Intrahepatische herfusie van CD133+ stamcellen bij cirrotische patiënten (Cirrhosis133)

TITEL: Fase I-studie van intrahepatische herfusie van sterk gezuiverde CD133+-stamcellen bij patiënten met terminale leverziekte.

HOOFDONDERZOEKER: Roberto M. Lemoli, MD CO-ONDERZOEKERS: Pietro Andreone, MD, Francesca Bonifazi, MD; Lucia Catani, BS; Antonia D'Errico, MD; Michelangelo Fiorentino, arts; Valeria Giudice, MD; Annagiulia Gramenzi, MD; Elisabetta Loggi, BS; Stefania Lorenzini, arts; Francesco Losinno, MD; Maria Rosa Motta, BS; Simonetta Rizzi, BS; Cristina Rossi, arts.

STUDIECENTRUM: Azienda Ospedaliero-Universitaria di Bologna, Policlinico S.Orsola-Malpighi, Bologna - Italia, Unità Operativa di Ematologia in samenwerking met:

Medische Semeiotica Eenheid van Anatomische en Istologische Patologische Operaties van Immuno-ematologie en Trasfusionale Eenheid van Radiologische Operaties

KLINISCHE FASE: Fase I

DOELSTELLING(EN): Primair:

Om de veiligheid te beoordelen van de intrahepatische herinfusie van een toenemend aantal autologe sterk gezuiverde CD133+-stamcellen (SC's) bij patiënten met leverziekte in het eindstadium. CD133 + SC's zullen eerder worden verzameld en ingevroren na mobilisatie met granulocyt-koloniestimulerende factor (G-CSF) en leukaferese. De veiligheid zal worden geëvalueerd als de incidentie van bijwerkingen (gegradeerd volgens de WHO) en klinisch significante abnormale laboratoriumwaarden na herinfusie van SC's.

Ondergeschikt:

Om de haalbaarheid te beoordelen van de immunomagnetische selectie van autologe CD133+-cellen die zijn verzameld met leukaferese uit het perifere bloed (PB) van patiënten met terminale leverziekte, eerder gemobiliseerd met G-CSF.

Om de effecten te beoordelen van de intrahepatische herinfusie van sterk gezuiverde CD133+-cellen op de resterende leverfunctie van de patiënten. In het bijzonder zullen de volgende waarden worden gecontroleerd: synthese van eiwitten (albumine), synthese van stollingsfactoren (protrombinetijd, INR, fibrinogeen, antitrombine III, tromboplastinetijd), bilirubinemie, proliferatieve activiteit, biosynthesecapaciteit (cholesterol, pseudocholinesterase) .

Om de effecten van de behandeling op de productie van geselecteerde cytokines te beoordelen tijdens de toediening van G-CSF en na de intrahepatische herinfusie van zeer gezuiverde CD133+ SC's aan patiënten met leverziekte in het eindstadium.

STUDIE ONTWERP:

Twaalf patiënten zullen binnen 18-24 maanden worden ingeschreven in de dosisbepalingsfase. De studie was als volgt opgezet: in eerste instantie G-CSF (Lenograstim, Aventis Pharma of Filgrastim, Amgen) met 7,5 µg/kg/b.i.d. zal subcutaan (sc) worden toegediend vanaf dag 1 tot de voltooiing van de verzameling van perifere bloedstamcellen (PBSC). De oogst van beenmerg (BM)-afgeleide PBSC begint alleen op dag + 4 als de concentratie van CD133+-cellen > 8/uL is en wordt voortgezet tot het verzamelen van de doelceldosis: 0,5 x 106 CD133+-cellen/kg voor de eerste 2 patiëntencohorten; 1 x 106 CD133+-cellen/kg voor cohort 3 en 2 x 106 CD133+-cellen/kg voor cohort 4 (zie hieronder voor definities). Mononucleaire PB-cellen verkregen uit gemobiliseerde leukaferese met standaardvolume zullen worden geïncubeerd met Macs colloïdale superparamagnetische CD133-microbeads (Miltenyi Biotec, Bergisch Gladbach, Duitsland) en het CliniMacs-apparaat zal worden gebruikt voor de positieve selectie van CD133+-cellen onder good manufacturing practice (GMP)-omstandigheden ( zie bijlagen). Cryopreservatie en opslag in vloeibare stikstof zullen worden uitgevoerd volgens standaardprocedures (zie bijlagen).

Ten minste 4 weken na SC-mobilisatie en verzameling wordt tot 40 ml enkelvoudige celsuspensie van sterk gezuiverde autologe CD133+-cellen, verkregen na snel ontdooien, door middel van transfemorale of transbrachiale arteriografie geïnfundeerd via de leverslagader. De infusietijd zal lager zijn dan 15 ml/min om trombivorming te voorkomen. De gehele procedure zal worden uitgevoerd onder anesthesiologische controle. De intrahepatische toedieningsroute wordt noodzakelijk geacht om de mogelijke massale insluiting van CD133+-cellen in de milt na conventionele intraveneuze herinfusie bij patiënten met cirrose te voorkomen. Binnen 24 uur na de procedure wordt een doppler-echografie van de coeliakiestam uitgevoerd om trombotische voorvallen van het mesenteriale district uit te sluiten.

Volgens de gewijzigde incrementregel van Fibonacci zullen sterk gezuiverde G-CSF-gemobiliseerde CD133+-cellen worden toegediend aan patiënten vanaf 5x104/kg lichaamsgewicht van de patiënt en elke 3 patiënten worden verhoogd. De maximale geïnfundeerde celdosis is 1x106/kg (zie hieronder). Lenograstim of Filgrastim in een dosering van 5 µg/kg/dag zal sc worden toegediend gedurende 3 dagen na de herinfusie van de SC's (dag 0 tot dag +2) voor hun expansie en om een ​​selectief proliferatief voordeel van opnieuw ingebrachte cellen in vivo te induceren.

AANTAL PATIËNTEN EN TIJDSCHEMA: Twaalf patiënten zullen binnen 18-24 maanden worden ingeschreven in de dosisbepalingsfase.

DIAGNOSE EN INSLUITINGSCRITERIA: Ondertekende geïnformeerde toestemming. Leeftijd >18. Karnofsky-score > 70% of WHO <1. Adequate nierfunctie (serumcreatinine < 2 mg/dl) en longfunctie (Sat O2 > 96%). Diagnose van gevorderde leverziekte in het eindstadium gedefinieerd door een Mayo-model voor eindstadium leverziekte (MELD)-score tussen 17 en 25.

Patiënten met de volgende etiologieën van de leverziekte zullen in het onderzoek worden opgenomen: chronische virale hepatitis B, chronische virale hepatitis C, chronische virale hepatitis D, alcoholische cirrose, primaire scleroserende cholangitis, primaire biliaire cirrose, de ziekte van Wilson, genetische hemochromatose of ijzerstapeling cirrose, cirrose als gevolg van niet-alcoholische steato-hepatitis. Patiënten met alcoholische levercirrose moeten gestopt zijn met actieve alcoholconsumptie om aan het onderzoek deel te nemen.

Geschiktheid voor orthotope levertransplantatie (OLT) is geen contra-indicatie om deel te nemen aan de klinische studie. Patiënten die op de wachtlijst staan ​​voor OLT-transplantatie worden niet teruggetrokken en worden getransplanteerd zodra er een geschikte donor beschikbaar is. Hun MELD-score blijft de geregistreerde eerdere SC-infusie in het geval van verbetering na de experimentele procedure.

De aanwezigheid van aan cirrose gerelateerde symptomen, zoals ascites, perifeer oedeem, terugkerende bloedingen van het maagdarmkanaal, terugkerende encefalopathie vormen geen belangrijke contra-indicaties voor deelname aan het onderzoek. De patiënten kunnen in aanmerking komen als ze klinisch stabiel zijn.

UITSLUITINGSCRITERIA: HIV-positiviteit. Zwangere of zogende vrouwtjes. Huidige ongecontroleerde infectie. Intercurrente orgaanschade. Diagnose van hepatocarcinoom. Volledige portale trombose. Ernstige verslechtering van de stollingsfunctie (PT < 30%, INR> 2,5, bloedplaatjes < 40x109/L) die artheriografie zou contra-indiceren. Graad IV splenomegalie.

Syndroom van Budd-Chiari met sovhepatische veneuze trombose en cirrose van onbekende oorsprong zullen niet in het onderzoek worden opgenomen.