Reinfusión intrahepática de células madre CD133+ en pacientes cirróticos (Cirrhosis133)

TÍTULO: Estudio de fase I de reinfusión intrahepática de células madre CD133+ altamente purificadas en pacientes con enfermedad hepática terminal.

INVESTIGADOR PRINCIPAL: Roberto M. Lemoli, MD COINVESTIGADORES: Pietro Andreone, MD, Francesca Bonifazi, MD; Lucía Catani, BS; Antonia D'Errico, MD; Miguel Ángel Fiorentino, MD; Valeria Giudice, MD; Dra. Annagiulia Gramenzi; Elisabetta Loggi, Licenciada en Ciencias; Stefania Lorenzini, MD; Francesco Losinno, MD; María Rosa Motta, BS; Simonetta Rizzi, Licenciada en Ciencias; Dra. Cristina Rossi.

CENTRO DE ESTUDIO: Azienda Ospedaliero-Universitaria di Bologna, Policlinico S.Orsola-Malpighi, Bologna - Italia, Unità Operativa di Ematologia en colaboración con:

Unità Operativa di Semeiotica Medica Unità Operativa di Anatomia e Istologia Patologica Unità Operativa di Immunoematologia and Trasfusionale Unità Operativa di Radiologia

FASE CLÍNICA: Fase I

OBJETIVO(S): Principal:

Evaluar la seguridad de la reinfusión intrahepática de cantidades cada vez mayores de células madre (SC) CD133+ autólogas altamente purificadas a pacientes con enfermedad hepática en etapa terminal. Las SC CD133+ se recolectarán previamente y se criopreservarán después de la movilización con factor estimulante de colonias de granulocitos (G-CSF) y leucaféresis. La seguridad se evaluará como la incidencia de eventos adversos (clasificados según la OMS) y el valor de laboratorio anormal clínicamente significativo después de la reinfusión de SC.

Secundario:

Evaluar la viabilidad de la selección inmunomagnética de células autólogas CD133+ extraídas mediante leucoaféresis de sangre periférica (SP) de pacientes con enfermedad hepática terminal, previamente movilizadas con G-CSF.

Evaluar los efectos de la reinfusión intrahepática de células CD133+ altamente purificadas sobre la función hepática residual de los pacientes. En particular, se controlarán los siguientes valores: síntesis de proteínas (albúmina), síntesis de factores de la coagulación (tiempo de protrombina, INR, fibrinógeno, antitrombina III, tiempo de tromboplastina), bilirrubinemia, actividad proliferativa, capacidad biosintética (colesterol, pseudocolinesterasa) .

Evaluar los efectos del tratamiento sobre la producción de citoquinas seleccionadas durante la administración de G-CSF y después de la reinfusión intrahepática de SC CD133+ altamente purificadas a pacientes con enfermedad hepática en etapa terminal.

DISEÑO DEL ESTUDIO:

Se inscribirán doce pacientes en un plazo de 18 a 24 meses en la fase de búsqueda de dosis. El estudio se ha diseñado de la siguiente manera: en un principio, G-CSF (Lenograstim, Aventis Pharma o Filgrastim, Amgen) a 7,5 µg/Kg/b.i.d. se administrará por vía subcutánea (sc) desde el día 1 hasta la finalización de la recolección de células madre de sangre periférica (PBSC). La recolección de PBSC derivadas de médula ósea (BM) comenzará el día + 4 solo si la concentración de células CD133+ es > 8/uL y continuará hasta la recolección de la dosis de células objetivo: 0,5 x 106 células CD133+/Kg para la primeras 2 cohortes de pacientes; 1 x 106 células CD133+/kg para la cohorte 3 y 2 x 106 células CD133+/kg para la cohorte 4 (consulte las definiciones a continuación). Las células mononucleares PB obtenidas de la leucoaféresis de volumen estándar movilizado se incubarán con microesferas superparamagnéticas coloidales de CD133 Macs (Miltenyi Biotec, Bergisch Gladbach, Alemania) y se utilizará el dispositivo CliniMacs para la selección positiva de células CD133+ en condiciones de buenas prácticas de fabricación (GMP) ( ver adjuntos). La crioconservación y el almacenamiento en nitrógeno líquido se realizarán de acuerdo con los procedimientos estándar (ver anexos).

Al menos 4 semanas después de la movilización y recolección SC, se infundirán a través de la arteria hepática mediante arteriografía transfemoral o transbraquial hasta 40 ml de suspensión de células individuales de células CD133+ autólogas altamente purificadas, obtenidas después de una descongelación rápida. El tiempo de infusión será inferior a 15 ml/min para evitar la formación de trombos. Todo el procedimiento se realizará bajo control anestesiológico. La vía de administración intrahepática se considera necesaria para evitar el posible atrapamiento masivo de células CD133+ en el bazo después de la reinfusión intravenosa convencional en pacientes cirróticos. Dentro de las 24 horas posteriores al procedimiento, se realizará una ecografía doppler del tronco celíaco para excluir eventos trombóticos del distrito mesentérico.

De acuerdo con la regla de incremento de Fibonacci modificada, las células CD133+ movilizadas con G-CSF altamente purificadas se administrarán a pacientes a partir de 5x104/kg de peso corporal del paciente y se incrementarán cada 3 pacientes. La dosis máxima de células infundidas será de 1x106/kg (ver más abajo). Lenograstim o Filgrastim a 5µg/Kg/día se administrarán sc durante 3 días después de la reinfusión de SCs (día 0 a día +2) para su expansión e inducir una ventaja proliferativa selectiva de las células reinfundidas in vivo.

NÚMERO DE PACIENTES Y MARCO DE TIEMPO: Doce pacientes se inscribirán dentro de los 18 a 24 meses en la fase de búsqueda de dosis.

DIAGNÓSTICO Y CRITERIOS DE INCLUSIÓN: Consentimiento informado firmado. Edad >18. Puntuación de Karnofsky > 70% o OMS < 1. Función renal (creatinina sérica < 2 mg/dl) y pulmonar (Sat O2 > 96%) adecuada. Diagnóstico de enfermedad hepática avanzada en etapa terminal definida por un puntaje de Mayo Model for End Stage Liver Disease (MELD) entre 17 y 25.

Se incluirán en el estudio pacientes con las siguientes etiologías de enfermedad hepática: hepatitis viral crónica B, hepatitis viral crónica C, hepatitis viral crónica D, cirrosis alcohólica, colangitis esclerosante primaria, cirrosis biliar primaria, enfermedad de Wilson, hemocromatosis genética o sobrecarga de hierro cirrosis, cirrosis por esteatohepatitis no alcohólica. Los pacientes con cirrosis hepática alcohólica debían haber retirado el consumo de alcohol activo para ser incluidos en el estudio.

La elegibilidad para el trasplante hepático ortotópico (OLT) no es una contraindicación para participar en el estudio clínico. Los pacientes en lista de espera para trasplante de TOH no serán retirados y serán trasplantados tan pronto como se disponga de un donante adecuado. Su puntaje MELD seguirá siendo el registrado antes de la infusión de SC en caso de mejora después del procedimiento experimental.

La presencia de síntomas relacionados con la cirrosis, como ascitis, edema periférico, hemorragia gastrointestinal recurrente, encefalopatía recurrente, no representan contraindicaciones importantes para participar en el estudio. Los pacientes pueden ser considerados elegibles cuando estén clínicamente estables.

CRITERIOS DE EXCLUSIÓN: VIH positivo. Hembras gestantes o lactantes. Infección actual no controlada. Daño intercurrente de órganos. Diagnóstico de hepatocarcinoma. Trombosis portal completa. Deterioro severo de la función coagulativa (PT < 30%, INR > 2,5, Plaquetas < 40x109/L) que contraindique la arteriografía. Esplenomegalia grado IV.

El síndrome de Budd-Chiari con trombosis de la vena suprahepática y cirrosis de origen desconocido no se incluirá en el estudio.