Prospektiv undersøkelse av oksidativt stress ved virusinfeksjon i West Nile (PROWENI)

WNND

40 personer med West-Nile Neuroinvasive Disease vil bli rekruttert

WNF

40 personer med West-Nile Fever vil bli rekruttert

kontroller

20 kontroll vil bli rekruttert. Disse kontrollene vil bli alderstilpasset til sakene.

Mål redoksstatusen

En multiparameterindeks for oksidativt stress vil bli beregnet for å måle og oppsummere redoksstatus i tilfeller og alderstilpassede kontroller. Sammenheng mellom redoksstatus og kliniske, nevropsykologiske og radiologiske utfall vil bli undersøkt. Vi vil også undersøke den relative sensitiviteten til separate biomarkører for oksidativt stress og autofagi som kliniske prediktorer for alvorlighetsgraden av WNV-infeksjon.

Vurdering av nevrologiske mangler

Som en del av den beskrivende analysen av biomarkører for sykdommens alvorlighetsgrad og for å studere nevrologiske følgevirkninger av WNV-infeksjon. Vil bli vurdert: spesifikt vurderinger av kraniale nerver II-XII, motorisk styrke i øvre og nedre ekstremiteter, sensorisk testing for nålestikk og vibrasjon, dype senereflekser, gange, koordinasjon og bevegelsesavvik

Nevropsykologisk ytelse

Studer de nevropsykologiske følgene av WNV-infeksjon i løpet av en 12-måneders oppfølgingsperiode i følgende nøkkeldomener: Oppmerksomhet, hukommelse, eksekutiv funksjon, emosjon og sosial kognisjon, psykomotorisk hastighet

Longitudinell vurdering av funksjonsstatus Studer de nevrologiske og nevropsykologiske følgene av WNV-infeksjon i løpet av en 12-måneders oppfølgingsperiode.

ECOG/WHO PS under en 12-måneders oppfølging.

MR-avvik

Del av beskrivende analyse av kliniske markører for sykdommens alvorlighetsgrad

Jerninnhold i hjernen

En del av den beskrivende analysen av kliniske markører for sykdommens alvorlighetsgrad: Kvalitativ analyse per nevroanatomisk region etter jernsensitiv MR-sekvens (SWI)

Oftalmologiske abnormiteter

Som en del av den beskrivende analysen av kliniske markører for sykdomsgrad vil oftalmologiske abnormiteter bli vurdert ved spaltelampeundersøkelse

serum S100b konsentrasjon

Som en del av den beskrivende analysen av kliniske markører for sykdommens alvorlighetsgrad vil S100b-konsentrasjonen bli målt for å vurdere blod-hjerne-barrierens integritet

serum NSE-konsentrasjon

Som en del av den beskrivende analysen av kliniske markører for sykdommens alvorlighetsgrad vil NSE-konsentrasjonen bli målt for å vurdere blod-hjerne-barrierens integritet

Analyse av laboratorieytelseskarakteristikker (f.eks. sensitivitet) av WNV-spesifikk RT-PCR og viral isolasjon i kliniske prøver, sammenlignet med sammensatt diagnose av WNV-infeksjon

Bekreftet WNV-infeksjon er definert som ett eller flere av følgende kriterier:

1. Serokonvertering av anti-WNV IgG-antistoffer (Indirekte immunfluorescenstesting (IIFT) Flavivirus 2, Euroimmun®, Lübeck, Tyskland) i rekonvalesentserum (20 dager etter symptomdebut) (alle deltakere)
2. 4 ganger økning av anti-WNV IgG antistoffer i rekonvalesent serum sammenlignet med screeningprøven (IIFT).
3. Anti-WNV IgM-antistoffdeteksjon (ELISA) i CSF* (ved VBH) (*CSF prøvetas kun når klinisk indisert).
4. Positiv WNV-spesifikk RT-PCR resulterer i serum, urin eller CSF i prøver tatt ved screening.
5. Virusisolering ved utvekstanalyse i prøver tatt ved screening

Beskrivelse av molekylær epidemiologi for infisering av WNV-stamme(r) og diagnostisk ytelse for viral utvekst.

Tidsrammen for WNV-deteksjon etter symptomdebut ved sanntids revers transkriptase-polymerasekjedereaksjon (RT-PCR) eller virusisolering ved utvekst fra blod eller CSF er begrenset av den raske nedgangen av sirkulerende virus. Fordi WNV RNA-deteksjonsvinduet i urin kan være lengre (opptil 14 dager), vil RT-PCR bli utført på alle kliniske prøver ved rekruttering. Målsekvensene er en konservert region i 5'UTR-regionen og en del av kapsidgenet til WNV og detekterer både avstamning 1 og 2 WNV. WNV har blitt vellykket isolert fra urin, i ca. 40 % av prøvene tatt innen 8 dager etter symptomdebut. WNV-isolering vil bli forsøkt i lavpassasje Vero E6-celler og BHK21-celler fra urinprøver med høy WNV RNA-belastning (syklusterskel (Ct)- verdier

Identifikasjon av potensielle genetiske signaturer som korrelerer med virulens (nevro-invasjon og sykelighet) i vår kohort.

Helgenomsekvensering (WGS) vil bli utført på en undergruppe av RT-PCR positive serum-, urin- og CSF-prøver. Dette vil tillate oss å undersøke den tidsmessige og romlige kompartmentaliseringen av West Nile-linjene i Romania, samt utvide vår forståelse av genetisk kompartmentalisering i verter (urin, serum, CSF). I tillegg vil de oppnådde isolatene bli sekvensert (fra den virale utvekstanalysen) for å vurdere potensielle tilpasninger viruset gjennomgår under isolering. Til slutt, i en genomomfattende assosiasjonsstudie, vil de oppnådde virale sekvensene bli sammenlignet med de prospektivt innsamlede kliniske dataene, for å identifisere potensielle genetiske signaturer som korrelerer med virulens, nevroinvasjon og sykelighet. Våre data vil bli sammenlignet med eksisterende data om genetiske determinanter for virulens som tilstedeværelsen av et glykosyleringssted i E-proteinet, substitusjoner i ikke-strukturelle proteiner 3, 4B eller 5, eller variasjon i 3'-ikke-kodende regionen.