Intrahepatisk reinfusjon av CD133+ stamceller hos cirrhotiske pasienter (Cirrhosis133)

TITTEL: Fase I-studie av intrahepatisk reinfusjon av høyt rensede CD133+-stamceller hos pasienter med leversykdom i sluttstadiet.

Hovedetterforsker: Roberto M. Lemoli, MD MEDETERSKERE: Pietro Andreone, MD, Francesca Bonifazi, MD; Lucia Catani, BS; Antonia D'Errico, MD; Michelangelo Fiorentino, MD; Valeria Giudice, MD; Annagiulia Gramenzi, MD; Elisabetta Loggi, BS; Stefania Lorenzini, MD; Francesco Losinno, MD; Maria Rosa Motta, BS; Simonetta Rizzi, BS; Cristina Rossi, MD.

STUDIESENTER: Azienda Ospedaliero-Universitaria di Bologna, Policlinico S.Orsola-Malpighi, Bologna - Italia, Unità Operativa di Ematologia i samarbeid med:

Unità Operativa di Semeiotica Medica Unità Operativa di Anatomia e Istologia Patologica Unità Operativa di Immunoematologia e Trasfusionale Unità Operativa di Radiologia

KLINISK FASE: Fase I

MÅL: Primær:

For å vurdere sikkerheten ved intrahepatisk reinfusjon av økende antall autologe høyt rensede CD133+ stamceller (SCs) til pasienter med leversykdom i sluttstadiet. CD133+ SC-er vil tidligere bli samlet og kryokonservert etter mobilisering med granulocytt-kolonistimulerende faktor (G-CSF) og leukaferese. Sikkerhet vil bli evaluert som forekomst av uønskede hendelser (gradert i henhold til WHO) og klinisk signifikant unormal laboratorieverdi etter reinfusjon av SCs.

Sekundær:

For å vurdere gjennomførbarheten av immunomagnetisk seleksjon av autologe CD133+-celler samlet med leukaferese fra det perifere blodet (PB) hos pasienter med leversykdom i sluttstadiet, tidligere mobilisert med G-CSF.

For å vurdere effekten av intrahepatisk reinfusjon av høyt rensede CD133+-celler på gjenværende leverfunksjon til pasientene. Spesielt vil følgende verdier overvåkes: syntese av proteiner (albumin), syntese av koagulasjonsfaktorer (protrombintid, INR, fibrinogen, antitrombin III, tromboplastintid), bilirubinemi, proliferativ aktivitet, biosyntetisk kapasitet (kolesterol, pseudocholinesterase) .

For å vurdere effekten av behandlingen på produksjonen av utvalgte cytokiner under administrering av G-CSF og etter intrahepatisk reinfusjon av høyt rensede CD133+ SCs til pasienter med leversykdom i sluttstadiet.

STUDERE DESIGN:

Tolv pasienter vil bli innrullert i løpet av 18-24 måneder i dosefinnende fase. Studien er designet som følger: først, G-CSF (Lenograstim, Aventis Pharma eller Filgrastim, Amgen) ved 7,5 µg/kg/b.i.d. vil bli administrert subkutant (sc) fra dag 1 til fullført innsamling av perifere blodstamceller (PBSC). Innhøsting av benmarg (BM)-avledet PBSC vil begynne på dag + 4 bare hvis konsentrasjonen av CD133+ celler er > 8/uL og vil fortsette til innsamlingen av målcelledose: 0,5 x 106 CD133+ celler/Kg for første 2 pasientkohorter; 1 x 106 CD133+ celler/Kg for kohort 3 og 2 x 106 CD133+ celler/Kg for kohort 4 (se nedenfor for definisjoner). PB mononukleære celler hentet fra mobilisert standardvolum leukaferese vil bli inkubert med Macs kolloidale superparamagnetiske CD133 mikroperler (Miltenyi Biotec, Bergisch Gladbach, Tyskland) og CliniMacs enhet vil bli brukt for positiv seleksjon av CD133+ celler under god produksjonspraksis (GMP) betingelser ( se vedlegg). Kryokonservering og lagring i flytende nitrogen vil bli utført i henhold til standard prosedyrer (se vedlegg).

Minst 4 uker etter SC-mobilisering og innsamling, vil opptil 40 ml enkeltcellesuspensjon av høyt rensede autologe CD133+-celler, oppnådd etter rask tining, infunderes gjennom leverarterien ved transfemoral eller transbrachial arteriografi. Infusjonstiden vil være lavere enn 15 ml/min for å unngå trombedannelse. Hele prosedyren vil bli utført under anestesiologisk kontroll. Den intrahepatiske administrasjonsveien anses som nødvendig for å unngå potensiell massiv miltfanging av CD133+-celler etter konvensjonell intravenøs reinfusjon hos cirrhotiske pasienter. Innen 24 timer fra prosedyren vil en doppler-ultrasonografi av cøliakistammen bli utført for å utelukke trombotiske hendelser i mesenterialdistriktet.

I henhold til modifisert Fibonaccis inkrementregel vil høyt rensede G-CSF-mobiliserte CD133+-celler administreres til pasienter fra 5x104/kg pasientens kroppsvekt og økes hver 3. pasient. Maksimal infundert celledose vil være 1x106/kg (se nedenfor). Lenograstim eller Filgrastim ved 5 µg/kg/dag vil bli administrert sc i 3 dager etter reinfusjon av SCs (dag 0 til dag +2) for utvidelse av dem og for å indusere en selektiv proliferativ fordel av reinfunderte celler in vivo.

ANTALL PASIENTER OG TIDSRAMME: Tolv pasienter vil bli innrullert innen 18-24 måneder i dosefinnefasen.

DIAGNOSE OG INKLUSJONSKRITERIER: Signert informert samtykke. Alder >18. Karnofsky score > 70 % eller WHO <1. Tilstrekkelig nyre- (serumkreatinin < 2 mg/dl) og lungefunksjon (Sat O2 > 96 %). Diagnose av avansert leversykdom i sluttstadiet definert av en Mayo Model for End Stage Liver Disease (MELD)-score mellom 17 og 25.

Pasienter med følgende leversykdomsetiologier vil bli registrert i studien: kronisk viral hepatitt B, kronisk viral hepatitt C, kronisk viral hepatitt D, alkoholisk cirrhose, primær skleroserende kolangitt, primær biliær cirrhose, Wilsons sykdom, genetisk hemokromatose eller jernoverskudd. cirrhosis, skrumplever på grunn av ikke-alkoholisk steato-hepatitt. Pasienter med alkoholisk levercirrhose bør ha trukket tilbake alkohol aktivt inntak for å bli registrert i studien.

Kvalifisering for ortotopisk levertransplantasjon (OLT) er ikke en kontraindikasjon for å delta i den kliniske studien. Pasienter på venteliste for OLT-transplantasjon vil ikke bli trukket tilbake og vil bli transplantert så snart en passende donor blir tilgjengelig. Deres MELD-poengsum vil forbli den registrerte tidligere SC-infusjonen i tilfelle forbedring etter den eksperimentelle prosedyren.

Tilstedeværelsen av cirrhose-relaterte symptomer, som ascites, perifert ødem, tilbakevendende blødninger fra mage-tarmkanalen, tilbakevendende encefalopati representerer ikke store kontraindikasjoner for å delta i studien. Pasientene kan anses som kvalifiserte når de er klinisk stabile.

UTSLUTTELSESKRITERIER: HIV-positivitet. Gravide eller ammende kvinner. Nåværende ukontrollert infeksjon. Interkurrent organskade. Diagnose av hepatokarsinom. Komplett portal trombose. Alvorlig svekkelse av koagulasjonsfunksjonen (PT < 30 %, INR> 2,5, blodplater < 40x109/L) som vil kontraindisere arteriografi. Grad IV splenomegali.

Budd-Chiari syndrom med sovrahepatisk venetrombose og skrumplever av ukjent opprinnelse vil ikke bli inkludert i studien.