VEGF Wczesne obrazowanie raka piersi

Cele rozprawy

Główny cel Celem jest przeprowadzenie studium wykonalności w celu wykazania, że ​​obrazowanie VEGF PET z użyciem 89Zr-bevacizumabu jako znacznika może być stosowane do wczesnego wykrywania raka piersi.

Cele drugorzędne Celem drugorzędnym jest to, czy można wykryć dodatnie węzły chłonne.

Punkty końcowe

• Pierwszorzędowym punktem końcowym będzie wychwyt znacznika 89Zr-bewacizumabu w pierwotnych guzach piersi <2 cm.
• Drugorzędowym punktem końcowym będzie wychwyt znacznika 89Zr-bevacizumabu w pachowych węzłach chłonnych.

Kryteria doboru pacjentów

Włączenie

• Pacjenci z guzem piersi o średnicy < 2 cm (określonej za pomocą konwencjonalnych technik obrazowania: mammografii, ultrasonografii lub rezonansu magnetycznego), u których zaplanowano interwencję operacyjną w postaci mastektomii lub lumpektomii.
• histologicznie potwierdzony rak piersi
• Wiek > 18 lat.
• Stan sprawności wg WHO 0-2 (patrz: załącznik B)
• Podpisana świadoma zgoda na piśmie (zatwierdzona przez instytucjonalną komisję rewizyjną [IRB]/niezależną komisję etyczną [IEC]) uzyskana przed jakimikolwiek procedurami przesiewowymi dotyczącymi konkretnego badania.
• Potrafi przestrzegać protokołu.

Wykluczenie

• Inny inwazyjny nowotwór złośliwy lub stan, który może mieć wpływ na zgodność z protokołem lub interpretację wyników.
• Kobiety w ciąży lub karmiące piersią. Dokumentacja negatywnego wyniku testu ciążowego musi być dostępna dla kobiet przed menopauzą z nienaruszonymi narządami rozrodczymi oraz dla kobiet mniej niż dwa lata po menopauzie.
• Wcześniejsza radioterapia na zajęty obszar.
• Duża operacja w ciągu 28 dni przed rozpoczęciem badania.
• Klinicznie istotna choroba układu krążenia.
• Wcześniejsza reakcja alergiczna na immunoglobuliny lub alergia na immunoglobuliny.

Projekt badania Wszyscy pacjenci zostaną poddani skanowi PET 89Zr-bevacizumabu przed operacją w 4. dniu po wstrzyknięciu znacznika (patrz: harmonogram w części 16). Wychwyt 89Zr-bevacizumabu w guzie zostanie określony ilościowo. Wyniki zostaną połączone i porównane ze standardowymi technikami obrazowania i standardową histologią nowotworu, jak również specyficznym barwieniem guza pod kątem angiogenezy, w tym barwieniem VEGF. Czułość i swoistość zostaną porównane z obrazowaniem konwencjonalnym.

Oceny ze studiów

Obrazowanie PET 89Zr-bewacyzumabem

Radioznakowanie bewacizumabu Koniugację i radioznakowanie przeciwciała monoklonalnego przeprowadza się zasadniczo tak, jak opisali Verel i wsp. (15), z niewielkimi poprawkami dotyczącymi oczyszczania. W skrócie: FTP-N-sucDf-Fe (dzięki uprzejmości dostarczone przez VU University Medical Center, Amsterdam, Holandia) skoniugowano z mAb w stosunku molowym 10:1. Następnie Fe(III) usuwa się nadmiarem EDTA (Calbiochem, San Diego, Kalifornia, USA) przez 30 min w 35°C i przeciwciało oczyszcza się przez ultrafiltrację (Vivaspin-2 Centrifugal Concentrator, filtr 30 kDa, Sartorius, Göttingen , Niemcy). To oczyszczone przeciwciało jest albo przechowywane w temperaturze -80°C, albo natychmiast używane do znakowania radioaktywnego. Skoniugowane przeciwciało dodaje się do szczawianu 89Zr (100-1000 MBq/mg mAb, dzięki uprzejmości VU University Medical Center, Amsterdam, Holandia), 0,9% NaCl (Braun Melsungen AG, Oss, Holandia), 2M Na2CO3 ( OPG Farma, Utrecht, Holandia) i bufor 0,5 M HEPES (Sigma-Aldrich, Zwijndrecht, Holandia). Po 60 minutach znakowane radioaktywnie przeciwciało oczyszcza się przez ultrafiltrację w koncentratorze wirówkowym Vivaspin-2, filtr 30 kDa, Sartorius, Getynga, Niemcy) i rozcieńcza w 0,9% NaCl/kwasie gentyzynowym (5 mg/ml, Merck Schuchardt OHG, Hohenbrunn, Niemcy) . Izotop 89Zr ma fizyczne t½ 78 godzin. 89Zr-bevacizumab ma czystość radiochemiczną >95% i doskonałą długoterminową stabilność w ludzkiej surowicy (>1 tydzień). Koniugację i radioznakowanie wykonuje się w pracowniach radiofarmacji Zakładu Medycyny Nuklearnej i Obrazowania Molekularnego zgodnie z warunkami GMP, na odpowiedzialność farmaceuty szpitalnego. Bardziej szczegółowe informacje dotyczące 89Zr-bewacyzumabu znajdują się w dokumentacji badanego produktu leczniczego (IMPD; załącznik C).

Obrazowanie PET Pacjentom zostanie wstrzyknięte dożylnie 37 MBq 89Zr-bewacyzumabu (dawka białka 5 mg) w dniu 0. Następnie obrazy zostaną wykonane 4 dni po wstrzyknięciu 89Zr-bewacyzumabu (patrz rozdział 16, aby zapoznać się z harmonogramem). Do obrazowania wykorzystana zostanie kamera Siemens PET/CT. Nagranie zostanie przeprowadzone w trybie 3D od dolnej części klatki piersiowej do szyi, w około 2 pozycjach leżących. Zakład Medycyny Nuklearnej i Obrazowania Molekularnego posiada certyfikat zgodny z normą ISO-NEN-9001. Standardowe procedury operacyjne dla skanowania dynamicznego będą stosowane dla wszystkich skanów PET. Właściwa obsługa kamery PET i akwizycja skanów będzie wykonywana przez technologa medycyny nuklearnej. Ostateczna analiza obrazu zostanie przeprowadzona przez specjalistę medycyny nuklearnej. Dystrybucja 89Zr-bevacizumabu zostanie oceniona wizualnie i ilościowo.

Większość pacjentów będzie również poddawana wykrywaniu węzła wartowniczego w celu oceny stopnia zaawansowania pachy podczas leczenia chirurgicznego guza pierwotnego. W procedurze węzła wartowniczego używany jest nanokoloid znakowany 99mTechnetem. Przewidywany czas pomiędzy podaniem 89Zr-bewacyzumabu a 99mTc-nanokoloidu wyniesie około 2 tygodni. Do tego czasu minie 7 epizodów półtrwania radioznacznika 89Zr, a jego sygnał będzie znikomy. W związku z tym nie oczekuje się interferencji sygnałów znaczników radioaktywnych.

Dawka promieniowania/bezpieczeństwo Stosowanie izotopów emitujących pozytony oznacza narażenie na promieniowanie jonizujące. Ze względu na potencjalne zagrożenia promieniowaniem, wytyczne dotyczące narażenia zdrowych ochotników są określone w „Besluit Stralingsbescherming (BS 2000), artikel 64 - en Nota van Toelichting (Staatsblad 2001, 397)”, który powołuje się na wytyczne Międzynarodowej Komisji w sprawie ochrony radiologicznej (ICRP). Ponieważ kinetyka przeciwciała bewacyzumabu jest prawie porównywalna z kinetyką trastuzumabu, oczekuje się, że dawka promieniowania bewacyzumabu znakowanego 89Zr będzie mieścić się w tym samym zakresie, co 89Zr-trastuzumab.

W celu oszacowania dawki promieniowania dla „standardowej kobiety” podczas skanowania 89Zr-trastuzumabem wykorzystano dostępne dane kinetyczne z poprzedniego obrazowania planarnego 111In-trastuzumabem. Jest to możliwe, ponieważ czas połowicznego rozpadu 111In jest tego samego rzędu wielkości co 89Zr, a zatem umożliwia nam śledzenie kinetyki znacznika w okresie czasu, który jest również istotny dla dozymetrii 89Zr. Wykorzystując serię skanów składającą się z 4 kolejnych skanów planarnych w okresie 168 godzin, obliczono czasy przebywania głównych organów źródłowych i całego ciała, dostosowując je do różnicy w okresach półtrwania nuklidów. Te czasy przebywania wprowadzono do programu OLINDA, który oblicza efektywną dawkę promieniowania za pomocą schematu MIRD. Ostateczne oszacowanie ustalono na podstawie uśrednienia wyników uzyskanych od 5 różnych pacjentów, uzyskując 18 mSv dla wstrzykniętej dawki 37 MBq. W obecnym protokole skutkowałoby to dawką promieniowania (łącznie z poprawką tłumienia dla niskodawkowej tomografii komputerowej) na poziomie 19,5 mSv dla kobiet (i 16,5 mSv dla mężczyzn). Według ICRP 62 ta dawka promieniowania mieści się w kategorii III (ryzyko umiarkowane).

Barwienie guza Oprócz standardowej oceny pooperacyjnej próbki guza zostanie przeprowadzone specyficzne barwienie białek związanych ze szlakiem VEGF, w tym barwienie VEGF, CD34 w celu określenia średniej gęstości naczyń (MVD), SMA w celu zbadania dojrzewania naczyń, HIF-1alfa w celu wykrycia niedotlenienia, receptorów VEGF , Ki 67 pod kątem proliferacji lub innego istotnego barwienia zgodnie z najbardziej aktualnymi spostrzeżeniami naukowymi.

Ocena kliniczna, badania laboratoryjne, obserwacja

Przed startem

• Badanie lekarskie
• Ocena wyników WHO (patrz załącznik B)
• Konwencjonalne obrazowanie piersi (mammografia, USG lub MRI)
• Histologiczne potwierdzenie zmiany złośliwej piersi
• Ocena kryteriów włączenia i wykluczenia
• Podpisana pisemna świadoma zgoda

Kryteria oceny

Skan PET Skany PET będą oceniane przez lekarza medycyny nuklearnej zaślepionego pod kątem informacji klinicznych i lokalizacji guza. Dane PET będą skorelowane z konwencjonalnymi danymi obrazowania. Ostateczna pooperacyjna ocena patologiczna zostanie powiązana z danymi PET.

Barwienie guza Ocena barwienia guza związanego z VEGF zostanie przeprowadzona we współpracy z patologiem, który nie ma informacji klinicznych.

Względy statystyczne

W tym studium wykonalności postulujemy wysokie wymagania, aby udowodnić czułość skanowania 89Zr-bevacizumab-PET w wykrywaniu zmian raka piersi, aby uzasadnić nasz ostateczny przyszły cel, jakim jest uzyskanie dobrego rozróżnienia między zmianami łagodnymi i przednowotworowymi / złośliwymi za pomocą obrazowania VEGF . Zapotrzebowanie na bardzo wysoką czułość wykrywania guza za pomocą skanowania 89Zr-bevacizumab-PET wymaga czułości nie gorszej niż 99%.

Zastosujemy regułę zatrzymania z błędem typu 1 wynoszącym 5% (jednostronna alfa 5%) i beta 10% (~moc 90%) oraz zewnętrznymi wartościami odniesienia dla współczynników wyników fałszywie ujemnych równych 0,01 i jako alternatywa 0.10. Obszerny opis zasady zatrzymania z dwiema granicami zawiera dodatek C.

W niniejszym opracowaniu wymagania to p0=0,01, p1=0,10, alfa(reguła)=0,05, beta(reguła)=0,10 i alfa (daremny) = 0,05. Po dokładnym obliczeniu daje to alfa(n)=0,1364, beta(N)=0,055 i alfa (daremne, n) = 0,6431, przy czym 47 to maksymalna liczba pacjentów. Przy prawdziwym współczynniku awaryjności równym 0,01 prawdopodobieństwo przekroczenia górnej granicy wynosi 0,049; przy prawdziwym współczynniku awaryjności równym 0,10 prawdopodobieństwo to wynosi 0,903. Górna granica, reprezentująca maksimum dopuszczalnych niepowodzeń, wynosi 1 w obrębie pierwszych 35 pacjentów i 2 aż do całkowitej liczby 47 pacjentów. Monitorowanie z regułą zatrzymania można przerwać (ze względu na bezskuteczność testów), gdy u pierwszych 31 pacjentów nie zostaną zauważone żadne niepowodzenia.

Procedura autoryzacji badacza

Lekarz specjalista, który będzie leczył pacjenta lub jego pielęgniarka naukowa może zapisać pacjenta do rejestracji.

Rejestracja pacjenta

Aby wprowadzić pacjentów do tego badania, w godzinach pracy należy skontaktować się z administratorem danych pod adresem:

Uniwersyteckie Centrum Medyczne Groningen Oddział Onkologii Medycznej Telefon: 050-3612053 lub strona nr 77045 Kwalifikacja zostanie sprawdzona podczas rejestracji.

Aby określić kwalifikowalność, należy podać następujące informacje:

• Inicjały
• Data urodzenia
• Wynik wydajności WHO
• Podpisana pisemna świadoma zgoda
• Data planowanej operacji (jeśli jest znana)

Formularze i procedury zbierania danych

Dane będą zbierane na papierowych formularzach ewidencji spraw (CRF). CRF będą gromadzone, a dane wprowadzane anonimowo do bazy danych Access.

Identyfikacja podmiotu Dane pacjenta są przechowywane pod kodem bez imienia, co zapewnia anonimowość.

Świadoma zgoda Wszyscy pacjenci zostaną poinformowani o celach badania, możliwych zdarzeniach niepożądanych, procedurach i możliwych zagrożeniach, na jakie będzie narażony, oraz mechanizmie przydziału leczenia. Zostaną oni poinformowani o ścisłej poufności danych ich pacjentów, ale o tym, że ich dokumentacja medyczna może być przeglądana do celów próbnych przez upoważnione osoby inne niż ich lekarz prowadzący. Przykład oświadczenia świadomej zgody pacjenta stanowi załącznik do niniejszego protokołu.

Komisja etyczna UMCG zweryfikuje lokalne dokumenty świadomej zgody przed rozpoczęciem badania.

Należy podkreślić, że przystąpienie jest dobrowolne i że pacjent może odmówić dalszego udziału w protokole, kiedy tylko zechce. Nie wpłynie to negatywnie na późniejszą opiekę nad pacjentem. Udokumentowaną świadomą zgodę należy uzyskać od wszystkich pacjentów włączonych do badania, zanim zostaną oni zarejestrowani lub zrandomizowani do badania. Należy to zrobić zgodnie z krajowymi i lokalnymi wymogami prawnymi.

Procedura świadomej zgody musi być zgodna z wytycznymi ICH dotyczącymi dobrej praktyki klinicznej. Oznacza to, że „pisemny formularz świadomej zgody powinien być podpisany i opatrzony datą własnoręcznie przez pacjenta lub przez jego prawnie akceptowanego przedstawiciela”.