Внутрипеченочная реинфузия стволовых клеток CD133+ у пациентов с циррозом (Cirrhosis133)

НАЗВАНИЕ: Фаза I исследования внутрипеченочной реинфузии высокоочищенных стволовых клеток CD133+ у пациентов с терминальной стадией заболевания печени.

ГЛАВНЫЙ ИССЛЕДОВАТЕЛЬ: Роберто М. Лемоли, доктор медицины Соисследователи: Пьетро Андреоне, доктор медицины, Франческа Бонифази, доктор медицины; Лючия Катани, бакалавр наук; Антония Д'Эррико, доктор медицины; Микеланджело Фиорентино, доктор медицины; Валерия Джудиче, доктор медицины; Аннаджулия Граменци, доктор медицины; Элизабетта Логги, бакалавр наук; Стефания Лоренцини, доктор медицины; Франческо Лосинно, доктор медицины; Мария Роза Мотта, бакалавр наук; Симонетта Рицци, бакалавр наук; Кристина Росси, MD.

УЧЕБНЫЙ ЦЕНТР: Azienda Ospedaliero-Universitaria di Bologna, поликлиника S.Orsola-Malpighi, Болонья - Италия, Unità Operativa di Ematologia в сотрудничестве с:

Оперативное отделение семиотической медицины. Оперативное отделение анатомии и патологии.

КЛИНИЧЕСКАЯ ФАЗА: Фаза I

ЦЕЛЬ(И): Основная:

Оценить безопасность внутрипеченочной реинфузии увеличивающегося количества аутологичных высокоочищенных стволовых клеток CD133+ (СК) пациентам с терминальной стадией заболевания печени. СК CD133+ предварительно собирают и криоконсервируют после мобилизации с помощью гранулоцитарно-колониестимулирующего фактора (Г-КСФ) и лейкафереза. Безопасность будет оцениваться по частоте нежелательных явлений (по классификации ВОЗ) и клинически значимым аномальным лабораторным значениям после реинфузии SC.

Вторичный:

Оценить возможность иммуномагнитной селекции аутологичных клеток CD133+, полученных при лейкаферезе из периферической крови (ПБ) больных с терминальной стадией заболевания печени, предварительно мобилизованных Г-КСФ.

Оценить влияние внутрипеченочной реинфузии высокоочищенных клеток CD133+ на остаточную функцию печени пациентов. В частности, будут контролироваться следующие показатели: синтез белков (альбумин), синтез факторов свертывания крови (протромбиновое время, МНО, фибриноген, антитромбин III, тромбопластиновое время), билирубинемия, пролиферативная активность, биосинтетическая способность (холестерин, псевдохолинэстераза). .

Оценить влияние лечения на продукцию отдельных цитокинов во время введения Г-КСФ и после внутрипеченочной реинфузии высокоочищенных СК CD133+ у пациентов с терминальной стадией заболевания печени.

ДИЗАЙН ИССЛЕДОВАНИЯ:

Двенадцать пациентов будут зарегистрированы в течение 18-24 месяцев на этапе подбора дозы. Исследование было разработано следующим образом: сначала Г-КСФ (ленограстим, Aventis Pharma или Filgrastim, Amgen) в дозе 7,5 мкг/кг/дважды в день. будет вводиться подкожно (sc) с 1-го дня до завершения сбора стволовых клеток периферической крови (PBSC). Сбор PBSC, происходящих из костного мозга (BM), начнется на день + 4, только если концентрация клеток CD133+ > 8/мкл, и будет продолжаться до сбора целевой дозы клеток: 0,5 x 106 клеток CD133+/кг для первые 2 когорты пациентов; 1 x 106 клеток CD133+/кг для когорты 3 и 2 x 106 клеток CD133+/кг для когорты 4 (определения см. ниже). Мононуклеарные клетки PB, полученные в результате мобилизованного лейкафереза ​​стандартного объема, будут инкубироваться с коллоидными суперпарамагнитными микрошариками CD133 Macs (Miltenyi Biotec, Бергиш-Гладбах, Германия), а устройство CliniMacs будет использоваться для положительного отбора клеток CD133+ в условиях надлежащей производственной практики (GMP) ( см вложения). Криоконсервация и хранение в жидком азоте будет осуществляться по стандартным процедурам (см. приложения).

По крайней мере, через 4 недели после мобилизации и сбора подкожно до 40 мл суспензии отдельных клеток высокоочищенных аутологичных клеток CD133+, полученных после быстрого оттаивания, вводят через печеночную артерию с помощью трансфеморальной или трансбрахиальной артериографии. Время инфузии будет ниже 15 мл/мин, чтобы избежать образования тромбов. Вся процедура будет проводиться под анестезиологическим контролем. Внутрипеченочный путь введения считается необходимым, чтобы избежать потенциального массивного захвата клеток CD133+ в селезенке после обычной внутривенной реинфузии у пациентов с циррозом печени. В течение 24 часов после процедуры будет проведена ультразвуковая допплерография чревного ствола для исключения тромботических явлений в брыжеечном отделе.

В соответствии с модифицированным правилом приращения Фибоначчи высокоочищенные клетки CD133+, мобилизованные Г-КСФ, будут вводиться пациентам, начиная с 5x104/кг массы тела пациента, и увеличиваться каждые 3 пациента. Максимальная доза вводимых клеток будет составлять 1x106/кг (см. ниже). Ленограстим или филграстим в дозе 5 мкг/кг/день будут вводить подкожно в течение 3 дней после реинфузии подкожных клеток (с дня 0 по день +2) для их увеличения и для индукции селективного пролиферативного преимущества реинфузированных клеток in vivo.

КОЛИЧЕСТВО ПАЦИЕНТОВ И ВРЕМЕННЫЕ РАМКИ: Двенадцать пациентов будут зарегистрированы в течение 18-24 месяцев на этапе подбора дозы.

ДИАГНОЗ И КРИТЕРИИ ВКЛЮЧЕНИЯ: Подписанное информированное согласие. Возраст >18. Оценка Карновского > 70% или ВОЗ <1. Адекватная функция почек (креатинин сыворотки < 2 мг/дл) и легких (Sat O2 > 96%). Диагноз запущенной терминальной стадии заболевания печени, определяемый по модели Майо для терминальной стадии заболевания печени (MELD) от 17 до 25.

В исследование будут включены пациенты со следующей этиологией заболеваний печени: хронический вирусный гепатит В, хронический вирусный гепатит С, хронический вирусный гепатит D, алкогольный цирроз, первичный склерозирующий холангит, первичный билиарный цирроз, болезнь Вильсона, генетический гемохроматоз или перегрузка железом. цирроз, цирроз вследствие неалкогольного стеатогепатита. Пациенты с алкогольным циррозом печени должны были отказаться от активного употребления алкоголя для включения в исследование.

Право на ортотопическую трансплантацию печени (ОТП) не является противопоказанием для участия в клиническом исследовании. Пациенты из списка ожидания на трансплантацию ОТП не будут отозваны и будут трансплантированы, как только появится подходящий донор. Их оценка MELD останется той, что была зарегистрирована до инфузии SC, в случае улучшения после экспериментальной процедуры.

Наличие симптомов, связанных с циррозом печени, таких как асцит, периферические отеки, рецидивирующие желудочно-кишечные кровотечения, рецидивирующая энцефалопатия, не являются серьезными противопоказаниями для включения в исследование. Пациентов можно считать подходящими, когда они клинически стабильны.

КРИТЕРИИ ИСКЛЮЧЕНИЯ: ВИЧ-инфекция. Беременные или кормящие самки. Текущая неконтролируемая инфекция. Интеркуррентное поражение органов. Диагностика гепатокарциномы. Полный портальный тромбоз. Тяжелое нарушение свертывающей функции (ПВ < 30%, МНО > 2,5, тромбоциты < 40x109/л), противопоказывающее артериографию. Спленомегалия IV степени.

Синдром Бадда-Киари с тромбозом надпеченочной вены и циррозом печени неизвестного происхождения не будет включен в исследование.