Intrahepatisk reinfusion av CD133+ stamceller hos cirrospatienter (Cirrhosis133)

TITEL: Fas I-studie av intrahepatisk reinfusion av högrenade CD133+ stamceller hos patienter med leversjukdom i slutstadiet.

HUVUDUNDERSÖKARE: Roberto M. Lemoli, MD MEDUTREDARE: Pietro Andreone, MD, Francesca Bonifazi, MD; Lucia Catani, BS; Antonia D'Errico, MD; Michelangelo Fiorentino, MD; Valeria Giudice, MD; Annagiulia Gramenzi, MD; Elisabetta Loggi, BS; Stefania Lorenzini, MD; Francesco Losinno, MD; Maria Rosa Motta, BS; Simonetta Rizzi, BS; Cristina Rossi, MD.

STUDIECENTER: Azienda Ospedaliero-Universitaria di Bologna, Policlinico S.Orsola-Malpighi, Bologna - Italia, Unità Operativa di Ematologia i samarbete med:

Unità Operativa di Semeiotica Medica Unità Operativa di Anatomia e Istologia Patologica Unità Operativa di Immunoematologia e Trasfusionale Unità Operativa di Radiologia

KLINISK FAS: Fas I

MÅL: Primärt:

Att bedöma säkerheten för intrahepatisk reinfusion av ett ökande antal autologa högrenade CD133+ stamceller (SC) till patienter med leversjukdom i slutstadiet. CD133+ SCs kommer tidigare att samlas in och kryokonserveras efter mobilisering med granulocyt-kolonistimulerande faktor (G-CSF) och leukaferes. Säkerheten kommer att utvärderas som incidensen av biverkningar (bedömd enligt WHO) och kliniskt signifikant onormalt laboratorievärde efter återinfusion av SCs.

Sekundär:

För att bedöma genomförbarheten av det immunomagnetiska urvalet av autologa CD133+-celler insamlade med leukaferes från det perifera blodet (PB) hos patienter med leversjukdom i slutstadiet, tidigare mobiliserade med G-CSF.

Att bedöma effekterna av intrahepatisk reinfusion av högrenade CD133+-celler på kvarvarande leverfunktion hos patienterna. I synnerhet kommer följande värden att övervakas: syntes av proteiner (albumin), syntes av koagulationsfaktorer (protrombintid, INR, fibrinogen, antitrombin III, tromboplastintid), bilirubinemi, proliferativ aktivitet, biosyntetisk kapacitet (kolesterol, pseudocholinesteras) .

Att bedöma effekterna av behandlingen på produktionen av utvalda cytokiner under administrering av G-CSF och efter intrahepatisk reinfusion av högrenade CD133+ SC till patienter med leversjukdom i slutstadiet.

STUDERA DESIGN:

Tolv patienter kommer att inkluderas inom 18-24 månader i dossökningsfasen. Studien har utformats enligt följande: till en början, G-CSF (Lenograstim, Aventis Pharma eller Filgrastim, Amgen) vid 7,5 µg/Kg/b.i.d. kommer att administreras subkutant (sc) från dag 1 tills insamlingen av perifera blodstamceller (PBSC) är avslutad. Skörd av benmärg (BM)-härledd PBSC kommer att påbörjas på dag + 4 endast om koncentrationen av CD133+-celler är > 8/uL och kommer att fortsätta tills insamlingen av målcelldosen: 0,5 x 106 CD133+-celler/Kg för första 2 kohorter av patienter; 1 x 106 CD133+-celler/kg för kohort 3 och 2 x 106 CD133+-celler/kg för kohort 4 (se nedan för definitioner). PB mononukleära celler erhållna från mobiliserad standardvolym leukaferes kommer att inkuberas med Macs kolloidala superparamagnetiska CD133 mikropärlor (Miltenyi Biotec, Bergisch Gladbach, Tyskland) och CliniMacs enhet kommer att användas för positivt urval av CD133+ celler under god tillverkningssed (GMP) förhållanden ( se bifogade filer). Kryokonservering och lagring i flytande kväve kommer att utföras enligt standardprocedurer (se bilagor).

Minst 4 veckor efter SC-mobilisering och uppsamling, kommer upp till 40 ml enkelcellsuspension av högrenade autologa CD133+-celler, erhållna efter snabb upptining, att infunderas genom leverartären genom transfemoral eller transbrachial arteriografi. Infusionstiden kommer att vara lägre än 15 ml/min för att undvika trombbildning. Hela proceduren kommer att utföras under anestesiologisk kontroll. Den intrahepatiska administreringsvägen bedöms vara nödvändig för att undvika den potentiella massiva mjältinfångningen av CD133+-celler efter konventionell intravenös reinfusion hos cirrospatienter. Inom 24 timmar efter ingreppet kommer en doppler-ultraljud av celiakistammen att utföras för att utesluta trombotiska händelser i mesenterialområdet.

Enligt modifierad Fibonaccis inkrementregel kommer högrenade G-CSF-mobiliserade CD133+-celler att administreras till patienter med start från 5x104/kg patientens kroppsvikt och ökas var tredje patient. Den maximala infunderade celldosen kommer att vara 1x106/kg (se nedan). Lenograstim eller Filgrastim med 5 µg/kg/dag kommer att administreras subkutant i 3 dagar efter återinfusion av subkutanta celler (dag 0 till dag +2) för deras expansion och för att inducera en selektiv proliferativ fördel av återinfunderade celler in vivo.

ANTAL PATIENTER OCH TIDSRAM: Tolv patienter kommer att skrivas in inom 18-24 månader i dossökningsfasen.

DIAGNOS OCH INKLUSIONSKRITERIER: Undertecknat informerat samtycke. Ålder >18. Karnofsky-poäng > 70 % eller WHO <1. Tillräcklig njurfunktion (serumkreatinin < 2 mg/dl) och lungfunktion (Lör O2 > 96 %). Diagnos av avancerad leversjukdom i slutstadiet definierad av en Mayo Model for End Stage Lever Disease (MELD) poäng mellan 17 och 25.

Patienter med följande leversjukdomsetiologier kommer att inkluderas i studien: kronisk viral hepatit B, kronisk viral hepatit C, kronisk viral hepatit D, alkoholisk cirros, primär skleroserande kolangit, primär biliär cirros, Wilsons sjukdom, genetisk hemokromatos eller järnöverskott cirros, skrumplever på grund av icke alkoholisk steato-hepatit. Patienter med alkoholisk levercirros bör ha dragit tillbaka alkoholaktiv konsumtion för att få delta i studien.

Behörighet för ortotopisk levertransplantation (OLT) är inte en kontraindikation för att delta i den kliniska studien. Patienter på väntelista för OLT-transplantation kommer inte att dras in och kommer att transplanteras så snart en lämplig donator blir tillgänglig. Deras MELD-poäng kommer att förbli den registrerade tidigare SCs-infusionen i händelse av förbättring efter den experimentella proceduren.

Förekomsten av cirrosrelaterade symtom, som ascites, perifert ödem, återkommande blödningar från mag-tarmkanalen, återkommande encefalopati representerar inte några större kontraindikationer för att inkluderas i studien. Patienterna kan anses vara lämpliga när de är kliniskt stabila.

EXKLUSIONSKRITERIER: HIV-positivitet. Gravida eller ammande kvinnor. Aktuell okontrollerad infektion. Interkurrent organskada. Diagnos av hepatokarcinom. Komplett portaltrombos. Allvarlig försämring av koagulativ funktion (PT<30%, INR>2,5, Trombocyter <40x109/L) som skulle kontraindicera arteriografi. Splenomegali grad IV.

Budd-Chiaris syndrom med sovrahepatisk ventrombos och cirros av okänt ursprung kommer inte att inkluderas i studien.