Morfologia plemników w dużym powiększeniu u mężczyzn płodnych (FERTIFORT)

Badana populacja składała się z 50 mężczyzn w wieku od 18 do 45 lat z potwierdzoną spontaniczną płodnością. Wszyscy badani wyrazili świadomą zgodę na udział w badaniu. Po przeprowadzeniu wywiadu lekarskiego i andrologicznego pobrano próbki nasienia drogą masturbacji po 2-5 dniach abstynencji seksualnej i poddano analizie po upłynnieniu przez 20 minut w temperaturze 37°C. Przeprowadziliśmy liczbę plemników, ich ruchliwość, żywotność i konwencjonalną analizę morfologiczną, a także szczegółową analizę morfometryczną wakuoli przy dużym powiększeniu za pomocą oprogramowania do analizy obrazu. Do analizy przy dużym powiększeniu pięćdziesiąt mikrolitrów świeżych plemników przemyto w 2,5 ml roztworu do przemywania przez wirowanie przez 5 minut przy 400 g. Osad ponownie zawieszono w 100 µl roztworu do przemywania i plemniki utrwalono przez dodanie 100 µl 3,7% soli fizjologicznej buforowanej fosforanami i formaldehydem. Dwa mikrolitry tej zawiesiny umieszczono w naczyniu ze szklanym dnem i zbadano za pomocą kontrastowej mikroskopii interferencyjnej Nomarskiego z kamerą zamontowaną na mikroskopie z soczewką zanurzeniową x100. Dla każdej próbki analizowano wakuole główek plemników na 100 plemnikach, które losowo sfotografowano i oddzielnie analizowano za pomocą oprogramowania do cyfrowego obrazowania. Pomiary z wykorzystaniem oprogramowania były wykonywane przez jednego operatora. Moduł Pomiarów Interaktywnych umożliwia pomiar powierzchni główki plemnika i powierzchni wakuoli poprzez ręczne zobrazowanie ich zarysu. Rejestrowano powierzchnię i położenie każdej wakuoli.