Intrahepatisk reinfusion af CD133+ stamceller hos cirrosepatienter (Cirrhosis133)

TITEL: Fase I undersøgelse af intrahepatisk reinfusion af højt oprensede CD133+ stamceller hos patienter med leversygdom i slutstadiet.

PRINCIPAL UNDERSØGER: Roberto M. Lemoli, MD MEDUNDERSØGERE: Pietro Andreone, MD, Francesca Bonifazi, MD; Lucia Catani, BS; Antonia D'Errico, MD; Michelangelo Fiorentino, MD; Valeria Giudice, MD; Annagiulia Gramenzi, MD; Elisabetta Loggi, BS; Stefania Lorenzini, MD; Francesco Losinno, MD; Maria Rosa Motta, BS; Simonetta Rizzi, BS; Cristina Rossi, MD.

STUDIECENTER: Azienda Ospedaliero-Universitaria di Bologna, Policlinico S.Orsola-Malpighi, Bologna - Italien, Unità Operativa di Ematologia i samarbejde med:

Unità Operativa di Semeiotica Medica Unità Operativa di Anatomia e Istologia Patologica Unità Operativa di Immunoematologia e Trasfusionale Unità Operativa di Radiologia

KLINISK FASE: Fase I

MÅL: Primært:

At vurdere sikkerheden ved den intrahepatiske reinfusion af et stigende antal autologe højt oprensede CD133+ stamceller (SC'er) til patienter med leversygdom i slutstadiet. CD133+ SC'er vil tidligere blive opsamlet og kryokonserveret efter mobilisering med granulocyt-kolonistimulerende faktor (G-CSF) og leukaferese. Sikkerhed vil blive evalueret som forekomsten af ​​uønskede hændelser (graderet i henhold til WHO) og klinisk signifikant abnorm laboratorieværdi efter reinfusion af SC'er.

Sekundær:

At vurdere gennemførligheden af ​​den immunomagnetiske selektion af autologe CD133+-celler indsamlet med leukaferese fra det perifere blod (PB) hos patienter med leversygdom i slutstadiet, tidligere mobiliseret med G-CSF.

At vurdere virkningerne af den intrahepatiske reinfusion af højt oprensede CD133+-celler på patienternes resterende leverfunktion. Især vil følgende værdier blive overvåget: syntese af proteiner (albumin), syntese af koagulationsfaktorer (protrombintid, INR, fibrinogen, antithrombin III, tromboplastintid), bilirubinæmi, proliferativ aktivitet, biosyntetisk kapacitet (kolesterol, pseudocholinesterase) .

At vurdere virkningerne af behandlingen på produktionen af ​​udvalgte cytokiner under administration af G-CSF og efter intrahepatisk reinfusion af højt oprensede CD133+ SC'er til patienter med leversygdom i slutstadiet.

STUDERE DESIGN:

Tolv patienter vil blive indskrevet inden for 18-24 måneder i dosisfindingsfasen. Undersøgelsen er designet som følger: i første omgang G-CSF (Lenograstim, Aventis Pharma eller Filgrastim, Amgen) ved 7,5 µg/Kg/b.i.d. vil blive administreret subkutant (sc) fra dag 1 indtil afslutningen af ​​perifere blodstamceller (PBSC) indsamling. Høst af knoglemarv (BM)-afledt PBSC vil kun begynde på dag + 4, hvis koncentrationen af ​​CD133+ celler er > 8/uL og vil blive fortsat indtil opsamlingen af ​​målcelledosis: 0,5 x 106 CD133+ celler/Kg for første 2 kohorter af patienter; 1 x 106 CD133+ celler/kg for kohorte 3 og 2 x 106 CD133+ celler/kg for kohorte 4 (se nedenfor for definitioner). PB mononukleære celler opnået fra mobiliseret standardvolumen leukaferese vil blive inkuberet med Macs kolloide superparamagnetiske CD133 mikroperler (Miltenyi Biotec, Bergisch Gladbach, Tyskland) og CliniMacs enhed vil blive brugt til positiv udvælgelse af CD133+ celler under god fremstillingspraksis (GMP) betingelser ( se vedhæftede filer). Kryokonservering og opbevaring i flydende nitrogen vil blive udført i henhold til standardprocedurer (se vedhæftede filer).

Mindst 4 uger efter SC-mobilisering og -opsamling vil op til 40 ml enkeltcellesuspension af højt oprensede autologe CD133+-celler, opnået efter hurtig optøning, blive infunderet gennem leverarterien ved transfemoral eller transbrachial arteriografi. Infusionstiden vil være lavere end 15 ml/min for at undgå tromberdannelse. Hele proceduren vil blive udført under anæstesiologisk kontrol. Den intrahepatiske indgivelsesvej anses for nødvendig for at undgå den potentielle massive miltfangning af CD133+-celler efter konventionel intravenøs reinfusion hos cirrosepatienter. Inden for 24 timer efter indgrebet vil der blive udført en doppler-ultralyd af cøliakistammen for at udelukke trombotiske hændelser i mesenterialområdet.

I henhold til modificeret Fibonacci's inkrementregel vil højt oprensede G-CSF-mobiliserede CD133+-celler blive administreret til patienter, der starter fra 5x104/kg patientens kropsvægt og øges for hver 3. patient. Den maksimale infunderede celledosis vil være 1x106/kg (se nedenfor). Lenograstim eller Filgrastim ved 5 µg/kg/dag vil blive administreret sc i 3 dage efter reinfusion af SC'er (dag 0 til dag +2) for deres ekspansion og for at inducere en selektiv proliferativ fordel ved reinfunderede celler in vivo.

ANTAL PATIENTER OG TIDSRAMME: Tolv patienter vil blive indskrevet inden for 18-24 måneder i dosisfindingsfasen.

DIAGNOSE OG INKLUSIONSKRITERIER: Underskrevet informeret samtykke. Alder >18. Karnofsky score > 70 % eller WHO <1. Tilstrækkelig nyrefunktion (serumkreatinin < 2 mg/dl) og lungefunktion (Sat O2 > 96%). Diagnose af fremskreden leversygdom i slutstadiet defineret af en Mayo Model for End Stage Liver Disease (MELD) score mellem 17 og 25.

Patienter med følgende leversygdomsætiologier vil blive inkluderet i undersøgelsen: kronisk viral hepatitis B, kronisk viral hepatitis C, kronisk viral hepatitis D, alkoholisk cirrhose, primær skleroserende kolangitis, primær biliær cirrhose, Wilsons sygdom, genetisk hæmokromatose eller jernoverbelastning skrumpelever, skrumpelever på grund af ikke-alkoholisk steato-hepatitis. Patienter med alkoholisk levercirrhose bør have trukket alkoholaktivt indtag tilbage for at blive optaget i undersøgelsen.

Berettigelse til ortotopisk levertransplantation (OLT) er ikke en kontraindikation for at deltage i den kliniske undersøgelse. Patienter på venteliste til OLT-transplantation vil ikke blive trukket tilbage og vil blive transplanteret, så snart en passende donor bliver tilgængelig. Deres MELD-score vil forblive den registrerede tidligere SCs-infusion i tilfælde af forbedring efter den eksperimentelle procedure.

Tilstedeværelsen af ​​cirrhose-relaterede symptomer, såsom ascites, perifert ødem, tilbagevendende blødninger fra mave-tarmkanalen, tilbagevendende encefalopati repræsenterer ikke væsentlige kontraindikationer for at blive optaget i undersøgelsen. Patienterne kan betragtes som egnede, når de er klinisk stabile.

EXKLUSIONSKRITERIER: HIV-positivitet. Gravide eller ammende kvinder. Aktuel ukontrolleret infektion. Intercurrent organskade. Diagnose af hepatokarcinom. Komplet portaltrombose. Alvorlig svækkelse af koagulativ funktion (PT< 30 %, INR>2,5, blodplader < 40x109/L), som ville kontraindicere arteriografi. Grad IV splenomegali.

Budd-Chiari Syndrom med sovrahepatisk venetrombose og skrumpelever af ukendt oprindelse vil ikke indgå i undersøgelsen.