)
• Tavanomainen rintojen kuvantaminen (mammografia, ultraääni tai MRI)
• Pahanlaatuisen rintavaurion histologinen vahvistus
• Sisään- ja poissulkemiskriteerien arviointi
• Allekirjoitettu kirjallinen tietoinen suostumus

Arviointikriteerit

PET-skannaus PET-skannaukset arvioi isotooppilääketieteen lääkäri, joka on sokeutunut kliinisen tiedon ja kasvaimen sijainnin suhteen. PET-tiedot korreloidaan tavanomaisen kuvantamisdatan kanssa. Lopullinen postoperatiivinen patologinen arviointi liittyy PET-tietoihin.

Kasvainvärjäys VEGF:ään liittyvän kasvainvärjäytymisen arviointi suoritetaan yhteistyössä patologin kanssa, joka on sokeutunut kliinisten tietojen suhteen.

Tilastolliset näkökohdat

Tässä toteutettavuustutkimuksessa oletamme korkeita vaatimuksia 89Zr-bevasitsumabi-PET-skannauksen herkkyyden osoittamiseksi rintasyöpäleesioiden havaitsemiseksi, jotta voimme perustella lopullisen tulevaisuuden tavoitteemme saada hyvä ero hyvänlaatuisten ja esipahanlaatuisten/pahanlaatuisten leesioiden välillä VEGF-kuvauksella. . Vaatimukset erittäin korkealle herkkyydelle kasvaimen havaitsemiseksi 89Zr-bevasitsumab-PET-skannauksella edellyttää herkkyyttä, joka ei ole huonompi kuin 99 %.

Käytämme pysäytyssääntöä, jonka tyypin 1 virhe on 5 % (yksipuolinen alfa 5 %) ja beta 10 % (~ 90 %), ja ulkoisia viitearvoja väärille negatiivisille luvuille 0,01 ja kuten vaihtoehto 0.10. Kattava kuvaus pysäytyssäännöstä kahdella rajalla on liitteessä C.

Tässä tutkimuksessa vaatimukset ovat p0=0,01, p1 = 0,10, alfa(sääntö)=0,05, beeta(sääntö)=0,10 ja alfa(turha) = 0,05. Tarkan laskennan jälkeen tämä johtaa alfa(n)=0,1364, beeta(N) = 0,055 ja alfa(futile,n) = 0,6431, 47 potilaiden enimmäismääränä. Todellisella epäonnistumisasteella 0,01 todennäköisyys ylittää yläraja on 0,049; kun todellinen epäonnistumisprosentti on 0,10, tämä todennäköisyys on 0,903. Yläraja, joka edustaa hyväksyttävien epäonnistumisten enimmäismäärää, on 1 ensimmäisten 35 potilaan sisällä ja 2 47 potilaan kokonaismäärään saakka. Seuranta pysäytyssäännöllä voidaan lopettaa (turhan testauksen vuoksi), kun 31 ensimmäisen potilaan aikana ei havaita vikoja.

Tutkijan lupamenettely

Potilasta hoitava erikoislääkäri tai hänen tutkimushoitajansa voi ilmoittautua potilaan rekisteröintiin.

Potilaan rekisteröinti

Potilaiden kirjaamiseksi tähän tutkimukseen tulee työaikana ottaa yhteyttä tietovastaavaan osoitteessa:

Groningenin yliopiston lääketieteellinen keskus Lääketieteellinen onkologia Puhelin: 050-3612053 tai sivu nro 77045 Kelpoisuus tarkistetaan ilmoittautumisen yhteydessä.

Kelpoisuuden määrittämiseksi on annettava seuraavat tiedot:

• Nimikirjaimet
• Syntymäaika
• WHO:n suorituskykypisteet
• Allekirjoitettu kirjallinen tietoinen suostumus
• Suunniteltu leikkauspäivä (jos tiedossa)

Lomakkeet ja menettelyt tietojen keräämiseksi

Tiedot kerätään paperilomakkeille (CRF). CRF:t kerätään ja tiedot syötetään anonyymisti Access-tietokantaan.

Kohteen tunnistaminen Potilastiedot tallennetaan nimettömällä koodilla, joka varmistaa anonyymin.

Tietoinen suostumus Kaikille potilaille tiedotetaan tutkimuksen tavoitteista, mahdollisista haittatapahtumista, menettelyistä ja mahdollisista vaaroista, joille hän altistuu, sekä hoidon kohdentamismekanismista. Heille kerrotaan heidän potilastietojensa tiukasta luottamuksellisuudesta, mutta heidän potilastietojaan voivat tarkastaa koekäyttöä varten muut valtuutetut henkilöt kuin heidän hoitava lääkärinsä. Esimerkki potilaan tietoisesta suostumuksesta on tämän protokollan liitteenä.

UMCG:n eettinen komitea validoi paikalliset tietoon perustuvat suostumusasiakirjat ennen tutkimuksen aloittamista.

Korostetaan, että osallistuminen on vapaaehtoista ja että potilas voi halutessaan kieltäytyä jatkosta osallistumasta protokollaan. Tämä ei vaikuta potilaan myöhempään hoitoon. Kaikilta tutkimukseen osallistuvilta potilailta on hankittava dokumentoitu tietoinen suostumus ennen kuin heidät rekisteröidään tai satunnaistetaan tutkimukseen. Tämä on tehtävä kansallisten ja paikallisten määräysten mukaisesti.

Tietoon perustuvan suostumuksen menettelyn on oltava ICH:n hyvän kliinisen käytännön ohjeiden mukainen. Tämä tarkoittaa, että "potilaan tai potilaan laillisesti hyväksyttävän edustajan tulee allekirjoittaa ja päivättävä kirjallinen tietoinen suostumuslomake".